Page 99 - 《广西植物》2020年第6期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｊｕｎ. ２０２０ꎬ ４０(６): ８４５－８５３
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１９０３０５６
梁芳ꎬ 张燕ꎬ 牛苏燕ꎬ 等. 蝴蝶兰 ＰｈＮＡＣ１ 基因序列分析及对低温胁迫的响应 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ２０２０ꎬ ４０(６): ８４５－８５３.
ＬＩＡＮＧ Ｆꎬ ＺＨＡＮＧ Ｙꎬ ＮＩＵ ＳＧꎬ ｅｔ ａｌ. Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＰｈＮＡＣ１ ｇｅｎｅ ｆｒｏｍ Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｃｏｌｄ ｓｔｒｅｓｓ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ
２０２０ꎬ ４０(６): ８４５－８５３.
蝴蝶兰 ＰｈＮＡＣ１ 基因序列分析及对低温胁迫的响应
梁 芳ꎬ 张 燕ꎬ 牛苏燕ꎬ 袁秀云ꎬ 崔 波 ∗
( 郑州师范学院 生物工程研究中心ꎬ 郑州 ４５００４４ )
摘 要: 为探讨 ＮＡＣ 转录因子在蝴蝶兰低温胁迫响应中的分子调控机理ꎬ该研究以蝴蝶兰的叶片为材料ꎬ
运用 ＲＴ￣ＰＣＲ 及 ＲＡＣＥ 技术克隆得到一条蝴蝶兰的 ＮＡＣ 转录因子基因完整的 ｃＤＮＡ 序列ꎬ命名为 ＰｈＮＡＣ１
(ＧｅｎＢａｎｋ 登录号 ＭＦ７９７９０９)ꎬ并分析了其在两种低温条件下的表达模式ꎮ 结果表明:ＰｈＮＡＣ１ 基因 ｃＤＮＡ
序列全长１ ４４２ ｂｐꎬＯＲＦ 全长 ９４２ ｂｐꎬ编码 ３１３ 个氨基酸ꎮ 预测其蛋白分子量为 ３５.２２ ｋＤａꎬ等电点为 ６.９５ꎬ
属于稳定亲水性蛋白ꎮ 二级结构预测表明ꎬ无规则卷曲和延伸链为该蛋白的主要结构元件ꎬ与三级结构预
测结果基本相符ꎮ ＰｈＮＡＣ１ 编码的氨基酸序列与其他已登录的兰科植物 ＮＡＣ 蛋白进行同源序列比对ꎬ表明
与小兰屿蝴蝶兰(ＸＰ＿０２０５７６３７９０)亲缘关系较近ꎬ序列一致性达 ９７％ꎬ其次为铁皮石斛( ＸＰ＿０２０６９５０８１)ꎬ
一致性为 ８４％ꎮ 实时荧光定量 ＰＣＲ 分析表明ꎬＰｈＮＡＣ１ 基因在营养器官和生殖器官中均有表达ꎬ在蕊柱中
的表达量最高ꎮ 在 １１ ℃ / ６ ℃ 低温条件下ꎬＰｈＮＡＣ１ 基因的转录表达水平在前 ５ 天随着处理时间逐渐升高ꎬ
到第 ７ 天开始下降ꎻ在 ４ ℃ 低温条件下ꎬＰｈＮＡＣ１ 基因的表达水平在处理 ０.５ ｈ 时表达量有所下降ꎬ１ ｈ 后表
达量上升至对照水平ꎬ之后无明显变化ꎬ在处理 ２４ 至 ４８ ｈ 又逐渐升高ꎬ推测 ＰｈＮＡＣ１ 基因参与蝴蝶兰低温
胁迫响应ꎮ
关键词: 蝴蝶兰ꎬ ＮＡＣ 转录因子ꎬ 表达特性ꎬ 低温胁迫ꎬ 序列分析
中图分类号: Ｑ７８５ꎻＱ７８６ 文献标识码: Ａ
文章编号: １０００￣３１４２(２０２０)０６￣０８４５￣０９ 开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):
Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＰｈＮＡＣ１ ｇｅｎｅ ｆｒｏｍ
Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｃｏｌｄ ｓｔｒｅｓｓ
∗
ＬＩＡＮＧ Ｆａｎｇꎬ ＺＨＡＮＧ Ｙａｎꎬ ＮＩＵ Ｓｕｙａｎꎬ ＹＵＡＮ Ｘｉｕｙｕｎꎬ ＣＵＩ Ｂｏ
( Ｂｉｏｅｎｇｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒꎬ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ ４５００４４ꎬ Ｃｈｉｎａ )
Ａｂｓｔｒａｃｔ: ＮＡＣ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒｓ ａｒｅ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｍａｎｙ ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬ ｗｈｉｃｈ ｐｌａｙ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｏｌｅ
ｉｎ ｓｔｒｅｓｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ. Ｔｈｅ ＮＡＣ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ｎａｍｅｄ ＰｈＮＡＣ１ (ＧｅｎＢａｎｋ ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ. ＭＦ７９７９０９) ｗａｓ ｃｌｏｎｅｄ ｆｒｏｍ
收稿日期: ２０１９－０６－０８
基金项目: 河南省科技攻关计划项目(１８２１０２１１０３６９)ꎻ河南省高等学校重点科研项目(１８Ａ２１０００５ꎬ １８Ｂ２１００１５)ꎻ郑州师范学院
科技创 新 团 队 支 持 计 划 项 目 [ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｋｅｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｒｏｇｒａｍ ｏｆ Ｈｅｎａｎ ( １８２１０２１１０３６９)ꎻ Ｋｅｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
Ｐｒｏｇｒａｍ ｉｎ Ｈｉｇｈ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｈｅｎａｎ( １８Ａ２１０００５ꎬ １８Ｂ２１００１５)ꎻ Ａｉｄ Ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｅａｍ ｏｆ
Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ]ꎮ
作者简介: 梁芳(１９８２－)ꎬ女ꎬ湖北郧西人ꎬ博士ꎬ讲师ꎬ主要从事花卉分子生物学研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｌｉａｎｇｆａｎｇ＠ ｚｚｎｕ.ｅｄｕ.ｃｎꎮ
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通信作者: 崔波ꎬ博士ꎬ教授ꎬ主要从事花卉育种研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｃｕｉｂｏ＠ ｚｚｎｕ.ｅｄｕ.ｃｎꎮ
