Page 108 - 《广西植物》2022年第9期
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ϟ ጢ ࿗ ࿗ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ 卷
馏至无醇味ᖔ得浸膏 ϟᎮᤃ Ҵ੫ᤥ 将浸膏分散于 ጢ 倍 ᥈ ᖔ组分 ᥈ 经半制备高效液相色谱得到化合物
ሕͱጢ ሕͱϟ
体积热水ᖔ依次用石油醚ܦ乙酸乙酯ܦ正丁醇萃取ᖔ ᣤ ྉጢऐ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈 ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔϟጢ ᨒ ऐጢ܀ጢጢ ᨒ ࿗ጢᖔϟँ
得到石油醚部位 ϟ࿗ ੫ܦ乙酸乙酯部位 ሕጢሕ ੫ܦ正丁 ቝᔽႿᖔ流动相含有ԡϟᠮ的甲酸ɯᖔ 组分 ᥈ 经半制
ሕͱሕ
醇部位 ᤃँሕ ੫ᤥ 合并石油醚部位和乙酸乙酯部位ᖔ 备高效液相色谱得到化合物 ࣮ ྉሕϟ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈ͱ
用大孔树脂柱层析ᖔ以水 ͱ乙醇梯度洗脱ྉԡᠮ ͱ 水ᖔ Ⴌᣑ Ⴌᖔϟԡ ᨒ ँԡ ܀ Ꭾᤃ ᨒ ࿗ᖔϟ ቝᔽႿᖔ 流动相含有
ሕԡᠮͱ࿗ԡᠮ ͱ ጢԡᠮ ͱ ᤃԡᠮ ͱ Ꭾԡᠮ ͱ ऐԡᠮ ͱ ँԡᠮ ͱ ँጢᠮᖔ ԡϟᠮ的甲酸ɯᖔ 化合物 ϓԣ ྉϟԡᎮ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈ͱ水ᖔ
Ⴌᣑ Ⴌɯᖔ硅胶薄层色谱检测ᖔ合并得 ϟԡ 个组分 ዶጲ Ȯᤥ Ⴌᣑ Ⴌᖔϟԡ ᨒ ँԡ܀Ꭾᤃ ᨒ ࿗ᖔሕ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的
ϟሕ 分离和纯化জ 组分 ऊ 经凝胶柱层析ᖔ以甲醇 甲酸ɯᖔ化合物 ϓᇺ ྉᎮ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔϟԡ ᨒ
ྉ加入 ԡϟᠮ 甲酸ɯ 洗脱ᖔ合并得 ϟԡ 个组分ྉऊ ጲ ँԡ܀Ꭾԡ ᨒ ሕԡᖔᤃ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯᤥ
ϟ
ऊ ɯᤥ 组分 ऊ 经半制备高效液相色谱ᖔ分离得到 ϟሕሕ 抗乳腺癌活性测试জ 人乳腺癌细胞株 ᥘऊè᥋
ϟԡ
化合物 ᇺ ྉሕϟ ቝ੫ɯ ྉ乙腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔሕԡ ᨒ Ꭾԡ܀ሕँ ᨒ Ꭾ 和 ᥘ᧕ዶ᥋ᥘା᥋ሕϟ 均 从 美 国模式培养物集存库
ᤃϟᖔ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯ 和化合物 ᎒ 购买ྉ ዶቝᔀʢᔽዹᑕႿ ఋᢃᡱᔀ ऊࣼᡷࣼʢᔀ ऊᆍᔀዹᡷᔽᆍႿᖔᆍዹҴᔽᔀᖔ
