Page 187 - 《广西植物》2023年第2期

２ 期 叶家桐等: 矮紫金牛的开花生物学与繁育系统研究 ３ ８ １

(１９９２)的方法ꎬ５％ 以上个体开花时为群体始花 柱头颜色来判断柱头可授性的强弱ꎮ 每个花期重
期ꎬ５０％及以上个体开花为群体盛花期ꎬ９５％个体 复 ５ 朵花ꎮ

开花结束时为群体末花期ꎮ １.５ 控制性授粉实验
为统计单株花期与单花开放进程ꎬ选取 ６ 株刚 在长势健壮的 ３ 株矮紫金牛上各随机选择 ４
现花蕾的健壮矮紫金牛ꎬ挂牌标记ꎬ每日 ９:００ 观 个花序ꎬ并分别作以下处理:(１) 不授粉ꎬ不套袋ꎬ
察花蕾直至开放ꎬ之后每隔 １ ｈ 观察 １ 次ꎬ记录单 检测自然传粉条件下的结实率ꎻ(２) 不授粉ꎬ不去
花开放进程ꎮ 单株上第 １ 朵花开放日期为单株首 雄ꎬ套袋ꎬ检测自动自花授粉能力ꎻ(３) 去雄ꎬ人工
花日ꎬ最后 １ 朵花开放日期为单株终花日ꎮ 参照 异株授粉ꎬ套袋ꎬ检测异交结实率ꎻ(４) 去雄ꎬ人工
张永胜等(２０１９)的方法ꎬ观察并记录矮紫金牛花 同株授粉ꎬ套袋ꎬ检测自交结实率ꎮ

