Page 98 - 《广西植物》2022年第5期

ऐ ԰ ԰ 广জ 西জ 植জ 物
简称 ାዶऊᖔ批号 ऊ̀ାϟऐԡሕԡँɯܦ苯甲酰次乌头原碱
ྉ以下简称 ା̀ዶᖔ批号 ऊ̀ାϟऐԡሕԡᎮɯ 均购自成都克
洛玛生物科技有限公司ᖔ纯度均ᤠँऐᠮᤥ 川乌药
材采自于陕西省汉中市城固县三合镇龙王庙村 ԰
组ܦ四川省江油市太平镇普照村 ԰ 组ܦ四川省绵阳
市平武代坝村 ሕ 个产地各 ጢ 批ᖔ共 ϟጢ 批川乌样品ᖔ
已均被黑龙江中医药大学药学院樊锐锋副教授鉴
定均为毛茛科植物乌头ྉ ዛዞᅳႥᔠᡙࣩቂ ዞᐹʗቂᔠዞ၊ᐹᓣᤀᔠᔠɯ 的
干燥母根ᖔ保存于黑龙江中医药大学中药化学实
验室ᤥ 制川乌的炮制方法采用 ԰ԡ԰ԡ 版β 中国药
典ଭ方法蒸制ྉ中华人民共和国药典ᖔ԰ԡ԰ԡɯᤥ
高效液相色谱仪ྉ ᔀ԰ᤃँጢᖔ美国 ۼᑕᡷᔀʢ༁ 公司ɯଫ
色谱柱为 ۼᑕᡷᔀʢ༁ ୩ࣼႿèᔽʢᔀ ऊ ྉϟጢԡ ቝቝġ࿗঎ᤃ ቝቝᖔ ጢ
ϟऐ
ဂቝɯଫ旋转蒸发仪ྉᨃ୩ା᥋԰ϟԡԡᖔ日本 ጶɟጶᓂዶ 公司ɯᤥ
ϓॹԣ 方法
ϟ঎԰঎ϟ 色谱条件জ ۼᑕᡷᔀʢ༁ ୩ࣼႿèᔽʢᔀ ऊ ྉ࿗঎ᤃ ቝቝġϟጢԡ
ϟऐ
ቝቝᖔ ጢ ဂቝɯ色谱柱ᖔ流动相为乙腈ྉዶɯ ͱԡ঎԰ᠮ冰醋
酸水溶 液 ྉାᖔ 三乙胺调 ᡱ̀ 值 ᤃ঎ ԰ԡɯᖔ 梯度洗脱
ྉԡ ጲ ऐ ቝᔽႿᖔጢᠮ ጲ ϟሕᠮ ዶଫऐ ጲ ϟሕ ቝᔽႿᖔϟሕᠮ ጲ ԰ϟᠮ ዶଫ
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ዶଫጢԡ ጲ ጢሕ ቝᔽႿᖔ԰ᤃᠮ ጲ ԰ँᠮ ዶଫጢሕ ጲ ጢऐ ቝᔽႿᖔ԰ँᠮ ጲ
ሕᎮᠮ ዶଫ ጢऐ ጲ ᤃሕ ቝᔽႿᖔ ሕᎮᠮ ጲ ࿗ԡᠮ ዶଫ ᤃሕ ጲ Ꭾሕ ቝᔽႿᖔ
࿗ԡᠮ ጲ ऐԡᠮዶɯଫ体积流量 ϟ঎ԡ ቝᓂኼቝᔽႿ ଫ检测波长
᥋ϟ
԰ሕጢ Ⴟቝଫ柱温 ሕጢ ቩ ଫ进样量 ԰ԡ ဂᓂᤥ
ϟ঎԰঎԰ 对照品溶液的制备জ 分别取对照品适量ᖔ用
ԡ঎ԡϟᠮ 盐酸甲醇溶液定容ᖔ 配制成含 ᥘᔀ༁ ԡ঎ ԡᤃ
᥋ϟ ᥋ϟ
ቝ੫ኼ ቝᓂ ܦዶዹᆍ ԡ঎ ԡᤃ ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦ̀ᢃᡱ ԡ঎ ԡጢ ቝ੫ ኼ
