Page 119 - 《广西植物》2022年第9期

ँ 期 谢 宇 峰 等 ᧥ 寡聚核苷酸介导的基因突变技术创制抗除草剂烟草新种质 ϟ ጢ ጢ ጢ
计突变碱基的嵌合体分别命名为 ऊၤ᤟᥋ጢऐऐ 和 ऊၤ᤟᥋
ϟᎮϟँྉ图 ሕɯᤥ
ԣॹᇺ 烟草品种ጝᣞᇺԣᣤᆋ愈伤组织诱导及敏感性分析
通过优化的愈伤诱导培养基获得了嫩绿色至
淡黄色ܦ结构致密的愈伤组织ᖔ可用于后续氯磺隆
敏感试验和抗性芽诱导实验ᤥ 烟草品种ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ愈
图 ϟজ 基因枪轰击实验模拟流程图 伤组织形成后ᖔ接种于含有不同浓度氯磺隆的筛
èᔽ੫঎ ϟজ è᤟ᆍऔ ዹၤᑕʢᡷ ᆍ஦ ༁ᔽቝࣼ᤟ᑕᡷᔽᆍႿ ᤦᢃ ੫ᔀႿᔀ ੫ࣼႿ
选培养基中生长 ϟ 周ᖔ愈伤组织的颜色从低浓度
ᤦᆍቝᤦᑕʢʛቝᔀႿᡷ ᔀ଴ᡱᔀʢᔽቝᔀႿᡷ
到高浓度分组颜色由绿色变黄直至黑色ྉ图 ࿗ɯᤥ

ዛ঎ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ的 ዛᒦ୒ 基因 ۪ऊ኏ 扩增ྉ᤹ 代表 ᧕શዶ ԰ ԡԡԡ ᤦᡱ 标记ଫ ዛϟͱዛሕ 均代表 ୩ࣼ኏ዶ èᣰ ୩ࣼ኏ዶ ኏ 扩增产物ଫ ଧϟͱଧሕ 均代表 ୩ࣼ኏ା
èᣰ ୩ࣼ኏ା ኏ 扩增产物ɯᤥ ଧͱࣷ঎ ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥዛᒦ୒ ୒ࣩቴዛ 和ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥዛᒦ୒ ୒ࣩቴଧ 测序结果ᤥ
ዛ঎ ۪ऊ኏ ᑕቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ ੫ᔀႿᔀ ྉ ᤹ ʢᔀᡱʢᔀ༁ᔀႿᡷ༁ ԰ ԡԡԡ ᤦᡱ ᥘᑕʢҴᔀʢଫ ዛϟͱዛሕ ʢᔀᡱʢᔀ༁ᔀႿᡷ ୩ࣼ኏ዶ èᣰ ୩ࣼ኏ዶ ኏ ᑕቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿଫ ଧϟͱଧሕ
ʢᔀᡱʢᔀ༁ᔀႿᡷ ୩ࣼ኏ା èᣰ ୩ࣼ኏ା ኏ ᑕቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿɯ঎ ଧͱࣷ঎ ఋၤᔀ ᡱʢᆍʛࣼዹᡷ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔽႿ੫ ᆍ஦ ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ ୒ࣩቴዛ ᑕႿʛ ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ ୒ࣩቴଧ঎
图 ԰জ 烟草品种ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ的 ዛᒦ୒ 基因扩增及 ۪ऊ኏ 产物测序
èᔽ੫঎ ԰জ ዶቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ஦ ટᔠዞᅳᡙᔠᐹႥᐹ ᡙᐹᤇᐹዞࣩቂ ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥዛᒦ୒ ੫ᔀႿᔀ ᑕႿʛ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔽႿ੫ ᆍ஦ ۪ऊ኏ ᡱʢᆍʛࣼዹᡷ༁

在氯磺隆浓度为 ँԡܦϟԡԡ Ⴟቝᆍ᤟ኼᓂ 时ᖔ愈伤组织为 组织颜色呈棕色ᖔ且不继续生长ଫ在氯磺隆浓度达
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绿色ᖔ生长状态良好ଫ在氯磺隆浓度为 ϟϟԡܦϟ԰ԡܦ ϟᤃԡ Ⴟቝᆍ᤟ኼᓂ 时ᖔ愈伤组织呈黄黑色ᖔ逐渐发生褐
ϟሕԡܦϟ࿗ԡ Ⴟቝᆍ᤟ኼᓂ 时ᖔ愈伤组织颜色为黄色且颜色 化现象最后死亡ᤥ 因此ᖔ本研究选择氯磺隆浓度
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依次变暗ଫ当氯磺隆浓度达 ϟጢԡ Ⴟቝᆍ᤟ኼᓂ 时ᖔ愈伤 ϟጢԡ Ⴟቝᆍ᤟ኼᓂ 作为筛选的临界浓度ᤥ
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