Page 159 - 《广西植物》2022年第4期

࿗ 期 席银凯等᧥ 大花蕙兰ጸ黄金小神童ᆥ胚性愈伤组织诱导及植株再生研究 ᤃ ऐ ጢ

ዛ঎ 培养 Ꭾʛ 后ᖔ膨大的侧芽茎尖ଫ ଧ঎ 培养 ሕԡ ʛ 后ᖔ愈伤组织与原球茎发生ଫ ࣷ঎ 培养 ᤃԡ ʛ 后ᖔ体视镜下的愈伤组织与原球茎的混合物ᤥ
ዛ঎ ዶ஦ᡷᔀʢ Ꭾ ʛ ዹࣼ᤟ᡷࣼʢᔀᖔ ༁औᆍ᤟᤟ᔀႿ ༁ᡷᔀቝ ᡷᔽᡱ ᆍ஦ ᤟ᑕᡷᔀʢᑕ᤟ ᤦࣼʛଫ ଧ঎ ዶ஦ᡷᔀʢ ሕԡ ʛ ዹࣼ᤟ᡷࣼʢᔀᖔ ዹᑕ᤟᤟ࣼ༁ ᑕႿʛ ᡱʢᆍᡷᆍዹᆍʢቝ ᆍዹዹࣼʢʢᔀʛଫ ࣷ঎ ዶ஦ᡷᔀʢ ᤃԡ ʛ ዹࣼ᤟ᡷࣼʢᔀᖔ ᡷၤᔀ ቝᔽ଴ᡷࣼʢᔀ
ᆍ஦ ᡷၤᔀ ዹᑕ᤟᤟ࣼ༁ ᑕႿʛ ᡷၤᔀ ᡱʢᆍᡷᆍዹᆍʢቝ ࣼႿʛᔀʢ ༁ᡷᔀʢᔀᆍ༁ዹᆍᡱᔀ঎
图 ϟজ 起始培养
èᔽ੫঎ ϟজ ᧧Ⴟᔽᡷᔽᑕ᤟ ዹࣼ᤟ᡷࣼʢᔀ