᥋ϟ ᥋ϟ ᥋ϟ
ቝᓂ ܦାᥘዶ ԡ঎ ԡጢ ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦାዶऊ ԡ঎ ԡᤃ ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦ
᥋ϟ
ା̀ዶ ԡ঎ԡᤃ ቝ੫ኼቝᓂ 的混合对照品溶液ᖔ备用ᤥ
ϟ঎԰঎ሕ 供试品溶液制备জ 分别取川乌和制川乌粉
末ྉ过三号筛ɯ 适量置于具塞锥形瓶中ᖔ依次加入
氨试液 ԰঎ԡ ቝᓂܦ异丙醇 ԰ጢ ቝᓂ 和乙酸乙酯 ԰ጢ ቝᓂᖔ
超声提取 ԰ 次ྉሕԡԡ ۼᖔ࿗ԡ Ҵ̀झᖔ԰ጢ ቩ 以下ɯᖔ每次
ሕԡ ቝᔽႿᖔ静置过夜ᖔ过滤ᖔ合并滤液ᤥ 减压浓缩ྉ࿗ԡ
ቩ 以下ɯᖔԡ঎ԡϟᠮ盐酸甲醇溶液定容至 ጢ঎ԡ ቝᓂᖔ进
样前离心ᖔ取上清液过 ԡ঎԰԰ ဂቝ 微孔滤膜ᖔ备用ᤥ
ϟ঎԰঎࿗ 含量测定জ 取对照品适量ᖔ用 ԡ঎ԡϟᠮ盐酸甲
᥋ϟ
醇溶液 定 容ᖔ 配制成含 ᥘᔀ༁ ሕ঎ ϟᎮ ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦዶዹᆍ
᥋ϟ ᥋ϟ
ሕ঎ϟऐ ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦ̀ᢃᡱ ሕ঎ ԡԡ ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦାᥘዶ ԡ঎ ᤃϟ
᥋ϟ ᥋ϟ
ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦାዶऊ ԡ঎ ϟԡ ቝ੫ ኼ ቝᓂ ܦ ା̀ዶ ԡ঎ ϟሕ ቝ੫ ኼ
ቝᓂ 的混合对照品储备液ᖔ备用ᤥ 按ᥥϟ঎԰঎ሕɼ 项下
᥋ϟ
ᥥ供试品 溶 液制备ɼ 方法制备供试品溶液ᖔ 并按
ᥥϟ঎԰঎ϟɼ项下ᥥ色谱条件ɼ重复测定 ሕ 次ᤥ
࿗԰ 卷
ϟ঎԰঎ጢ 方法学考察
ϟ঎԰঎ጢ঎ϟ 线性关系考察জ 取ᥥϟ঎԰঎԰ɼ 项下混合对照
品储备液ᖔ梯度稀释ᖔ并按ᥥϟ঎԰঎ϟɼ 项下ᥥ 色谱条
件ɼ进样检测ᖔ记录峰面积ᤥ 横坐标ྉ ᣏɯ 为质量浓
度ܦ纵坐标ྉɔɯ为峰面积ᖔ进行线性回归ᖔ分别得到
线性回归方程ᤥ
