Page 138 - 《广西植物》2023年第2期
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B1-B24. 24 个枫香个体ꎻ M. 500 bp ladder DNA Markerꎮ
B1-B24. 24 Liquidambar formosana individualsꎻ M. 500 bp ladder DNA Marker.
图 1 24 份枫香材料扩增结果 (LF229)
Fig. 1 Amplification of 24 Liquidambar formosana using primer (LF229)
表 5 18 对 SSR 引物多态性信息
3 讨论与结论
Table 5 Information on polymorphism of
18 pairs of SSR primers
重复 退火温度 3.1 枫香转录组 SSR 位点分布特征
引物编号 引物序列 (5′-3′) 基元 Annealing SSR 标记具有在植物种间通用性的优点ꎬ同属
Primer No. Primer sequence (5′-3′) Repeat temperature
motif (℃ ) 植物中移植已有标记进行开发 SSR 的研究已不少
LF53 F:AGGAACCCAATTTGACCCCT (TGG) 6 60.0 见(杨世鹏等ꎬ 2018)ꎬ而目前可用的枫香 SSR 引
R:CCACCCACCAATGCTCAGAT
物较少ꎬ仅报道的有顾辛韵(2016) 采用磁珠富集
LF76 F:CAGCACTTCCATAAAGCCGC (CCAT) 5 60.0
R:GTTCTGACGCCTTCTGGTGA 法开发的 10 对引物及孙荣喜(2017)通过 NCBI 数
LF89 F:TGAAATTTTGCGTGGGCTGG (GGCT) 5 57.3
R:ACAAGTGGGCTCAAATGAGT 据库信息开发了 11 对引物ꎮ 磁珠富集法主要是
LF108 F:GCAATAGCCGTTCCCTTTGC (TTCT) 5 60.0
R:CACGGTCTCACTGCCTGATT 通过构建微卫星富集文库ꎬ经阳性克隆、筛选、测
LF111 F:CGGAGCTCGTGATTTCAGGT (TTTC) 5 60.6
R:AGAACCGGTTCCTCGTAACA 序最终得到 SSR 位点信息ꎬ这两个方法在一定程
LF112 F:ATCAGTGTGTAGGCCGAACC (TTTG)5 58.6 度上提高了 SSR 引物开发效率ꎬ但操作过程繁琐
R:AGCCAATCACCACACACCAA
且需要构建和筛选基因组文库ꎬ开发难度较大ꎬ获
LF128 F:CACACCACTCCACTCCGATC (CCA) 7 60.0
R:ATGTTGAGGGAGCGAAGGTG
得的 SSR 位点信息有限ꎻ通过 NCBI 数据库开发
LF129 F:GTATGATCGCCCTCCCACTG (CCG) 7 60.0
R:ACAGAAGCTGAGGTTGAGGC
LF171 F:ACTCACACTCCCACACTCCA (CCT) 8 60.0 SSR 引物的方法使得研究者可以从中获得有效信
R:AAACTCGAAGACCCAGCGAG 息ꎬ节省了时间和成本ꎬ但当前数据库中的枫香序
LF177 F:CCACTGCCTCAGGGTTTCTT (GAAG) 6 60.0
R:CTTCACCTGGAAGTGGGTCG 列数据有限ꎬ能获得的 SSR 位点信息较少且无法
LF188 F:TTCTGTGACTGGGCAATGGG (TAA) 8 59.8
R:CGAGTCCTCACATTCCACGT 对枫香 SSR 位点信息分布特征进行详细描述ꎮ 随
LF190 F:TGGTGCCTTCTTGGACCTTT (TATT) 6 60.0
R:CACAACAAACGAGGAAGCCG 着高通量测序技术的发展ꎬRNA ̄seq 测序的成本正
LF206 F:CAAATGCGAATGAGCGGGAG (AAAGG) 5 60.0 逐渐降低ꎬ基于转录组数据开发 EST ̄SSR 分子标
R:GGGCAAAAGGGACAGGATGT
记ꎬ目前已成为基因发掘及分子标记开发的重要
LF224 F:ACAGGCTGTGGGATTAGCAC (GAAGG) 5 60.0
R:GTCGTCAGAGTGGCCAGAAA
LF229 F:GCTACCGTTGCCTCCTTCAT (TTTCC) 5 59.8 技术手段ꎮ 本研究首次通过转录组测序技术获得
R:TGGTCTTGGAGCAGATGACG
LF242 F:TCTCATCGCACTCCTAGGGT (GAA) 9 60.0 了相对较多且较全面的枫香 SSR 位点信息ꎮ 本研
R:GTGAGTGGAGAGGGGGAGAT
究发现ꎬ作为第三纪的孑遗植物ꎬ枫香转录组中 SSR
LF245 F:GTGCTGGATCTCTGGCACAA (GCA) 9 59.9
R:GACCAATGTATCCCGGGGAC 基元重复类型较为丰富ꎬ包含了 6 种核苷酸重复的
LF247 F:GGAAGTACCACTCCTTCGGC (GCG) 9 60.0
R:GAAACTCCGAATTCGACGCG 所有类型ꎬ 高比例的单核苷酸重复序列(46.54%)