因数间极差按降序的方式排列为 ቴ ྉ ϟ঎ጢጢ࿗ɯ ᢦ 中ᖔ仅少数原球茎可以直接发育为幼苗ᖔ效果并不
ᤃ᥋ାዶ
ቴ 椰汁 ྉԡ঎ሕ԰ᤃɯ ᢦቴ 蔗糖 ྉԡ঎԰ᤃԡɯ ᢦ ቴ ጶʢʢᆍʢ ྉԡ঎ϟँ࿗ɯᖔ这 ሕ 种 理想ᤥ 因此ᖔ将原球茎团块进行丛芽发生培养ᖔ培
因素的 ቴ 值均大于空白列ᖔ表明 ሕ 种因素对胚性 养结果见表 ጢᤥ
愈伤组织和原球茎发生与增殖的效应均是可靠 表 ጢ 完全组合实验结果表明ᖔ在 શዶዶ 浓度一
的ᤥ 由方差分析结果可知ྉ 表 ሕɯᖔᤃ᥋ାዶ 对胚性愈 定的情况下ᖔ丛芽发生系数和增殖系数与 ᤃ᥋ାዶ 呈
᥋ϟ
伤组织和原球茎发生与增殖有统计学意义ྉ ۗ ጐ 正相关ଫ当 ᤃ᥋ାዶ 为 ϟ঎ԡ ቝ੫ኼᓂ 时ᖔ达到最大值ଫ当
ԡ঎ԡጢɯᖔ椰汁与蔗糖则无统计学意义ྉۗᢦԡ঎ԡጢɯᤥ 对 ᤃ᥋ାዶ 浓度超过 ϟ঎ጢ ቝ੫ኼᓂ 时呈负相关ᤥ 在此阶
᥋ϟ
ᤃ᥋ାዶ 的 ሕ 个水平进行 ᧕ࣼႿዹᑕႿ 检验ྉ 表 ࿗ɯ 可知ᖔᤃ᥋ 段的各实验组中ᖔ虽然原球茎团块均能发育成幼
ାዶ 的水平 ሕྉ԰঎ԡ ቝ੫ኼᓂ ɯ 对胚性愈伤组织和原 芽ᖔ但丛芽发生系数与增殖系数上存在显著差异ᤥ
᥋ϟ
球茎发生与增殖的效果较其他两个水平ྉԡ঎ϟ ቝ੫ኼ 其中ᖔऐ 号的丛芽长势相对较好ᖔ丛芽发生系数与
ᓂ 与 ϟ঎ԡ ቝ੫ኼᓂ ɯ 显著ᤥ 通过平均值分析ᖔጸ 黄金 增殖系数最高ᖔ分别为 ϟ԰঎ሕ࿗ 和 ጢ঎ሕᤃଫ在其他组中ᖔ
᥋ϟ
᥋ϟ
小神童ᆥ胚性愈伤组织和原球茎的发生与增殖同 幼芽的生长较慢ᖔ且丛芽发生系数与增殖系数均
᥋ϟ
步培养的最佳培养基为 ዶ ା ऊ ྉ԰঎ԡ ቝ੫ኼᓂ ᤃ᥋ାዶ շ 低于 ऐ 号培养基ᤥ 因此ᖔ最佳的丛芽发生与增殖
ሕ ሕ ϟ
ϟጢԡ ቝᓂኼᓂ 椰汁 շ ԰ԡ ੫ኼᓂ 蔗糖ɯᖔ在此培养基 培养基为 ऐ 号ᖔ即 ᥘ୩ շ ϟ঎ԡ ቝ੫ኼᓂ ᤃ᥋ାዶ շ ϟ঎ԡ
᥋ϟ
᥋ϟ
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中ᖔ培养 Ꭾԡ ʛ 后增殖系数达到 ऐ঎ϟሕᤥ ቝ੫ኼᓂ શዶዶᤥ 在此培养基中ᖔ将 ϟዹቝ ġ ϟዹቝ 大
在此培养基中ᖔ培养 ϟጢ ʛ 后ᖔ胚性愈伤组织与 小原球茎团块转入 ऐ 号培养基培养 ϟጢ ʛ 后ᖔ原球
原球茎混合物的颜色由嫩绿逐渐转变为深绿ྉ 图 茎团块表面有白色芽点出现ྉ 图 ሕ᧥ዶɯଫ培养 ԰ጢ ʛ
԰᧥ዶᖔାɯଫ培养 ࿗ጢ ʛ 后ᖔ肉眼可见其体积逐渐增大ᖔ 后ᖔ从体视镜下观察到原球茎顶端第一片真叶形
从体视镜下观察到其质地紧密ᖔ形成由原球茎组 成ྉ图 ሕ᧥ାɯଫ培养 ሕጢ ʛ 后ᖔ 伴随原球茎团块增大
成的桑葚状团块ྉ图 ԰᧥ऊɯଫ培养 Ꭾԡ ʛ 后ᖔ培养基表 的同时在 体视镜下观察到锥形丛芽形成 ྉ 图 ሕ᧥
面基本被原球茎覆盖ྉ 图 ԰᧥᧕ɯᖔ此时在进行下一 ऊɯଫ培养 ጢԡ ʛ 后原球茎团块增殖速度逐渐减慢ᖔ
阶段的转接中发现ᖔ原球茎下面还存在少量的胚 大量丛芽发生ྉ图 ሕ᧥᧕ɯᤥ
性愈伤组织ᖔ为了保证丛芽发生的一致性ᖔ在下一 从ጸ黄金小神童ᆥ的实际情况来看ᖔ培养至此阶
阶段转接过程中ᖔ只转接表面的原球茎团块ᖔ尽量 段ᖔ发生的丛芽纤细且瘦弱ᖔ若直接进行生根培养ᖔ
舍弃下面的胚性愈伤组织ᖔ故此阶段计算的增殖 移栽成活率较低ᤥ 故将生长 ᤃԡ ʛ 的幼苗再接入 ऐ
系数为原球茎增殖系数ᤥ 号培养基中进行复壮培养ྉ图 ࿗᧥ዶͱऊɯᖔ连续培养 ሕ
ԣॹᇺ 丛芽发生培养 代后ᖔ不仅可以解决苗纤细ܦ瘦弱ܦ成活率低的问
在胚性愈伤组织和原球茎发生与增殖的培养 题ᖔ而且每代培养均可保持良好的增殖系数ᤥ