Page 140 - 《广西植物》2021年第2期

԰ 期 陈朋等᧥ 粤紫萁离体再生技术研究 ሕ ԡ ሕ
ᥘ୩ܦሕ ᣰ ࿗ᥘ୩ܦϟ ᣰ ԰ᥘ୩ 和 ϟᣰ ࿗ᥘ୩ ࿗ 种基本培养基配方 ᤃጢ ʛ 后在 ᤃ᥋ାዶ 浓度低于 ϟ঎ጢ ቝ੫ኼᓂ 的培养基中
᥋ϟ
ྉ表 ԰ᖔ配方中只改变 ᥘ୩ 基本培养基配方的大量 首先观察到有绿色点状物出现ྉ 图 ϟ᧥ዶɯᖔ继续培
元素浓度分别为原来的 ϟܦሕ ᣰ ࿗ܦϟ ᣰ ԰ 和 ϟᣰ ࿗ɯᖔ进行 养发现原叶体在生长的同时开始增殖ᖔ并彼此相

继代增殖培养试验ᤥ 连成簇状ྉ图 ϟ᧥ାᖔ ऊɯᖔ几乎没有单个原叶体ଫᎮጢ ʛ
增殖原叶体量 ᢉ 培养后原叶体重量ͱ接种原叶 后才陆续在 ᤃ᥋ାዶ 浓度高于 ϟ঎ጢ ቝ੫ኼᓂ 以上的培
᥋ϟ
体重量ଫ增殖率ྉᠮɯ ᢉ 增殖原叶体重量 ᣰ 接种原叶 养基中ᖔ观察到有绿色点状物出现ᖔ继续培养原叶
体重量ġϟԡԡᤥ 体长大并在中脉部分增厚ᖔ很难见原叶体增殖ᤥ
԰ 未添加植物生长调节剂的 ϟᣰ ԰ᥘ୩ 培养基中始终未
以上试验每瓶均接入 ԰ዹቝ 左右的原叶体团 ጢ
个ᖔ每组处理接种 ϟԡ 瓶ᖔ重复 ጢ 次ᖔ࿗ጢ ʛ 左右统计 见到有绿色点状物出现ᤥ

结果ᤥ ԣॹԣ 原叶体的增殖培养
ϟ঎԰঎࿗ 原叶体中幼孢子体的形成জ 设置 ᥘ୩ܦሕ ᣰ ࿗ᥘ୩ܦ ԰঎԰঎ϟ 植物生长调节剂对原叶体增殖的影响জ 将
ϟᣰ ԰ᥘ୩ 和 ϟᣰ ࿗ᥘ୩ ࿗ 种基本培养基配方ྉ表 ሕɯᖔ以瓶 成簇状的原叶体分开后转接入增殖培养基中培

为统计单位ᖔ每个培养基接种 ጢԡ 瓶ᖔ每瓶接种 ጢ 个 养ᖔ观察到 ᤃ᥋ାዶ 与 શዶዶ 的不同浓度组合ᖔ对粤紫
԰ዹቝ 左右的原叶体团ଫ为了有利于幼孢子体的形 萁原叶体继代增殖影响的效果差异显著ᤥ 当 ᤃ᥋ାዶ
԰
᥋ϟ
成ᖔ接种的同时在固体培养基表面ᖔ添加高约 ϟቝቝ 浓度为 ԡ঎ጢ ጲ ϟ঎ԡ ቝ੫ኼᓂ 时ᖔ与 શዶዶ 组合有利于原
᥋ϟ
的无菌水ᤥ 接种后分别于 ሕጢܦ࿗ጢܦጢጢܦᤃጢ ʛ 时随机取 叶体的增殖ଫ当 ᤃ᥋ାዶ 浓度大于 ϟ঎ጢ ቝ੫ኼᓂ 时ᖔ与
出 ϟԡ 瓶ᖔ统计幼孢子体的形成情况ᤥ 重复 ጢ 次ᖔ幼 શዶዶ 组合既不利于原叶体增殖ᖔ还使原叶体的生
孢子体观察与统计以肉眼清楚可见幼叶为准ᤥ 幼 长状态发生了改变ᖔ其中脉明显增厚增大ܦ细胞脆
孢子体数每 ϟԡ 瓶为 ϟ 个统计单位ᤥ 性加大ᖔ发生变化的原叶体很难在培养基中继续
成形率ྉᠮɯᢉ ྉϟ 瓶培养基中具 ሕ 片及以上幼 增殖ᤥ

