Page 104 - 《广西植物》2023年第6期
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１ ０ ９ ０ 广 西 植 物 ４３ 卷
１００ μｇＬ ꎬ后续试验采用以下 ４ 组处理:对照 Ｌ ＰＩ 溶液ꎬ荧光显微镜激发光波长为 ５３５ ｎｍꎬ发
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(ＣＫꎬ蒸馏水)、ＮａＣｌ ( １００ ｍｍｏｌＬ )、ＮａＣｌ ＋ ＣＡ 射光波长为 ６１５ ｎｍꎮ
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(１００ ｍｍｏｌＬ ＮａＣｌ ＋ １００ μｇＬ ＣＡ)、ＣＡ (１００ １.４ 数据统计与分析
μｇＬ )ꎮ 每个处理重复 ３ 次ꎬ处理液均直接加入 试验数据采用 ＩＢＭ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ＳＰＳＳ ２３.０ 统计软
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发芽试验的培养皿内(每皿 １０ ｍＬ 处理液ꎬ５０ 颗种 件单因素方差分析( ＡＮＯＶＡ) 和 Ｄｕｎｃａｎ 多重比较
子)ꎮ 发芽后 ７ ｄ 测定各项指标ꎮ 进行差异显著性检验ꎬ使用 Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ８.０ 进
１.３ 测定指标及方法 行作图ꎮ
１.３.１ 发芽指数
(１)发芽势(％)＝ (３ ｄ 内正常发芽种子数 / 供 ２ 结果与分析
试种子数) ×１００ꎻ
(２)发芽率(％)＝ (７ ｄ 内发芽种子数 / 供试种 ２.１ 不同浓度 ＮａＣｌ 对番茄种子萌发及幼苗生长的影响
子数) × １００ꎮ 由图 １: Ａ、Ｂ 可知ꎬＮａＣｌ 胁迫在番茄种子的萌
１.３.２ 胚根长度 直尺测量番茄幼苗胚根长度ꎮ 发过程中具有抑制作用ꎮ 番茄种子发芽率总体随
１.３.３ 幼苗鲜重 各处理分别收集幼苗 ３０ 株ꎬ用滤 着盐胁迫浓度不断增加呈下降趋势ꎬ但当盐浓度
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纸吸干幼苗表面水分ꎬ用天平称量幼苗鲜重( 以 １０ 为 ５０ ｍｍｏｌ Ｌ 时ꎬ 相 较 于 ＣＫ 发 芽 率 提 升 了
株为单位)ꎮ １４.９５％ꎬ说明低浓度的盐溶液对番茄种子萌发具
１.３.４ 根毛密度及侧根数量 在电子显微镜下对 有一定的促进作用ꎮ 当盐浓度为 １００ ｍｍｏｌＬ ￣１
比 ４ 组处理的根毛密度及长度进行拍照并计数 ４ 时ꎬ发芽率下降了 ５２.３４％ꎬ显著抑制了番茄种子
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组处理的侧根数量ꎮ 的萌发ꎮ 当盐浓度为 １５０、２００ ｍｍｏｌＬ 时ꎬ发芽
１.３.５ 番茄幼苗根尖总 ＲＯＳ 的测定 幼苗根尖的 势与发芽率较 ＣＫ 均下降了 ６０％以上ꎬ说明高浓度
总活性氧 (ＲＯＳ) 使用特定的荧光探针 ＤＣＦＨ￣ＤＡ 的盐胁迫对番茄种子萌发过程有显著抑制作用ꎬ
进行检测( Ｆｏｒｅｍａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００３)ꎮ 将番茄幼苗根 并给种子造成了一定程度的致死伤害ꎮ
用双 蒸 水 冲 洗 ３ 次 后 孵 育 在 １０ μｍｏｌ Ｌ 的 ＮａＣｌ 胁迫对番茄幼苗的根长和鲜重也具有抑
