Page 100 - 《广西植物》2021年第2期
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期 孙利娜等᧥ 基于 ᧧୩୩ 分子标记的叶子花亲缘关系分析和指纹图谱构建 ᤃ ሕ
ँԡ 号ܦँᎮ 号ܦँऐ 号 ँँ 号ܦϟԡϟ 号ܦϟԡᎮ 号和 ϟᤃ 号
的含有 ϟጢ 位数字的指纹图谱ᖔ其余品种指纹图谱
ྉ含有 ԡ 位数字ɯ均由引物 Вାऊऐ࿗ϟ 构建ᤥ
ሕজ 讨论与结论
ᇺॹϓ ᧇቴ 体系优化
᧕શዶ 模板量对 ۪ऊ 扩增起着关键作用ᖔ本研
究 ᧕શዶ 模板浓度在 ԡԡϟ ጲ ጢԡ Ⴟ੫ኼဂᓂ 范围内均能
᥋ϟ
扩增出条带ᖔ但浓度过高或过低扩增的条带不清
晰ܦ弥散ྉ王渭霞等ᖔԡϟԡɯᖔ经反复试验ᖔ确定 ԡጢ
Ⴟ੫ኼဂᓂ 为最佳浓度ᖔ此浓度下扩增的条带最清
᥋ϟ
晰ܦ稳定ᤥ 引物浓度直接影响 ۪ऊ 扩增结果ᖔ过高
会增加错配和非特异性扩增的几率ᖔ且易使引物
之间形成二聚体ᖔ浓度过低易导致扩增产物不足ᖔ
影响扩增效果ྉ 刘昕ᖔԡϟ࿗ɯᤥ ۪ऊ 特异性亦受退
火温度的影响ᖔ而碱基组成及其浓度ܦ引物长度和
靶基序列长度都影响退火温度ᖔ因此不同的引物
其退火温度不一样ྉ张茹ᖔԡϟ࿗ɯᖔ本研究通过梯度
试验ᖔ筛选出每个引物的最适退火温度ᤥ 循环次
数对 ۪ऊ 扩增具有决定性的影响ᖔ循环次数越多ᖔ
产生非特异性产物的量也越多ᖔ一般控制在 ሕԡ ጲ
࿗ԡ 次之间ྉ冯富娟等ᖔԡԡ࿗ɯᖔ本研究在 ሕ 个循环
时可获得明亮清晰的条带ᖔ效果最好ᤥ
ᇺॹԣ ᧇቴ 标记分析叶子花种质资源遗传多样性与
亲缘关系
本研究在优化的 ᧧୩୩᥋۪ऊ 反应体系的基础
上ᖔ基于 ϟϟ 个多态性高ܦ重复性好和稳定性强的
᧧୩୩ 引物对 ϟሕϟ 个叶子花品种进行扩增ᖔ共扩增
出 ϟᤃϟ 条带ᖔ其中有 ϟጢᤃ 条谱带具有多态性ᖔ多态
性比率为 ँᤃᎮᠮᖔ较 ዶ۪᧕ྉ 多态性比率 ᤃᎮ࿗ᠮɯ
ྉᔽዹၤᑕ ᔀᡷ ᑕᖔԡԡँɯ和同工酶ྉ多态性比率Ꭾጢጢᠮɯ
具有更为丰富的多态性ྉ 尹俊梅等ᖔԡԡϟɯᤥ 供试
的叶子花 શᔀᔽᆥ ༁ 基因多样性指数ྉ 均值 ԡँɯ 和
୩ၤᑕႿႿᆍႿᆥ༁ 信息指数ྉ均值 ԡ࿗ጢɯ都较低ᖔ并且遗传
图 ϟজ 基于 ᧧୩୩ 标记的 ϟሕϟ 个叶子花品种的聚类图
èᔽ੫ ϟজ ᧕ᔀႿʛʢᆍ੫ʢᑕቝ ᆍ ϟሕϟ ଧᅳࣩᐹᔠႥצᔠᤀᤀᓣᐹ 相似系数高ྉԡᤃ࿗ ጲ ԡँጢɯᖔ这些数据均表明供试品
ዹࣼᡷᔽᑕʢ༁ ᤦᑕ༁ᔀʛ ᆍႿ ᧧୩୩ ቝᑕʢҴᔀʢ༁ 种的遗传多样性不高ᖔ这一结果同黄彦晶ྉԡϟԡɯ
ྉᤃऐ 份叶子花的遗传相似系数为 ԡጢԡ ጲ ԡँᎮɯ 和
ሕँ 号ܦ࿗ 号ܦ࿗ሕ 号ܦ࿗࿗ 号ܦ࿗ऐ 号ܦጢऐ 号ܦᤃ࿗ 号ܦᤃጢ ᔽዹၤᑕ ᔀᡷ ᑕྉԡԡँɯྉሕԡ 份叶子花的遗传相似系数
号ܦᤃᤃ 号ܦᤃᎮ 号ܦᎮԡ 号ܦऐ 号ܦऐጢ 号ܦऐᤃ 号ܦऐऐ 号ܦ 为 ԡጢϟ ጲ ԡँ࿗ɯ的研究结果相一致ᤥ 叶子花遗传多