Page 180 - 《广西植物》2021年第11期
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ϟ ँ ࿗ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ϟ 卷
Ⴌ 为样品提取液体积ྉቝᓂɯଫᐹ 为显色时取样品体 移栽 ࿗ 个月开始ᖔ各样品的块根鲜重无显著差
积ྉቝᓂɯଫ۩ 为样品重量ྉ੫ɯᤥ 异ᖔ但移栽 ሕᤃ 个月的块根干重显著高于其他样
ϟጢ 多糖含量测定方法জ 多糖提取与测定的方 品ᖔ且该时期块根的折干率较高ྉ࿗ԡᎮԡᠮɯྉ表 ϟɯᖔ
法参考朱德华等ྉԡϟऐɯ的方法ᖔ使用苯酚ͱ硫酸法 说明从移栽 ࿗ 个月开始ᖔ块根的膨大速率减缓ᖔ
检测牛大力多糖的含量ᤥ 绘制葡萄糖标准曲线ᖔ 但积累的干物质增加ᤥ 因此ᖔ根据牛大力块根的
生长发育进程ᖔ我们可初步划分为形成期ྉ 移栽
线性标准曲线的方程为 ᡥ ᢉ ϟ ᤃଝ ͱ ԡ ԡԡᎮᖔ ʗ ᢉ
ԡँँऐྉႥ ᢉ ጢɯᤥ 于 ࿗ँԡ Ⴟቝ 测定样品的吸光度值ᖔ ᤃጲϟ 个月ɯܦ迅速膨大期ྉ移栽 ϟ ጲ ࿗ 个月ɯ 与稳
利用标准曲线计算出牛大力多糖含量ᤥ 定膨大期ྉ移栽 ࿗ ጲ ሕᤃ 个月ɯ三个阶段ᤥ
ϟᤃ 酶活性的测定方法জ 参照谢小波等ྉԡϟሕɯ ԣॹԣ 牛大力块根不同发育时期的多糖物质含量变化
的方法并进行改进ᖔ将牛大力新鲜样品在液氮中 由图 可知ᖔ牛大力多糖含量在块根生长发育
研磨至粉末ᖔ准确称取 ԡሕ ੫ᖔ加提取缓冲液 ϟ ጢ 过程中呈现出逐渐上升的变化趋势ᖔ但在块根稳
ቝᓂᖔ涡旋混匀ᖔ冰上放置 ጢቝᔽႿᖔ于 ࿗ ቩ ጢ ԡԡԡ ʢኼ 定膨大期的上升速率减缓ᖔ直至移栽 ሕᤃ 个月其含
᥋ϟ 量达到最大值ྉሕᤃጢᎮᠮɯᤥ 淀粉作为一种主要的
ቝᔽႿ 条件下离心 ϟጢ ቝᔽႿᖔ取上清液ᖔ即为粗酶液ᖔ
用于下一步的酶活性测定ᤥ 参照于安民等ྉԡϟ࿗ɯ 多糖物质ᖔ其含量的变化规律类似于多糖ᖔ随着块
的方法ྉ 紫外分光光度法ɯ 测定与计算 ୩В୩ܦ୩۪୩ܦ 根的生长发育而不断增加ᤥ 移栽 ᤃጲ ϟऐ 个月ᖔ块根
ዶ᧧ 和 શ᧧ 的酶活性ᤥ 利用测定组和对照组吸光度 的淀粉含量较低且变化不大ᤥ 移栽 ϟऐ 个月后ᖔ块
的差值ᖔ并结合不同浓度下葡萄糖吸光度标准曲 根的淀粉含量迅速增加ᖔ极显著高于形成期ྉ 移栽
线来计算分解方向的酶活性ྉ 包括 ዶ᧧ܦશ᧧ 和 ୩В୩ ᤃጲϟ 个月ɯᤥ 移栽 ሕᤃ 个月ᖔ块根的淀粉含量达到
分解方向ɯ 的葡萄糖合成量ᤥ 利用测定组和对照 最大值ྉϟሕँँᠮɯᖔ极显著高于移栽 ሕԡ 个月的含量