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ＤＣＦＨ￣ＤＡ 溶液中 ２５ ℃ 避光处理 ２０ ｍｉｎꎬ双蒸水冲 制作用ꎮ 由图 １:Ｃ 可知ꎬ当盐浓度为 １００ ｍｍｏｌ
洗 ３ 次后在荧光显微镜(激发光波长为 ４８８ ｎｍꎬ发 Ｌ 时ꎬ番茄幼苗根长相较于 ＣＫ 降低了 ５７.９６％ꎬ鲜
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射光波长为 ５２５ ｎｍ)下拍照ꎮ 照片使用 Ｉｍａｇｅ￣Ｐｒｏ 重相较 于 ＣＫ 下 降 了 ５７. ９５％ꎬ 均 达 到 显 著 水 平
Ｐｌｕｓ ６.０ 进行荧光密度值统计ꎮ (Ｐ<０.０５)ꎬ该浓度的 ＮａＣｌ 处理显著抑制番茄幼苗
１.３.６ 番茄幼苗根尖脂质过氧化物的组织化学分 的生长ꎮ 由图 １:Ｄ 可知ꎬ在 ５０ ｍｍｏｌＬ ＮａＣｌ 胁
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析 植物根尖的脂质过氧化物通过 Ｓｃｈｉｆｆ ｂａｓｅ 试 迫下ꎬ番茄幼苗的根长与鲜重较 ＣＫ 差异均不显
剂进行检测(Ｗａｎｇꎬ １９８７)ꎮ 将番茄幼苗根用双蒸 著ꎬ表明番茄幼苗对低浓度的盐胁迫具有一定的
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水冲洗 ３ 次后ꎬ浸泡在 Ｓｃｈｉｆｆ ｂａｓｅ 试剂中 ２０ ｍｉｎꎬ 适应性ꎻ当 ＮａＣｌ 浓度达到 １５０ ｍｍｏｌＬ 时ꎬ番茄
然后用 ０.５％ (Ｗ / Ｖ) Ｋ Ｓ Ｏ 溶液( 含 ０.０５ ｍｍｏｌ 幼苗 的 根 长、 鲜 重 较 ＣＫ 分 别 下 降 了 ８０. ５９％、
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Ｌ ＨＣｌ)进行冲洗固定直至根的颜色变鲜亮后使 ７１.５１％ꎻ当 ＮａＣｌ 浓度达到 ２００ ｍｍｏｌＬ 时ꎬ幼苗
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用相机拍照ꎮ 的根长、鲜重较 ＣＫ 分别下降了 ８２.２１％、７３.７６％ꎬ
１.３.７ 番茄幼苗根尖细胞膜完整性的组织化学分 差异均十分显著ꎮ
析 植物根尖的细胞膜完整性通过 Ｅｖａｎｓ ｂｌｕｅ 试剂 由图 １:Ｃ、Ｄ 可知ꎬ在 １００ ｍｍｏｌＬ 的 ＮａＣｌ 浓
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进行检测(Ｙａｍａｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００２)ꎮ 方法同 １.３.６ꎬ 度下番茄幼苗的根长与鲜重较 ＣＫ 均下降了 ５０％
浸泡液改为 ０.０２５％ (Ｗ/ Ｖ) 的 Ｅｖａｎｓ ｂｌｕｅ 溶液ꎬ时 左右ꎬ因此该浓度即为 ＮａＣｌ 对番茄幼苗生长的半
间为 １５ ｍｉｎꎬ反复冲洗至无蓝色析出后进行拍照ꎮ 抑制浓度ꎬ后续试验选择该浓度作为盐处理浓度ꎮ
１.３.８ 番茄幼苗根尖细胞死亡的组织化学分析 ２.２ 不同浓度肉桂醛对 ＮａＣｌ 胁迫下番茄种子萌发
幼苗根尖的细胞死亡使用特定的荧光探针碘化丙 及幼苗生长的影响
啶( ｐｒｏｐｉｄｉｕｍ ｉｏｄｉｄｅꎬＰＩ) 进行检测( Ｋｅｌｌｅｒｍｅｉｅｒ ｅｔ 由图 ２ 可知ꎬＮａＣｌ 胁迫抑制了番茄种子的萌
ａｌ.ꎬ ２００２)ꎮ 方法同 １.３.５ꎬ孵化液改为 １０ μｍｏｌ 发ꎬ 而不同浓度的肉桂醛溶液对此有不同程度的