ྉᤃ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈 ͱ 水ᖔ Ⴌᣑ Ⴌᖔԡ ᨒ ऐԡ ܀࿗ጢ ᨒ ጢጢᖔϟऐ ᥘ᧕ᖔ В୩ዶ ɯ ᖔ 并培养在培养基比例为 ँԡᠮ 的
ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯଫ组分 ऊ 经半制备 ᧕ᥘጶᥘ 培养基ྉ 高糖型ɯᖔϟԡᠮ的胎牛血清ྉèା୩ɯ
ሕ
高效液相色谱ᖔ分离得到化合物 ԣ ྉँጢ ቝ੫ɯ ྉ 乙 和 ϟᠮ的双抗溶液ྉ 青霉素和链霉素ɯ 中ᖔ在恒温
腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔ࿗ᤃ ᨒ ጢ࿗܀ጢԡ ᨒ ጢԡᖔ࿗ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ሕᎮऊܦጢᠮऊᨃ 的培养箱内培养ᤥ 根据生长情况传
ԡϟᠮ的甲酸ɯ和化合物 ྉᎮ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈ͱ水ᖔ体 代或更换培养基ᤥ 取生长好的细胞株以每孔 ϟԡԡ
࿗
࿗
积比 Ꭾԡ ᨒ ሕԡ܀ᤃጢ ᨒ ሕጢᖔϟᤃ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ ဂᓂྉ 密度为每孔 ϟ ġ ϟԡ ጲጢ ġ ϟԡ 个细胞ɯ 接种在
的甲酸ɯଫ组分 ऊ 经半制备高效液相色谱ᖔ分离得 ँᤃ 孔板 中ᖔ 于 ሕᎮ ቩ ܦጢᠮ ऊᨃ 的培养箱内培 养ᤥ
࿗
到化合物 ϓԔ ྉँ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔሕԡ ᨒ Ꭾԡ܀ 运用 ᥘఋఋ 法测试细胞活力和细胞毒性ྉ 徐婵等ᖔ
Ꭾԡ ᨒ ሕԡᖔϟऐ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯ 和化合 ԡԡɯ ᤥ 化合物样品溶解在 ᧕ᥘ୩ᨃ 溶液中ᖔ配制
᥋ϟ
物 ϓϓ ྉᎮ ቝ੫ɯ ྉ乙腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔጢ ᨒ Ꭾጢ܀ᤃԡ ᨒ ࿗ԡᖔ 浓度为 ጢԡ ቝ੫ኼቝᓂ 的母液ᤥ 用 ᧕ᥘጶᥘ 将母液稀
ϟऐ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯᤥ 组分 ᧕ 用凝胶 释至待测样品的最终浓度为 ϟԡܦԡܦ࿗ԡܦᤃԡܦऐԡܦ
᥋ϟ
柱层析ᖔ硅胶薄层色谱检测ᖔ得到 ϟԡ 个组分 ᧕ ጲ ϟԡԡ ဂ੫ኼቝᓂ ྉ 二甲基亚砜浓度低于 ϟɯ ᤥ 待细
ϟ
᧕ ᤥ 组分 ᧕ 经半制备高效液相色谱分离得到化 胞在 ँᤃ 孔板长满后ᖔ吸弃培养液ᤥ 每孔加入 ԡԡ
ϟԡ ϟ
合物 ϓ ྉϟԡ࿗ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔᤃԡ ᨒ ࿗ԡ܀ऐԡ ᨒ ဂᓂ 的不同浓度的待测化合物ଫ对于每个浓度设
ԡᖔጢ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯଫ组分 ᧕ 经 置 ጢ 孔ᖔ并设置试验样品的对照和未添加样品ܦ
