Page 47 - 《广西植物》2020年第12期
P. 47
၊ᡙᡙᡓ᧥ᣑ ᣑ ँँँॹࣩᔠ၊ᐹᔠᐹͱᢝᅳࣩʗႥᐹᤀॹዞᅳቂ
জ ᤩࣩᔠ၊ᐹᔠᐹজ ᧕ᔀዹ ԡԡᖔ Ԕྉϟɯ᧥ ϟᎮሕͱϟᎮሕँ
ᦵ᧣ᧇᧅ ϓԔॹϓϓ࣮ᇺϓᣑ ࣩᔠ၊ᐹᔠᐹॹଝऊँԣԔԣԔԔᇺԔᇺࣽ
张花ᖔ 杨涛ᖔ 衡友强ᖔ 等 盐穗木病程相关蛋白 ̀ዹ۪ϟԡ 抗血清的制备及鉴定 ЏȮ 广西植物ᖔ ԡԡᖔ ࿗ԡྉϟɯ᧥ ϟᎮሕͱϟᎮሕँ
Ի̀ዶશ᥈ ̀ᖔ ɟዶશ᥈ ఋᖔ ̀ጶશ᥈ ɟ͐ᖔ ᔀᡷ ᑕ ۪ʢᔀᡱᑕʢᑕᡷᔽᆍႿ ᑕႿʛ ᔽʛᔀႿᡷᔽᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ ᑕႿᡷᔽ༁ᔀʢࣼቝ ᑕ੫ᑕᔽႿ༁ᡷ ̀ዹ۪ϟԡ ʢᆍቝ ̵ᐹᤀᅳᡙᐹዞ၊ᡥ ዞᐹᡓᔠዞᐹ ЏȮ ᥈ࣼᔽၤᑕᔽᑕᖔ
ԡԡᖔ ࿗ԡྉϟɯ᧥ ϟᎮሕͱϟᎮሕँ
盐穗木病程相关蛋白 ̵ዞۗቴϓԔ 抗血清的制备及鉴定
张জ 花ᕷ 杨জ 涛ᕷ 衡友强ᕷ 王জ 艳 ᥍
ྉ 新疆大学 生命科学与技术学院 新疆生物资源基因工程重点实验室ᖔ 乌鲁木齐 ऐሕԡԡ࿗ᤃ ɯ
摘জ 要ᧅ 病程相关蛋白ྉ۪༁ɯ 在植物抗病抗逆过程中发挥重要作用ᤥ 盐穗木病程相关蛋白基因 ̵ዞۗቴϟԡ
᥋ϟ
ྉ᥈ᔀႿାᑕႿҴ᧥èᤃᎮሕሕጢᤃɯ来自盐穗木ྉ ̵ᐹᤀᅳᡙᐹዞ၊ᡥ ዞᐹᡓᔠዞᐹɯ 在 ᤃԡԡ ቝቝᆍኼᓂ શᑕऊ 胁迫下的盐抑制差减文库ᤥ
为探究盐穗木病程相关蛋白 ̀ዹ۪ϟԡ 发挥生物学功能的机制ᖔ该研究通过体外表达和纯化 ̀ዹ۪ϟԡ 重组蛋
白制备特异性的 ̀ዹ۪ϟԡ 多克隆抗体ᤥ 并采用双酶切构建原核重组表达载体 ᡱጶఋऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡᖔ转化至大肠
杆菌ྉጛዞ၊ᓣʗᔠዞ၊ᔠᐹ ዞᅳᤀᔠɯାᓂϟ 诱导表达ᖔ通过正交分析优化重组蛋白可溶性诱导表达的条件ᖔ利用 શᔽ᥋શఋዶ 亲
和层析柱纯化融合蛋白ᖔ免疫 ାዶᓂା ᣰ ዹ 小鼠制备多克隆抗体ᖔ基于纯化获得的 ̀ᔽ༁᥋̀ዹ۪ϟԡ 重组蛋白和转
̵ዞۗቴϟԡ 拟南芥总蛋白ᖔ分别利用 ጶᓂ᧧୩ዶ 和 ۼᔀ༁ᡷᔀʢႿ ାᆍᡷᡷᔽႿ੫ 检测抗血清效价和特异性ᤥ 结果表明᧥成功构建
᥋ϟ
重组表达载体 ᡱጶఋऐᑕ᥋̵ዞۗቴϟԡଫ正交结果显示诱导温度 Ꭾ ቩ ᖔ诱导转速 ԡԡ ʢኼቝᔽႿ ᖔ᧧۪ఋ᥈ 浓度 ԡᎮ ቝቝᆍኼ
᥋ϟ
ᓂ ᖔ诱导时间 ᤃၤ 条件下可诱导表达大量可溶性目的蛋白ଫጶᓂ᧧୩ዶ 检测抗 ̀ዹ۪ϟԡ 血清效价达 ϟ ᨒ ࿗ሕ ԡԡԡᖔ
ۼᔀ༁ᡷᔀʢႿ ାᆍᡷᡷᔽႿ੫ 印迹结果显示制备的抗血清可以与重组蛋白和转基因拟南芥ྉዛʗᐹᤇᔠʐᅳᡓᔠ ᡙ၊ᐹᤀᔠᐹႥᐹɯ中异源表
