Page 84 - 《广西植物》2023年第6期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｊｕｎ. ２０２３ꎬ ４３(６): １０７０－１０７９
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２２０５０３４
苏桂军ꎬ 李霞ꎬ 陈芋西ꎬ 等ꎬ ２０２３. 花生铝响应类受体蛋白激酶 ＡｈＰＲＫ４ 的原核表达分析 [ Ｊ]. 广西植物ꎬ ４３(６):
１０７０－１０７９.
ＳＵ ＧＪꎬ ＬＩ Ｘꎬ ＣＨＥＮ ＹＸꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２３. Ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｌｕｍｉｎｕｍ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ￣ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ
ＡｈＰＲＫ４ ｉｎ ｐｅａｎｕｔ (Ａｒａｃｈｉｓ ｈｙｐｏｇａｅａ) [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ４３(６): １０７０－１０７９.
花生铝响应类受体蛋白激酶 ＡｈＰＲＫ４ 的原核表达分析
苏桂军 ꎬ 李 霞 ꎬ 陈芋西 ꎬ 詹 洁 １ꎬ２ꎬ３ ꎬ 王爱勤 １ꎬ２ꎬ３ ꎬ 何龙飞 １ꎬ２ꎬ３ ꎬ 肖 冬 １ꎬ２ꎬ３∗
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( １. 广西大学 农学院 / 植物科学国家级实验教学示范中心ꎬ 南宁 ５３０００４ꎻ ２. 广西农业环境与农产品安全重点实验室ꎬ
南宁 ５３０００４ꎻ ３. 广西高校作物栽培学与耕作学重点实验室ꎬ 南宁 ５３０００４ )
摘 要: 花粉类受体蛋白激酶(ｐｏｌｌｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ￣ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅꎬＰＲＫ) 是一类富含 ＬＲＲ 结构域的类受体蛋
白激酶ꎬ不仅在花粉发育和植物受精中发挥作用ꎬ也在胁迫响应中发挥作用ꎮ 基于对前期花生根尖铝胁迫
转录组数据的分析ꎬ我们发现了在转录水平响应铝胁迫的花粉类受体蛋白激酶基因 ＡｈＰＲＫ４ꎬ为探究
ＡｈＰＲＫ４ 在花生铝胁迫中的功能ꎬ该文进一步分析了铝胁迫处理下 ＡｈＰＲＫ４ 在花生耐铝品种‘９９￣１５０７’和铝
敏感品种‘中花 ２ 号’(‘ＺＨ２’)根尖中的转录变化ꎬ通过序列分析、进化树构建等分析了 ＡｈＰＲＫ４ 蛋白的结
构特点和亲缘关系ꎬ克隆了 ＡｈＰＲＫ４ 的胞内域序列(ＡｈＰＲＫ４￣ＣＤ)ꎬ并通过原核表达和体外磷酸化体系分析
了 ＡｈＰＲＫ４￣ＣＤ 的自磷酸化活性ꎮ 结果表明:(１) 不同铝处理时间及不同铝浓度处理后ꎬＡｈＰＲＫ４ 的转录水
平上调ꎬ显著响应铝处理ꎬ是铝诱导基因ꎻ(２)ＡｈＰＲＫ４ 含有 ６７３ 个氨基酸ꎬ属于 ＬＲＲ￣ＩＩＩ 蛋白激酶家族成员ꎬ
具跨膜域和信号肽ꎬ且预测具有磷酸化活性位点ꎻ( ３) 体外诱导表达出约 ７１ ｋＤ 的可溶性蛋白( ＧＳＴ￣
ＡｈＰＲＫ４￣ＣＤ)ꎬ经凝胶亲和层析纯化ꎬ得到基于蛋白印迹实验(Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ)验证正确的重组蛋白ꎬ重组蛋白
可发生磷酸化修饰ꎬ但无明显的自磷酸化现象ꎮ 综上认为ꎬＡｈＰＲＫ４ 是一个铝胁迫应答基因ꎬ参与花生铝胁
迫早期应答机制ꎬ且能发生磷酸化修饰ꎮ
关键词: 花生ꎬ 铝胁迫ꎬ 花粉类受体蛋白激酶ꎬ 表达分析ꎬ 原核表达
中图分类号: Ｑ９４３ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣３１４２(２０２３)０６￣１０７０￣１０
Ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｌｕｍｉｎｕｍ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ￣ｌｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ＡｈＰＲＫ４ ｉｎ
ｐｅａｎｕｔ (Ａｒａｃｈｉｓ ｈｙｐｏｇａｅａ)
１ １ １ １ꎬ２ꎬ３ １ꎬ２ꎬ３
ＳＵ Ｇｕｉｊｕｎ ꎬ ＬＩ Ｘｉａ ꎬ ＣＨＥＮ Ｙｕｘｉ ꎬ ＺＨＡＮ Ｊｉｅ ꎬ ＷＡＮＧ Ａｉｑｉｎ ꎬ
１ꎬ２ꎬ３ １ꎬ２ꎬ３∗
ＨＥ Ｌｏｎｇｆｅｉ ꎬ ＸＩＡＯ Ｄｏｎｇ
收稿日期: ２０２２－０８－１６
基金项目: 国家自然科学基金(３１７０１３５６)ꎮ
第一作者: 苏桂军(１９９９－)ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为作物生理ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｓｕ＿ｇｕｉｊｕｎ＠１６３.ｃｏｍꎮ
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通信作者: 肖冬ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ研究方向为作物生理与分子生物学ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｘｉａｏｄｏｎｇ＠ｇｘｕ.ｅｄｕ.ｃｎꎮ
