Page 160 - 《广西植物》2023年第2期
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３ ５ ４ 广 西 植 物 ４３ 卷
表 ２ ＳｐＬＥＡ１ 基因启动子部分顺式作用元件的预测
Ｔａｂｌｅ ２ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｍｅ ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｏｆ ＳｐＬＥＡ１ ｇｅｎｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ
顺式作用元件 核心序列 功能
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔ Ｃｏｒｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ
ＴＡＴＡ￣ｂｏｘ ＴＡＴＡ / ＡＴＡＴＡＴ 转录起始点－３０ 附近的核心启动子元件
Ｃｏｒｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｅｌｅｍｅｎｔ ａｒｏｕｎｄ ￣３０ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｓｔａｒｔ
ＣＡＡＴ￣ｂｏｘ ＣＡＡＴ / ＣＣＡＡＴ / ＣＡＡＡＴ 启动子和增强子区域的共同顺式作用元素
Ｃｏｍｍｏｎ ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃｅｒ ｒｅｇｉｏｎｓ
ＬＴＲ ＣＣＧＡＡＡ 参与低温反应性的顺式作用元素
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｌｏｗ￣ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ
ＭＹＢ ＣＡＡＣＡＧ / ＣＡＡＣＣＡ
ＭＢＳ ＣＡＡＣＴＧ 参与干旱诱导的 ＭＹＢ 结合点
ＭＹＢ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｄｒｏｕｇｈｔ￣ｉｎｄｕｃｔｉｌｉｔｙ
Ｉ￣ｂｏｘ ＧＴＡＴＡＡＧＧＣＣ 光反应元件的一部分
Ａ ｐａｒｔ ｏｆ ｌｉｇｈｔ￣ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ
ＧＡＲＥ￣ｍｏｔｉｆ ＴＣＴＧＴＴＧ 赤霉素反应元件
Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ￣ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ
Ｐ￣ｂｏｘ ＣＣＴＴＴＴＧ 赤霉素反应元件
Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ￣ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ
Ｇ￣Ｂｏｘ ＣＡＣＧＴＴ 参与光反应性的顺式调节元件
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｌｉｇｈｔ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ
ＡＲＥ ＡＡＡＣＣＡ 厌氧诱导所必需的顺式作用调节元件
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｎａｅｒｏｂｉｃ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ＴＧＡＣＧ￣ｍｏｔｉｆ ＴＧＡＣＧ 参与 ＭｅＪＡ 反应性的顺式作用调节元件
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ＭｅＪＡ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ
ＴＣＡ￣ｅｌｅｍｅｎｔ ＴＣＡＧＡＡＧＡＧＧ 参与水杨酸反应性的顺式作用元素
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ
ＴＧＡ￣ｅｌｅｍｅｎｔ ＡＡＣＧＡＣ 辅酶反应元件 Ａｕｘｉｎ￣ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ
ＡＣＥ ＧＡＣＡＣＧＴＡＴＧ 参与光反应性的顺式作用元素
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｌｉｇｈｔ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ
ＡＢＲＥ ＡＣＧＴＧ / 参与脱落酸反应性的顺式作用元素
ＴＡＣＧＧＴＣ / ＧＣＡＡＣＧＴＧＴＣ Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ａｂｓｃｉｓｉｃ ａｃｉｄ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ
ＭＹＣ ＣＡＴＧＴＧ / ＣＡＴＴＴＧ
ＣＧＴＣＡ￣ｍｏｔｉｆ ＣＧＴＣＡ 参与 ＭｅＪＡ 反应性的顺式作用调节元件
Ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｅｌｅｍｅｎｔ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ＭｅＪＡ ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ
用ꎬ对细胞中的酶活性与蛋白质结构起到了保护
作用ꎮ 利 用 在 线 软 件 ＳＯＰＭＡ 和 Ｓｗｉｓｓ￣Ｍｏｄｅｌ 对
ＳｐＬＥＡ１ 蛋白的二级结构和三级结构进行分析预
测ꎬ结果表明 ＳｐＬＥＡ１ 蛋白主要结构是 α￣螺旋和无
规则卷曲ꎬ与 ＬＥＡ１ 家族基因的结构特点一致ꎬ推
测 ＳｐＬＥＡ１ 蛋白通过形成 α￣螺旋与无规则结构参
与对垫状卷柏的干旱响应ꎮ 在实时荧光定量结果
分析中ꎬ可以看出 ＳｐＬＥＡ１ 基因在垫状卷柏干旱处
理后出现表达上调的趋势ꎬ在干旱 １２ ｈ 时达到峰
Ｍ 为 ＤＬ２０００ ＤＮＡ ｍａｒｋｅｒꎬ１、２、３、４ 泳道为第三轮特异引物 值ꎬ而 在 复 水 处 理 后 表 达 量 明 显 下 降ꎬ 反 映 了
ＳｐＬＥＡ１ 蛋白在受到干旱胁迫时会被诱导表达ꎬ这
ＳｐＬＥＡ１Ｑ３ 和随机引物 ＬＡＤ１￣１/ ２ / ３ / ４ 结合的 ＰＣＲ 扩增产物ꎮ
对第 ３ 泳道黑框内的产物进行回收ꎮ
可能是垫状卷柏高耐旱性的原因之一ꎮ 垫状卷柏
Ｍ ｉｓ ＤＬ２０００ ＤＮＡ ｍａｒｋｅｒꎬ ｌａｎｅｓ １ꎬ ２ꎬ ３ꎬ ａｎｄ ４ ａｒｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｒｉｍｅｒｓ
ＳｐＬＥＡ１ 基因的时空表达差异为后续过表达功能研
ＳｐＬＥＡ１Ｑ３ ａｎｄ ｒａｎｄｏｍ ｐｒｉｍｅｒｓ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
ｐｒｏｄｕｃｔｓ. Ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔ ｉｎ ｔｈｅ ｂｌａｃｋ ｂｏｘ ｏｆ Ｌａｎｅ ３. 究提供了基础ꎮ
图 ５ ＳｐＬＥＡ１ 基因启动子 ＨｉＴａｉｌ￣ＰＣＲ 扩增 本研究采用 ＨｉＴａｉｌ￣ＰＣＲ 技术扩增 ＳｐＬＥＡ１ 基
Ｆｉｇ. ５ ＨｉＴａｉｌ￣ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＳｐＬＥＡ１ ｇｅｎｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ 因启动子序列ꎬ 利用在线软件 ＰｌａｎｔＣａｒｅ 分析垫状