的柱头状态、花药状态和散粉时间ꎬ并随机选择 １０ １.６ 访花昆虫观察
朵完全开放的花ꎬ记录花瓣和雌雄蕊的数量ꎬ用数 参考龚燕兵和黄双全(２００７) 的方法ꎬ以直接
显游标卡尺(精度为 ０.０１ ｍｍ) 测量花瓣、花丝、柱 观察法调查矮紫金牛访花昆虫的种类和频率ꎮ 在
头的长度及柱头花药间距ꎮ 盛花期ꎬ随机选取株距为 ５ ~ １０ ｍ 的 ３ 株矮紫金
１.３ 花粉 / 胚珠比(Ｐ / Ｏ)值与杂交指数(ＯＣＩ)估算 牛ꎬ每株标记花序 ５ 个ꎬ连续观察 ３ ｄꎬ从 ７:００ 至
参考王茜等(２０１２)的方法估算 Ｐ / Ｏ 值ꎮ 对挂 １９:００ꎬ每隔 １ ｈ 统计标记花序上开放花朵的数量ꎬ
牌标记的植株ꎬ每株取花 ３ 朵ꎬ剪取即将散粉的花 并不间断观察和记录访花昆虫的种类、数量、访花
药ꎬ置于洁净离心管内ꎬ每朵花分别制成 ２ ｍＬ 花 次数、单花访问时长及访花行为ꎮ 拍摄昆虫访花
粉粒悬浮液ꎮ 用微量移液枪吸取 １ μＬ 于载玻片 照片ꎬ捕集访花昆虫制作凭证标本ꎮ
上ꎬ在生物显微镜( Ｏｌｙｍｐｕｓ ｃｘ３１) 下统计花粉量ꎬ １.７ 数据统计分析
每个观察视野的花粉数不少于 ４０ 粒ꎬ每朵花重复 以 Ｅｘｃｅｌ ２０１０ 软件进行数据分析和图表绘制ꎬ
３ 次ꎬ观察花粉数乘以２ ０００ꎬ取均值计算单花花粉 用 ＳＰＳＳ １３.０ 软件进行单因素方差分析ꎬ并采用
总量ꎮ 在体式显微镜( Ｏｌｙｍｐｕｓ ｓｚｘ７) 下用解剖针 Ｄｕｎｃａｎ’ｓ (α ＝ ０.０５)检验差异显著性ꎮ
划开心皮ꎬ观察并统计胚珠数ꎮ 以单花的花粉总
量除以胚珠数ꎬ得到 Ｐ / Ｏ 值ꎮ 按照 Ｃｒｕｄｅｎ(１９７６) ２ 结果与分析
的标准评判矮紫金牛的繁育系统类型ꎬ按照 Ｄａｆｎｉ
(１９９２)的标准ꎬ通过 ＯＣＩ 评判繁育系统类型ꎮ ２.１ 开花动态与花器官形态特征
１.４ 花粉活力与柱头可授性检测 矮紫金牛的花期为 ５ 月中下旬至 ６ 月中上旬ꎮ
分别在花朵的柱头伸出期、初开期、盛开期、衰 ５ 月 １７ 日为首花日ꎬ５ 月 ２０ 日为群体始花期ꎬ５ 月
落期、凋谢期采集花粉ꎬ以离体萌发法检测花粉活 ２９ 日进入群体盛花期ꎬ６ 月 ７ 日为群体末花期ꎬ６ 月
力ꎮ 参照王洁(２０１２)的方法ꎬ将 ８.０００ ｇ 蔗糖、０.０１６ １０ 日为终花日ꎬ单株花期平均 １８ ｄꎬ群体花期持续
ｇ 氯化钙、０.００５ ｇ 硝酸钾、０.００５ ｇ 硼酸和 ０.０１１ ｇ 硫 ２５ ｄ(表 １)ꎮ 花序为总状伞形花序ꎬ单株发育花序
酸镁加入 １００ ｍＬ 蒸馏水制成培养液ꎬ取 ２ 滴置于洁 １~１０ 个ꎬ单株花序着生小花 １６ ~４２０ 朵ꎮ 小花开放
净载玻片上ꎬ移取少量花粉放入培养液中ꎬ吹打混 具有顺序性ꎬ位于总状伞形花序形态学下方的先
合后盖好盖玻片ꎬ将其放于湿润的培养皿中央ꎬ放 开ꎬ逐步往上ꎬ位于形态学顶端的最后开放ꎮ 花梗
入 ２５ ℃ 恒 温 箱 培 养 ５ ｈ 后ꎬ 置 于 生 物 显 微 镜 淡紫色( 图 １:Ｃ)ꎮ 花冠紫红色或粉色ꎬ直径约 １５
(Ｏｌｙｍｐｕｓ ｃｘ３１)下观察花粉萌发情况ꎮ 每个花期重 ｍｍꎬ花瓣多为 ５ 片ꎬ极少数为 ４、６ 片或 ７ 片(图 １:
复 ５ 朵花ꎬ每朵做 １ 个装片ꎬ每个装片观察 ３ 个视 Ａ)ꎮ 花瓣倒卵状矩圆形ꎬ先端钝尖ꎬ长约 ６ ｍｍ(图
野ꎬ以可见花粉粒大于 ５０ 个的为 １ 个有效视野ꎬ以 １:Ａ)ꎮ 雄蕊黄色ꎬ５ 枚ꎬ与花瓣近等长ꎮ 柱头距离
花粉管长度大于花粉直径视为花粉萌发ꎮ 花药端部约 ２ ｍｍꎬ花丝长为花药的 １ / ２(图 １:Ｂ)ꎮ
花粉活力 ＝ (萌发花粉数/ 花粉总数)×１００％ꎮ 子房球形ꎬ无毛ꎬ具腺点ꎬ胚珠 ２０~３０ 粒ꎮ
参照 Ｄａｆｎｉ(１９９２) 的方法ꎬ分别在花朵的柱头 晴天ꎬ矮紫金牛花朵在 ９:００—１０:００ 开放ꎬ至
伸出期、初开期、盛开期、衰落期、凋谢期以及凋谢 当天 １８:００ 前后ꎬ花瓣和雄蕊凋谢ꎬ有少数花朵的
后 １、２、３ ｄ 的 ９:００—１０:００ꎬ将柱头剪下放入联苯 花瓣和雄蕊可延续至次日脱落ꎬ单花的花期持续
胺－过氧化氢反应液(１％ 联苯胺 ∶ ３％过氧化氢 ∶ (９±１.３) ｈꎮ 开花进程可分为 ６ 个时期ꎮ 花蕾期
水 ＝ ４ ∶ １１ ∶ ２２ꎬ 体 积 比)ꎬ 并 于 体 式 显 微 镜 (开花前 ２ ｄ):花蕾膨大ꎬ花蕾粉色加深(图 ２:Ａ)ꎮ
(Ｏｌｙｍｐｕｓ ｓｚｘ７)下观察ꎬ根据柱头周围气泡数量和 柱头伸出期( 约 ９:００) : 花朵即将绽放时ꎬ花序上