ϟ঎԰঎ጢ঎԰ 精密度考察জ 取ᥥϟ঎԰঎԰ɼ 项下混合对照品
储备液ᖔ按ᥥϟ঎԰঎ϟɼ 项下ᥥ 色谱条件ɼ 重复测定 ጢ
次ᖔ记录峰面积ᤥ
ϟ঎԰঎ጢ঎ሕ 稳定性考察জ 取川乌样品ྉ୩ϟɯ 适量ᖔ按
ᥥϟ঎԰঎ሕɼ 项下ᥥ 供试品溶液制备ɼ 方法制备供试品
溶液ᖔ并按ᥥϟ঎԰঎ϟɼ项下ᥥ 色谱条件ɼ 分别于室温在
ԡܦ԰ܦ࿗ܦऐܦϟ԰ܦ԰࿗ ၤ 进样检测ᖔ记录峰面积ᤥ
ϟ঎԰঎ጢ঎࿗ 重复性考察 জ 取川乌样品 ྉ୩ϟɯ ጢ 份ᖔ按
ᥥϟ঎԰঎ሕɼ 项下ᥥ 供试品溶液制备ɼ 方法制备供试品
溶液ᖔ并按ᥥϟ঎԰঎ϟɼ 项下ᥥ 色谱条件ɼ 进样检测ᖔ记
录峰面积ᤥ
ϟ঎԰঎ጢ঎ጢ 加样回收率考察জ 取已知含量的川乌样品
ྉ୩ϟɯ适量ᖔ按一定比例ྉጢԡᠮܦϟԡԡᠮܦϟጢԡᠮɯ 加入
混合 对照品储备液 ྉ ᥘᔀ༁ܦ ዶዹᆍܦ ̀ᢃᡱܦ ାᥘዶܦ ାዶऊܦ
ା̀ዶɯᖔ按ᥥϟ঎԰঎ሕɼ 项下ᥥ 供试品溶液制备ɼ 方法制
备供试品溶液ᖔ并按ᥥϟ঎԰঎ϟɼ 项下ᥥ 色谱条件ɼ 重复
测定 ሕ 次ᖔ记录各峰面积ᤥ
ϟ঎԰঎ᤃ 指纹图谱的建立জ 分别取混合对照品溶液ܦ
ϟጢ 批川乌和 ϟጢ 批制川乌制备的供试品溶液ᖔ按
ᥥϟ঎԰঎ϟɼ 项下ᥥ 色谱条件ɼ 进样检测ᖔ记录色谱图ᤥ
其混合对照品色谱图见图 ϟᤥ 将所得 ϟጢ 批川乌及
ϟጢ 批制川乌的图谱导入到ᥥ 中药色谱指纹图谱相
似度评价系统ྉ԰ԡϟ԰ 版ɯɼ 中ᖔ设 ୩ϟ 样品的图谱为
参照图谱ᖔ时间窗宽度设为 ԡ঎ϟ ቝᔽႿᖔ选用中位数
法ᖔ进行多点校正ᖔ以全谱峰进行峰匹配ᖔ生成对
照指纹图谱ᖔ分别得到 ϟጢ 批川乌与 ϟጢ 批制川乌样
品的指纹图谱及其对照指纹图谱ᖔ见图 ԰ 与图 ሕᤥ
԰জ 结果与分析
ԣॹϓ 相似度分析
川乌样品 ୩ϟ ጲ ୩ϟጢ 与参照指纹图谱的相似度
结果 分 别 为 ԡ঎ ँ࿗ँܦ ԡ঎ ँ࿗ऐܦ ԡ঎ ँጢϟܦ ԡ঎ ᎮᎮᤃܦ ԡ঎ ँጢ԰ܦ
ԡ঎ँԡ԰ܦԡ঎ ँ԰ᤃܦԡ঎ ँ԰ጢܦԡ঎ ँ԰ሕܦԡ঎ ँԡऐܦԡ঎ ँᤃँܦԡ঎ ँᎮԡܦ
ԡ঎ँጢጢܦԡ঎ँጢᤃܦԡ঎ँጢጢᖔ除样品 ୩࿗ 与参照图谱的相似
度为 ԡ঎ᎮᎮᤃ 外ᖔ其余样品与参照图谱的相似度均ᤠ
ԡ঎ँԡ԰ᖔ 可知除陕西汉中产地外其余产地川乌相似