Page 156 - 《广西植物》2023年第1期
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1 5 2                                  广  西  植  物                                         43 卷
                表 2  夹竹桃内生菌 ITS 序列 BLAST 分析
            Table 2  BLAST analysis of ITS sequence of Nerium oleander

                      相似性最高的                      最高相似性
             菌株名称                          分类号
                      类型                           Maximum
             Strain                       Accession
                      Type with the                identity
             name                           No.
                      highest similarity            (%)
             ye ̄126   果生炭疽菌               NR144783  99.80
                      Colletotrichum fructicola
             ye ̄127   香蕉球座菌               NR137716  100.00
                      Guignardia musicola
             ye ̄128   果生炭疽菌               NR144783  100.00
                      Colletotrichum fructicola
             ye ̄129   首都叶点霉               NR144914  100.00
                      Phyllosticta capitalensis
             ye ̄130   香蕉球座菌               NR137716  99.84
                      Guignardia musicola
             ye ̄131   G. alliacea         AB454263  100.00
             ye ̄132   首都叶点霉               NR144914  99.82
                      Phyllosticta capitalensis
             ye ̄133   首都叶点霉               NR144914  99.82
                      P. capitalensis
                                                              图 2  NJ 法构建的夹竹桃内生真菌 ITS 序列系统进化树图
             ye ̄134   Guignardia alliacea  AB454263  100.00
             ye ̄135   新椭圆曲霉               AB250395  99.08
                      Aspergillus neoellipticus                  Fig. 2  Phylogenetic tree of ITS rDNA sequences of
             ye ̄136   溜曲霉                MH854614   99.82         endophytic fungi of Nerium oleander by NJ method
                      A. tamarii
             jing ̄114  果生炭疽菌              NR144783  100.00
                      Colletotrichum fructicola
             jing ̄115  果生炭疽菌              NR144783  99.61      活性检测ꎮ 结果( 表 4) 显示ꎬjing ̄116、ye ̄135、ye ̄
                      C. fructicola                            136 对芽孢杆菌有较强的抑制效果ꎬ其中 jing ̄116、
             jing ̄116  柚炭疽菌               NR160823  99.63
                      C. citri ̄maximae                         ye ̄135 的抑菌圈分别为 7.98 mm 和 9.29 mmꎬye ̄
             jing ̄117  小新壳梭孢              NR119487  99.42      136 更是高达 15.36 mmꎻye ̄134 对溶藻弧菌有抑
                      Neofusicoccum parvum
             jing ̄118  果生炭疽菌              NR144783  100.00     制效 果ꎬ 抑 菌 圈 为 6. 65 mmꎻ jing ̄117、 ye ̄130、 ye ̄
                      Colletotrichum fructicola
                                                               136 对坎氏弧菌有抑制效果ꎬ抑菌圈分别为 8.28、
             jing ̄119  Nothophoma anigozanthi  NR135992  98.54
                                                               8.33、9.74 mmꎮ 抑菌实验结果表明ꎬ具有抑菌活
             jing ̄179  果生炭疽菌              NR144783  100.00
                      Colletotrichum fructicola                性的内生真菌在夹竹桃的不同组织中均有分布ꎬ
             jing ̄180  Diaporthe sp.      KU557563  98.12
                                                               其中叶片中内生真菌的抑菌活性略高于茎段ꎮ

            2.3 内生真菌在夹竹桃组织中的分布                                 3  讨论与结论
                 分离获得的内生真菌菌株中ꎬ优势属为球座菌
            属和炭疽菌属ꎬ 其中炭疽菌属为 7 株ꎬ 分离率为                              本研究从夹竹桃的叶和茎中分离到 19 株内生
            36.85%ꎬ主要分布于茎段中ꎻ球座菌属分离到 4 株                        真菌ꎬ采用形态学结合 ITS 序列分析表明其分属于
            菌ꎬ分离率为 21.05%ꎬ全部来源于叶组织ꎻ叶点霉属                        7 个属ꎬ优势属包括炭疽菌属、球座菌属、叶点霉

            分离到 3 株菌ꎬ分离率为 15.79%ꎬ曲霉属分离到 2                      属ꎬ其他还包括新壳梭孢属、曲霉属、隔孢壳科新
            株菌ꎬ分离率为 10.53%ꎬ全部来源于叶组织ꎮ 另从                        属、间座壳属ꎮ 其他学者对夹竹桃内生真菌的研
            叶片中分离到 1 株新壳梭孢属真菌ꎬ从茎段中分离                           究中也曾分离到炭疽菌属(Ramesha et al.ꎬ 2013)ꎬ

            到隔孢壳科新属、间座菌属真菌各 1 株(表 3)ꎮ                          而其他 6 个属在以往的夹竹桃内生真菌的研究中
            2.4 内生真菌抑菌活性的分析                                    较少被提及ꎬ这可能是因为球座菌属、叶点霉属、

                 挑选分离到的代表菌株进行液体发酵培养ꎮ                           新壳梭孢属、曲霉属、隔孢壳科和间座壳属较少产
            将菌丝体和发酵液在干燥箱中干燥后用浸提液进                              孢ꎬ依靠形态学的鉴定方法较难准确鉴定这些真
            行浸提ꎮ 采用浸提物对蜡样芽孢杆菌、金黄色葡                             菌ꎮ 例如ꎬ从夹竹桃中分离到 42 株内生真菌ꎬ分
            萄球菌、溶藻弧菌、坎氏弧菌和魔鬼弧菌进行抑菌                             属于 14 个类群ꎬ 依靠形态能够确认的仅包括炭疽
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