Page 123 - 《广西植物》2022年第5期

ጢ 期 黄晓宇等᧥ 黄芪幼苗根系生长发育与 ᥈኏԰࿗ 和 ᧧ዶዶ 的关系
用量大且用途广泛ྉ刘强等ᖔ԰ԡԡऐଫ陈贵林ᖔ԰ԡϟऐɯᤥ
市场上主要以主根长ܦ侧根数少的外观形态指标
作为优质黄芪的主要评价标准ᤥ 黄芪外观品质在
一定程度上影响其有效成分含量ᤥ 而在农业生产
中ᖔ黄芪多以移栽苗的方式进行种植ᤥ 因此ᖔ培育
优质的黄芪幼苗对于提高黄芪的药用价值具有重
要意义ᤥ 目前ᖔ关于独脚金内酯和生长素调控植
物根系生长发育的研究多集中于水稻ܦ拟南芥和
番茄等植物上ᖔ而对药用植物的研究却鲜有报道ᤥ
因此ᖔ本文基于相关研究报道及前期对黄芪幼苗
外施不同浓度的 ᥈኏԰࿗ 和 ᧧ዶዶ 处理的预实验结果ᖔ
᥋ϟ
最终选取 ԰ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᥈኏԰࿗ܦጢ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᧧ዶዶ 和 ԰
ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᥈኏԰࿗ շ ጢဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᧧ዶዶ 对黄芪幼苗进
᥋ϟ
᥋ϟ
行处理ᖔ研究 ᥈኏԰࿗ܦ᧧ዶዶ 以及二者相互作用对黄
芪根系形态ܦ内源激素水平和独脚金内酯与生长
素相关基因表达的影响ᖔ为黄芪规范化育苗和幼
苗质量控制提供科学依据ᖔ同时也为独脚金内酯
和生长素调控药用植物根系生长发育的分子机制
研究奠定基础ᤥ
ϟজ 材料与方法
ϓॹϓ 材料
以膜荚黄芪ྉ ዛ໧ᡙʗᐹ੖ᐹᤀࣩ໧ ቂᓣቂᤇʗᐹႥᐹዞᓣࣩ໧ɯ 和蒙古
黄芪ྉዛॹ ቂᓣቂᤇʗᐹႥᐹዞᓣࣩ໧ ׹ᑕʢ঎ ቂᅳႥ੖၊ᅳᤀᔠዞࣩ໧ɯ为材料ᖔ黄芪
种子均采购于内蒙古丰镇市天创农牧业有限公司ᤥ
ϓॹԣ 实验设计
分别取适量的膜荚黄芪和蒙古黄芪种子于 ጢԡ
ቝᓂ 离心管中ᖔ清水冲洗干净ᖔँጢᠮ乙醇溶液消毒 ϟ
ቝᔽႿᖔԡ঎ϟᠮ ̀੫ऊ᤟ 溶液消毒 ሕԡ ༁ᖔ无菌水冲洗 ጢጲᤃ
次ᖔ浸泡 ࿗ၤᤥ 之后ᖔ将黄芪种子播种于铺有无菌
水浸湿滤纸的培养皿ྉ规格᧥ँ ዹቝɯ 后置于 ԰࿗ ቩ 恒
温培养箱中黑暗培养ᤥ
以 ϟᣰ ԰ ᥘ୩ 营养液为母液ᖔ通过添加 ᧧ዶዶྉሕ᥋吲
哚乙酸ɯ和 ᥈኏԰࿗ྉ人工合成的独脚金内酯类似物ɯ
配制不同 ᧧ዶዶ 浓度ྉԡ঎ԡ࿗ܦԡ঎԰ܦϟ 和 ጢဂቝᆍ᤟ኼᓂ ɯ和
᥋ϟ
᥈኏԰࿗ 浓度ྉԡ঎ԡϟܦԡ঎ϟܦϟ 和 ԰ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ɯ的营养液ᖔ
