Page 109 - 《广西植物》2020年第7期

７ 期 刘换换等: 北美鹅掌楸 ＣＰＰ 转录因子家族 ＬｔＴＣＸ２ 基因的克隆与分析 １ ０ ０ ５

Ａ. 二级结构ꎻ Ｂ. 三级结构ꎮ
Ａ. Ｔｅｒｔｉａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅꎻ Ｂ. Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ.
图 ５ ＬｔＴＣＸ２ 蛋白二级、三级结构预测
Ｆｉｇ. ５ Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａｎｄ ｔｅｒｔｉａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ＬｔＴＣＸ２ ｐｒｏｔｅｉｎ

表 ２ 通过 ＴａｒｇｅｔＰ１.１ 预测 ＬｔＴＣＸ２ 蛋白亚细胞定位 性 分 析 的 １５ 个 蛋 白ꎬ 还 包 括 胡 杨 ( ＸＰ ＿
Ｔａｂｌｅ ２ Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ
０１１０２６９０９.１ꎻＸＰ ＿０１１０３９７２０.１ꎻＸＰ ＿０１１０１９７８６.１)、
ＬｔＴＣＸ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｂｙ ＴａｒｇｅｔＰ１.１ Ｓｅｒｖｅｒ
银白杨(ＴＫＲ８３７０２.１)、拟南芥( ＮＰ＿００１３２８５４９.１ꎻ
可信度 ＮＰ＿００１３２８５４８.１ꎻＮＰ＿１９３２１３.５ꎻＡＥＥ８３４９６.１ꎻＮＰ＿
蛋白名称 亚细胞结构
Ｃｒｅｄｉｂｉｌｉｔｙ
Ｐｒｏｔｅｉｎ ｎａｍｅ Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ５６６７１７.１)、月季(Ｒｏｓａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓꎬＸＰ＿０２４１７９３９０.１)、白
(％)
梨(Ｐｙｒｕｓ ｂｒｅｔｓｃｈｎｅｉｄｅｒｉꎬＸＰ＿００９３４５３００.１)、绒毛状
ＬｔＴＣＸ２ 叶绿体膜 ｃＴＰ ５６.９
烟草(Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔｏｍｅｎｔｏｓｉｆｏｒｍｉｓꎬＸＰ＿００９５９１８８４.１)、
线粒体膜 ｍＴＰ ２.８
芜菁 ( Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａꎬ ＸＰ ＿ ００９１３５８２５. １ )、 野 草 莓
分泌通路信号肽 ＳＰ ０.６
(Ｆｒａｇａｒｉａ ｖｅｓｃａ ｓｕｂｓｐ. ｖｅｓｃａꎬＸＰ＿０１１４５９２０６.１)ꎬ共
其他 Ｏｔｈｅｒ ７１.６
２７ 个具有 Ｔｅｓｍｉｎ / ＴＳＯ１￣ｌｉｋｅ ＣＸＣ ２ 结构域的蛋白

表 ３ 通过 ＷｏＬＦ ＰＳＯＲＴ 预测 ＬｔＴＣＸ２ 蛋白亚细胞定位

Ｔａｂｌｅ ３ Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ＬｔＴＣＸ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｂｙ ＷｏＬＦ ＰＳＯＲＴ
内质网
蛋白名称 细胞核 叶绿体 高尔基体 线粒体基质 液泡
Ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ
Ｐｒｏｔｅｉｎ ｎａｍｅ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ Ｇｏｌｇｉ ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｍｉｔｏｃｈｏｎｏｄｒｉａｌ ｍａｔｒｉｘ Ｖａｃｕｏｌｅ
ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ
ＬｔＴＣＸ２ １４ － － － － －

序列进行进化树构建( 图 ８)ꎮ 通过 ＭＥＧＡ７ 软件 ２.４ 北美鹅掌楸 ＬｔＴＣＸ２ 基因的组织特异性表达分析

采用邻接法( Ｎｅｉｇｈｂｏｒ￣ｊｏｉｎｉｎｇꎬＮＪ) 法ꎬ设置参数自 将北美鹅掌楸花芽、根、叶、茎、萼片、花瓣、雄
展值(Ｂｏｏｔｓｔｒａｐ 值) 为１ ０００次进行进化分析ꎬ结果 蕊、雌蕊共 ８ 个组织的总 ＲＮＡ 参照说明书进行反
显示ꎬ北美鹅掌楸与莲、胡杨的 ＴＣＸ２ 蛋白明显聚 转录以获得 ｃＤＮＡꎬ以鹅掌楸的 ＬｃＡｃｔｉｎ９７ 为内参
成一个分支ꎬ说明三者进化关系较近ꎮ 基因ꎬ采用相对定量的方法进行 ＲＴ￣ｑＰＣＲꎮ 检测