高效液相色谱分离得到化合物 ࣽ ྉᤃ ቝ੫ɯ ྉ 乙 细胞的空白对照ᤥ 分别培养 ϟܦ࿗ܦ࿗ऐ ၤ 后ᖔ吸
腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔϟԡ ᨒ ँԡ܀ᤃԡ ᨒ ࿗ԡᖔϟᎮ ቝᔽႿᖔ流动相含有 弃培养 液ᖔ向每个孔中加入 ᧕ᥘጶᥘ 制备的 ᥘఋఋ
ԡϟᠮ的甲酸ɯଫ组分 ᧕ 经高效液相色谱分离得到 溶液 ϟԡԡ ဂᓂྉጢ ቝ੫ኼቝᓂ ɯᖔ孵育 ԡጢ ၤᖔ所产生的
᥋ϟ
ᤃ
化合物 ጇ ྉ࿗ᤃ ቝ੫ɯ ྉ乙腈ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔϟጢ ᨒ ऐጢ܀ᤃጢ ᨒ 蓝紫色甲臜结晶用 ϟጢԡ ဂᓂ 的 ᧕ᥘ୩ᨃ 溶解ᖔ于 ጢᤃ
ሕጢᖔϟጢ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯᤥ 组分 ጶ 经 Ⴟቝ 下测定 每 孔 ᧣ᦵ 值ᖔ 生长抑制率 ᢉ Џϟ ͱ
硅胶柱层析ᖔ二氯甲烷 ͱ甲醇等梯度洗脱ྉऐ ᨒ ϟᖔ ྉ᧣ᦵ ͱ ᧣ᦵ ɯᣰ ྉ ᧣ᦵ ͱ ᧣ᦵ ɯ ġ ϟԡԡᠮᤥ
实验组 空白组 对照组 空白组
Ⴌᣑ Ⴌɯᖔ 硅胶薄层色谱检测ᖔ得到组分 ጶ ጲጶ ᤥ 组 按文献计算半数抑制浓度ྉ᧧ऊ ɯᤥ
ϟ ጢ ጢԡ
分 ጶ 经凝胶柱层析ᖔ硅胶薄层色谱检测ᖔ分为组分
ϟ
ጶ ጲጶ ᖔጶ 经半制备高效液相色谱ᖔ得到化合 জ 结果与分析
ϟͱϟ ϟͱሕ ϟͱϟ
物 ϓ ྉϟԡጢ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈 ͱ水ᖔႬᣑ Ⴌᖔϟԡ ᨒ ँԡ ܀ऐԡ ᨒ
ԡᖔϟ࿗ ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯ 和化合物 ϓጇ ԣॹϓ 化合物结构鉴定
ྉँ࿗ ቝ੫ɯ ྉ 乙腈 ͱ 水ᖔ Ⴌᣑ Ⴌᖔԡ ᨒ ऐԡ ܀Ꭾጢ ᨒ ጢᖔϟऐ 化合物 ϓই 黄色油状ᤥጶ୩᧧᥋ᥘ୩ ቂᣑ ऊ᧥ ጢऐᎮ Џ ᥘշ
ቝᔽႿᖔ流动相含有 ԡϟᠮ的甲酸ɯᤥ 组分 ᥈ 经硅胶柱 ̀ ᖔऊ ̀ ᨃ ᤥ ̀᥋શᥘ ྉ ᤃԡԡ ᥘ̀झᖔ ऊ᧕ऊ ɯ Р᧥
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ሕጢ ጢጢ Ꭾ ሕ
层析ᖔ石油醚ͱ乙酸乙酯梯度洗脱ྉϟ ᨒ ԡ ጲ ԡ ᨒ ϟᖔ Ⴌᣑ ጢԡᤃ ྉϟ̀ᖔ ᡷᖔ ȣ ᢉ Ꭾϟ ̀झᖔ ̀᥋Ꭾɯᖔ ࿗ँ࿗ ྉϟ̀ᖔ ቝᖔ ̀᥋
Ⴌɯᖔ硅胶薄层色谱检测ᖔ得到组分 ᥈ ጲ᥈ ᤥ᥈ 经凝 ɯᖔ ࿗ ጢᎮ ྉ ϟ̀ᖔ ʛʛᖔ ȣ ᢉ ϟԡ ँᖔ ጢ ᤃ ̀झᖔ ̀᥋ሕɯᖔ
ϟ ऐ ሕ
胶柱层 析ᖔ硅胶薄层 色 谱 检 测ᖔ 得到组分 ᥈ ጲ ሕᎮ ྉϟ̀ᖔ ʛᖔ ȣ ᢉ ँᎮ ̀झᖔ ̀᥋ϟᎮɯᖔ ሕϟጢ ྉϟ̀ᖔ ʛʛᖔ
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