达的 ̀ዹ۪ϟԡ 蛋白特异性结合ᤥ 该研究获得了效价高ܦ特异性强的盐穗木病程相关蛋白 ̀ዹ۪ϟԡ 抗血清ᖔ为
进一步研究 ̀ዹ۪ϟԡ 的亚细胞定位及生物学功能奠定了基础ᤥ
关键词ᧅ 盐穗木病程相关蛋白 ̀ዹ۪ϟԡᖔ 原核表达ᖔ 蛋白纯化ᖔ 抗体制备及鉴定
中图分类号ᧅ ͐ँ࿗ᤃϟজ জ 文献标识码ᧅ ዶ
文章编号ᧅ ϟԡԡԡ᥋ሕϟ࿗ྉԡԡɯϟ᥋ϟᎮሕ᥋ԡऐ 开放科学ྉ资源服务ɯ标识码ྉ᧣ᧇᦵɯ᧥
ۗʗᓣᡓᐹʗᐹᡙᔠᅳႥ ᐹႥʐ ᔠʐᓣႥᡙᔠஏᔠዞᐹᡙᔠᅳႥ ᅳஏ ᐹႥᡙᔠᓣʗࣩቂ ᐹᐹᔠႥᡙ
̵ዞۗቴϓԔ ஏʗᅳቂ ̵ᐹᤀᅳᡙᐹዞ၊ᡥ ዞᐹᡓᔠዞᐹ
᥍
Ի̀ዶશ᥈ ̀ࣼᑕᖔ ɟዶશ᥈ ఋᑕᆍᖔ ̀ጶશ᥈ ɟᆍࣼीᔽᑕႿ੫ᖔ ۼዶશ᥈ ɟᑕႿ
ྉ ᣏᔠႥᢝᔠᐹႥ ᣞᓣᡥ ᒦᐹᤇᅳʗᐹᡙᅳʗᡥ ᅳஏ ଧᔠᅳᤀᅳᔠዞᐹᤀ ቴᓣᅳࣩʗዞᓣ ᤩᓣႥᓣᡙᔠዞ ጛႥᔠႥᓣᓣʗᔠႥᖔ ࣷᅳᤀᤀᓣᓣ ᅳஏ ᒦᔠஏᓣ ዞᔠᓣႥዞᓣ
ᐹႥʐ ௴ᓣዞ၊Ⴅᅳᤀᅳᡥᖔ ᣏᔠႥᢝᔠᐹႥ ІႥᔠצᓣʗᔠᡙᡥᖔ Вʢࣼቝीᔽ ऐሕԡԡ࿗ᤃᖔ ऊၤᔽႿᑕ ɯ
ዛᤇᡙʗᐹዞᡙ᧥ ۪ᑕᡷၤᆍ੫ᔀႿᔀ༁ᔽ༁᥋ʢᔀᑕᡷᔀʛ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ༁ ྉ۪༁ɯ ᡱᑕᢃ ᔽቝᡱᆍʢᡷᑕႿᡷ ʢᆍᔀ༁ ᔽႿ ᡱᑕႿᡷ༁ ᔽႿ ʢᔀ༁ᡱᆍႿ༁ᔀ ᡷᆍ ᡱᑕᡷၤᆍ੫ᔀႿ ᑕᡷᡷᑕዹҴ ᑕႿʛ ʛᔽᔀʢ༁ᔀ
ᔀႿᔽʢᆍႿቝᔀႿᡷᑕ ༁ᡷʢᔀ༁༁ᔀ༁ ̵ዞۗቴϟԡ ྉ᥈ᔀႿାᑕႿҴ᧥ èᤃᎮሕሕጢᤃɯ औᑕ༁ ᔽ༁ᆍᑕᡷᔀʛ ʢᆍቝ ᡷၤᔀ ୩ࣼᡱᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ୩ࣼᤦᡷʢᑕዹᡷᔽᔀ ̀ᢃᤦʢᔽʛᔽझᑕᡷᔽᆍႿ
收稿日期ᧅ ԡԡͱԡጢͱԡᤃ
基金项目ᧅ 国家自然科学基金ྉሕϟऐᤃԡԡᤃϟɯଫ新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题ྉԡϟᎮ᧕ԡ࿗ԡᤃɯ Џ୩ࣼᡱᡱᆍʢᡷᔀʛ ᤦᢃ ᡷၤᔀ શᑕᡷᔽᆍႿᑕ
શᑕᡷࣼʢᑕ ୩ዹᔽᔀႿዹᔀ èᆍࣼႿʛᑕᡷᔽᆍႿ ᆍ ऊၤᔽႿᑕྉሕϟऐᤃԡԡᤃϟɯଫ ᣮᔽႿᢼᔽᑕႿ੫ ᔀᢃ ᓂᑕᤦᆍʢᑕᡷᆍʢᢃ ᆍ ାᔽᆍᆍ੫ᔽዹᑕ ᔀ༁ᆍࣼʢዹᔀ༁ ᥈ᔀႿᔀᡷᔽዹ ጶႿ੫ᔽႿᔀᔀʢᔽႿ੫ྉԡϟᎮ᧕ԡ࿗ԡᤃɯᤥ
作者简介ᧅ 张花ྉϟँँ࿗ͱɯᖔ女ᖔ甘肃武威凉州人ᖔ硕士研究生ᖔ研究方向为植物抗逆的生理生化与分子机制ᖔྉጶ᥋ቝᑕᔽɯϟᎮጢऐጢᤃᎮᤃጢ݀
ीीዹᆍቝᤥ
᥍
通信作者ᧅ 王艳ᖔ博士ᖔ副教授ᖔ硕士研究生导师ᖔ研究方向为植物抗逆的生理生化与分子机制ᖔྉጶ᥋ቝᑕᔽɯऔᑕႿ੫ᢃᑕႿᢼࣼ݀ ϟᤃዹᆍቝᤥ