ᡱ̀ 值 ጢ঎ ऐᤥ 采用种子萌发袋ྉ 高 ϟ࿗ ዹቝᖔ宽 ϟ԰঎ ጢ
ዹቝଫ北京启维益成科技有限公司ɯ 培养幼苗ᖔ每个
种子萌发袋中添加 ϟԡ ቝᓂ 不同 ᧧ዶዶ 浓度和 ᥈኏԰࿗
浓度的营养液ᖔ对照组ྉऊ᣽ɯ 添加 ϟԡ ቝᓂ 蒸馏水ᤥ
待黄芪种子黑暗条件下萌发 ሕʛ 后ᖔ将下胚轴长约
ϟዹቝܦ长势一致的黄芪幼苗转移到种子萌发袋中
ऐ ࿗ Ꭾ
ྉ图版 ᧧ɯᤥ 每个种子萌发袋放入 ᤃ 株黄芪幼苗ᖔ为
一个处理ᖔ每处理 ሕ 个种子萌发袋ᖔ两种黄芪共计
ሕԡ 个种子萌发袋 ϟऐԡ 株幼苗ᤥ 将幼苗置于 ԰࿗ ቩ
恒温生长室中培养ᖔ培养条件为 ϟᤃ ၤ ᣰ ऐ ၤ 光周期ᤥ
每个种子萌发袋隔 ԰ʛ 补充一次 ϟᣰ ԰ ᥘ୩ 营养液ᖔ
处理 Ꭾʛ 后取样ᖔ测量幼苗主根长和统计幼苗侧根
数ᤥ 根据以上不同 ᧧ዶዶ 浓度和 ᥈኏԰࿗ 浓度的处理
结果ᖔ最终筛选 ԰ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᥈኏԰࿗ܦጢ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᧧ዶዶ
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᥋ϟ
和 ԰ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᥈኏԰࿗շጢဂቝᆍ᤟ኼᓂ ᧧ዶዶ 分别对黄芪
幼苗进行处理ᖔ处理 Ꭾʛ 后取样ᖔ检测幼苗主根长ܦ
侧根数ᖔ并测定幼苗根系内源激素含量ܦ独脚金内
᥋ϟ
酯和生长素相关基因表达量ᤥ
ᐹ঎ 俯视图ଫ ᤇ঎ 横向观测图ᤥ
ᐹ঎ ჆ᔀʢᡷᔽዹᑕ᤟ ׹ᔽᔀऔଫ ᤇ঎ ̀ᆍʢᔽझᆍႿᡷᑕ᤟ ᆍᤦ༁ᔀʢ׹ᑕᡷᔽᆍႿ ׹ᔽᔀऔ঎
图版 ᧧জ 黄芪幼苗在种子萌发袋的生长状况
۪᤟ᑕᡷᔀ ᧧জ ᥈ʢᆍऔᡷၤ ᆍ஦ ዛ໧ᡙʗᐹ੖ᐹᤀࣩ໧ ༁ᔀᔀʛ᤟ᔽႿ੫༁ ᔽႿ ᡷၤᔀ
༁ᔀᔀʛ ੫ᔀʢቝᔽႿᑕᡷᔽᆍႿ ᤦᑕ੫
ϓॹᇺ 方法
ϟ঎ሕ঎ϟ 根系形态指标测定জ 收集每个处理 ϟऐ 株黄
芪幼苗ᖔ将根部冲洗干净ᖔ使用直尺测量主根长ᖔ
在体式显微镜ྉ ᓂᔀᔽዹᑕ ጶԻ࿗ ̀᧕ɯ 下观察侧根ᖔ人工
᥋ϟ
统计侧根数量ᤥ
ϟ঎ሕ঎԰ 内源激素含量测定জ 黄芪幼苗根系生长素
ྉ᧧ዶዶɯܦ独脚金内酯ྉ୩ᓂ༁ɯܦ脱落酸ྉዶାዶɯ 和细胞
分裂素ྉऊఋ᣽ɯ含量参照朱莉莉等ྉ԰ԡ԰ԡɯ 的方法进
行提取ᖔ采用植物激素酶联免疫分析ྉጶᓂ᧧୩ዶɯ试剂
盒ྉ上海酶联生物科技有限公司ɯ 进行检测ᖔ使用
全光谱酶标仪ྉ 美国赛默飞世尔科技公司ɯ 在 ࿗ጢԡ