叶的单苗棵数 ᣰ 总苗数ɯ ġϟԡԡᤥ ԰঎԰঎԰ ᥘ୩ 中无机盐对原叶体增殖的影响জ 不同无
ϟ঎԰঎ጢ 生根培养জ 以 ᥘ୩ 为基本培养基分别设置吲 机盐浓度 ᥘ୩ 培养基对原叶体的生长和增殖影响

哚丁 酸 ྉ ᧧ାዶᖔ ԡ঎ϟܦԡ঎԰ܦԡ঎ሕܦԡ঎࿗ܦԡ঎ጢɯ ቝ੫ ኼ ᓂ 和 差异显著ྉ表 ԰ɯᤥ 在 ᥘ୩ 培养基中ᖔ原叶体的增殖
᥋ϟ
શዶዶྉԡ঎ϟܦԡ঎԰ܦԡ঎ሕܦԡ঎࿗ܦԡ঎ጢɯ ቝ੫ኼᓂ 共 ϟԡ 个配方 速度最快ᖔ整个原叶体团很难用肉眼辨出单个的
᥋ϟ
ྉ表 ࿗ɯᖔ将原叶体中成形的幼孢子体转入生根培 原叶体ଫ在 ሕᣰ ࿗ᥘ୩ 培养基中ᖔ原叶体增殖速度没有
养基中进行生根培养ᖔ࿗ጢ ʛ 后进行统计ᤥ 试验重 在 ᥘ୩ 培养基中快ᖔ可看到原叶体呈密集的长条
复 ጢ 次ᤥ 状ଫ在 ϟᣰ ԰ᥘ୩ 培养基中的原叶体ᖔ增殖速度没有前
以上各试验的培养基中均加入 ሕԡ ੫ኼᓂ 蔗 两者快ᖔ但是原叶体的体积和表面积明显增大ᖔ团
᥋ϟ
糖ܦᤃ঎ጢ ੫ኼᓂ 琼脂ᖔᡱ̀ ጢ঎ऐ ጲ ᤃ঎ԡᖔ培养室的培养温 块边缘的原叶体因空间足够ᖔ可形成正常的心形ଫ
᥋ϟ
度为ྉ԰ጢ ō ԰ɯቩ ᖔ光照时间 ϟᤃ ၤኼʛ ᖔ光照强度 在 ϟᣰ ࿗ᥘ୩ 培养基中ᖔ原叶体增殖速度最慢ᖔ但表面
᥋ϟ
᥋԰ ᥋ϟ 积最大ᤥ 由此可见ᖔ随着培养基中大量元素的浓
ሕᎮ ጲ ࿗ԡ ဂቝᆍ᤟ኼቝ ኼ༁ ᤥ
ϓॹᇺ 数据处理 度由 ϟᣰ ࿗ᥘ୩܀ϟᣰ ԰ᥘ୩܀ሕᣰ ࿗ᥘ୩܀ᥘ୩ 递增ᖔ原叶体
数据采用 ୩۪୩୩ ԰ϟ঎ԡ 数据统计软件进行方差 增殖的速度表现为正相关ᖔ但在 ϟᣰ ࿗ᥘ୩ 和 ϟᣰ ԰ᥘ୩
分析和多重比较分析ྉ᧕ࣼႿዹᑕႿᆥ༁ɯᤥ 培养基中原叶体能够生长发育完善ᖔ而在 ሕᣰ ࿗ᥘ୩
和 ᥘ୩ 培养中原叶体主要以营养增殖为主ᤥ
԰জ 结果与分析 ԣॹᇺ 孢子体的诱导
试验表明ᖔ培养基中添加了植物生长调节剂
ԣॹϓ 原叶体获得 的原叶体ᖔ只能不断进行增殖ᖔ很难形成孢子体幼
粤紫萁孢子经过消毒处理后ᖔ接种到不同的 苗ᖔ必须将原叶体转移到不添加任何植物生长调

萌发培养基中ᖔ在相同的培养条件下进行培养ᤥ 节剂的基本培养基中ᖔ才能促使原叶体转化成孢