组吸光度的差值ᖔ并结合不同浓度下蔗糖吸光度 ྉϟᤃँᠮɯᤥ
标准曲线来计算合成方向的酶活性ྉ 包括 ୩۪୩ 与 ԣॹᇺ 牛大力块根不同发育时期的可溶性糖含量变化
୩В୩ 合成方向ɯ 的蔗糖合成量ᤥ 根据各自的葡萄 可溶性糖主要包括蔗糖ܦ葡萄糖与果糖等ᖔ在
糖合成量或蔗糖合成量来计算相应的酶活性ᖔ酶 牛大力块根发育的过程中可溶性糖含量呈下降的
᥋ϟ
᥋ϟ
活性单位为 ဂቝᆍኼ੫ ኼၤ èۼᤥ 变化趋势ྉ 图 ሕ᧥ዶɯᤥ 移栽 ᤃ 个月ᖔ牛大力处于块
ϓॹᇺ 数据处理 根形 成 期ᖔ 此时的可溶性糖 含量最高ᖔ 达到
采用 ጶዹᔀ 与 ୩۪୩୩ ԡ 软件进行数据统计分 ሕ࿗ጢᠮᖔ极显著高于其他样品ᤥ 随着块根膨大进
析ᖔ实验数据均进行正态检验和方差齐性检验ᖔ并 程ᖔ根中合成积累的可溶性糖出现迅速下降ᖔ特别
以平均值ō标准差的方式表示ᖔ组间比较采用单因 是从移栽 ᤃ 个月至 ϟ 个月ᤥ 移栽 ሕᤃ 个月ᖔ块根的
素方差分析ྉᆍႿᔀ᥋औᑕᢃ ዶશᨃጶɯᖔ᧕ࣼႿዹᑕႿ 法进行多重 可溶性糖含量最低ᖔ仅为 ᤃᤃᠮᤥ 由图 ሕ᧥ା 可知ᖔ
比较ᤥ 分析结果用 ᥈ʢᑕᡱၤ۪ᑕʛ ۪ʢᔽ༁ቝ ጢ 软件进行作图ᤥ 蔗糖含量在移栽 ᤃ 个月最高ᖔ达到 Ꭾԡᤃᠮᤥ 随着块
根的发育进程ᖔ其变化规律总体上呈下降的趋势ᖔ
জ 结果与分析 直至移栽 ሕᤃ 个月ᖔ含量降至 ϟϟँᠮᤥ 通过比较可
溶性糖含量与蔗糖的含量ᖔ我们发现在牛大力块
ԣॹϓ 牛大力的块根生长发育进程 根发育过程中蔗糖在可溶性糖中占据的比例为
从图 ϟ 可以看出ᖔ移栽 ᤃ 个月的牛大力根部尚 ሕԡԡጢᠮ ጲ ጢ࿗ᤃᠮᤥ 因此ᖔ我们认为蔗糖可能是牛
未出现明显的膨大现象ᖔ而移栽 ϟ 个月的牛大力 大力块根最主要的可溶性糖ᤥ
已明显观察到根部的膨大ᤥ 移栽 ϟ 个月至 ࿗ 个 ԣॹ 牛大力块根不同发育时期的相关酶活性变化
ሕ ࿗ϟ ୩۪୩ 和 ୩В୩合成ɤ酶的活性变化জ 通过对牛
月ᖔ牛大力块根的膨大速率较快ᖔ体积从 ሕϟ ዹቝ
增加到 ሕሕጢ ዹቝ ᖔ显著高于其他样品ᤥ 移栽 ࿗ 个 大力块根发育过程中的 ୩۪୩ 和 ୩В୩ྉ合成ɯ 方向的
ሕ
月至 ሕᤃ 个月ᖔ牛大力块根膨大速率开始下降ᖔ移 活性进行测定ྉ 图 ࿗ɯᖔ我们发现从移栽 ᤃ 个月至
栽 ሕԡ 个月的块根体积与 ሕᤃ 个月的块根体积差异 ࿗ 个月ᖔ牛大力块根的 ୩۪୩ 酶活性呈上升的变化
不显著ᤥ 类似于体积ᖔ块根的鲜重与干重在移栽 趋势ᖔ在移栽 ሕԡ 个月出现稍微下降ᖔ之后又开始
ϟ 个月至 ࿗ 个月也呈显著增加的变化趋势ᤥ 从 升高ᖔ直至移栽 ሕᤃ 个月达到最大值ྉጢऐँँ ဂቝᆍኼ