Page 7 - 《广西植物》2021年第4期

࿗ 期 王美娜等᧥ 兰科植物菌根真菌研究新见解 ࿗ ऐ ँ
真菌双方或其中一方有利好作用ྉ ׹ᑕႿ ʛᔀʢ ̀ᔀᔽᢼʛᔀႿ ԣॹϓ 经典研究方法ᗘᗘᗘ分离ܓ培养ܓ鉴定

ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡϟጢɯᤥ 这些真菌的主要作用是养分转移ᖔ ԰঎ϟ঎ϟ 组织表面消毒分离法জ 经典的研究方法是
它们的菌丝在生长过程中可以从根部进入到土壤 随着兰科菌根真菌的分类而兴起的ᤥ 最早的菌根

中以搜寻和获取限制植物生长的营养ᖔ如硝酸盐 真菌分离培养体系在 ԰ԡ 世纪初由 ାᔀʢႿᑕʢʛ 创建ᖔ
和磷酸盐等ᖔ之后这些营养物质被传递到它们的 即组织表面消毒分离法ᤥ 该方法的操作步骤如
寄主植物ᖔ有时可以换取菌根真菌自身生长所需 下᧥首先用流水冲洗兰科植物组织表面ᖔ去除表面
附属物ܦ表面微生物ଫ然后用消毒剂进行表面消
的碳水化合物ྉ୩ቝᔽᡷၤ ᪲ ኏ᔀᑕʛᖔ԰ԡԡऐɯᤥ
除菌根真菌外ᖔ植物根部或类根器官中还存 毒ᖔ再用无菌水冲洗去除消毒剂ଫ最后将兰科植物
在数量更为庞大的内生真菌ᖔ它们当中不与植物 组织块切成小段或小片ᖔ接种在培养基上ᖔ在适当

形成共生关系或暂时缺乏证据能与植物形成共生 的温度下培养ᖔ 可 分 离 获得菌根真菌 ྉାᔀʢႿᑕʢʛᖔ
ϟँԡ࿗ɯᤥ 该方法因操作简便且不需要复杂的仪器
关系ᖔ并且不存在致病真菌的典型解剖特征ྉዶʛʛᢃ
设备而被广泛应用ᖔ但无法完全避免组织表面杂
ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡԡጢɯᖔ这类真菌类群称为非菌根内生真菌
菌的污染ᖔ不能保证分离出来的真菌全部都是菌
ྉႿᆍႿ᥋ቝᢃዹᆍʢʢၤᔽझᑕ᤟ ʢᆍᆍᡷ᥋ᑕ༁༁ᆍዹᔽᑕᡷᔀʛ ஦ࣼႿ੫ᔽᖔ኏ዶèɯᤥ
根真菌ᤥ 后人针对该方法的缺点进行了改良ᖔ如
ϓॹԣ 根内生真菌与根内生微生物
使用酒精ܦ双氧水ܦ升汞ܦ硝酸银等作为消毒剂ᖔ现
根内生真菌是指在植物生活史的某一时期生
多使用多种消毒剂组合的方法进行消毒ᖔ最为常
活在根系或类根器官当中所有的真菌类群ᖔ既包
用的是酒精ͱ次氯酸盐组合消毒法ᤥ
含了菌根真菌ܦ非菌根内生真菌ᖔ同时又可能包含
԰঎ϟ঎԰ 单菌丝团分离法জ 该方法是从组织内将菌
了致病真菌ᤥ 根内生微生物则是包含植物根系或
丝团挑出来进行培养的方法ᤥ 最早的成熟的单菌
类根器官中内生真菌ܦ细菌ܦ病毒等所有微生物的
丝团分离体系是由 ۼᑕʢዹࣼᡱ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ ྉ ϟँᤃᎮɯ 建立的ᤥ
总和ᤥ 内生微生物是植物体内潜在的生物化学合
该种方法大大提高了菌根真菌分离的准确度ᖔ但
成器 ྉ ऊၤࣼҴᑕ᤟ᆍ ᪲ ᣽ʢᔽ༁ၤႿᑕᖔ ԰ԡϟऐଫ ୩ᑕʢ༁ᑕᔽᢃᑕ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ
同时存在很大的缺点ᖔ如菌丝团容易结合到一起
԰ԡϟँɯᤥ
而很难分开ᖔ培养基冷却温度难以控制等ᤥ 针对
ϓॹᇺ 兰科菌根真菌
这些缺点ᖔ朱国胜ྉ԰ԡԡँɯ对该种方法进行了改良᧥
兰科菌根真菌ྉᆍʢዹၤᔽʛ ቝᢃዹᆍʢʢၤᔽझᑕ ஦ࣼႿ੫ᔽᖔᨃᥘèɯᖔ
首先将根段进行表面消毒ᖔ刮取细胞内部菌丝团ᖔ
是指与兰科植物根系ྉ或类根器官ɯ 形成内共生关
配制成菌丝团悬液ଫ然后接种于多个分离的琼脂
系或兰花单向利好关系的真菌类群ᖔ属于内生真
培养基 上ᤥ 改 良 后此种方法有效解决了上述
菌ᤥ 兰科菌根真菌大多数情况下不属于真正意义
缺点ᤥ
上的共生真菌ᖔ相当大的程度上兰科植物是利用 ԰঎ϟ঎ሕ 原生境种子诱捕法জ 原生境种子诱捕法是
和欺骗菌根真菌为其生长提供营养ᖔ而菌根真菌 指将兰科植物的种子套袋后播种到其原来生境中
不能从其宿主兰科植物中获得任何好处ྉఋᑕᢃ᤟ᆍʢ ᪲ 进行萌发试验ᖔ待其萌发后从原球茎中定向分离
ାʢࣼႿ༁ᖔϟँँᎮɯᤥ 兰科菌根真菌与其他类型的菌根 菌根真菌的方法ྉ ኏ᑕ༁ቝࣼ༁༁ᔀႿ ᪲ ۼၤᔽ੫ၤᑕቝᖔϟँँሕɯᤥ
真菌相比具有极大的独特性ᖔ它们的斑块化非常 该种方法有利于兰科植物种子萌发阶段促生菌的
明显ᖔ很少与地下生态系统中其他类型的菌根真 发现ᤥ 原生境种子诱捕法能够有效避免人工栽培

菌重叠ྉ׹ᑕႿ ʛᔀʢ ̀ᔀᔽᢼʛᔀႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡϟጢɯᤥ 条件下兰科植物与其菌根真菌专一性改变的问
题ᖔ使数据更加真实严谨ᤥ
԰জ 兰科菌根真菌研究方法概述 ԰঎ϟ঎࿗ 非原生境播种诱捕法জ 该方法由 ାʢࣼႿʛʢᔀᡷᡷ ᔀᡷ
ᑕ᤟঎ྉ԰ԡԡሕɯ建立ᤥ 非原生境播种诱捕法ᖔ也称实验
根据研究方法的发展历程ᖔ可以将兰科菌根 室播种诱捕法ᖔ是指将原生境的枯枝落叶ܦ土壤等

真菌的研究方法归纳为几大类ᤥ 基质取回实验室ᖔ在实验室内进行种子播种诱捕ᖔ