Page 96 - 《广西植物》2023年第6期
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1 0 8 2 广 西 植 物 43 卷
1.2 样品采收和指标测定 式中: A 为样品峰面积ꎻA 为对照品峰面积ꎻC
1 2
每年观察植株长势情况ꎬ于种植后第 4 年的 为对照品浓度ꎻV 为稀释倍数ꎻW 为样品称样量ꎻ统
10 月ꎬ采用等距取样法采挖根茎ꎬ每个种植地选择 计数据使用 Excel 和 SPSS 19.0 软件处理ꎻ品种的
3 个采样点ꎬ每个采样点面积为 1 m × 2 mꎬ每个采 聚类分析使用 SPSS 19.0 软件进行分析ꎻ皂苷成分
样点随机采挖 9 株ꎬ洗净ꎬ去根ꎬ称取鲜重ꎬ置于烘 与土壤等相关性分析和多元线性回归法分析使用
箱烘干至恒重ꎬ称干重ꎬ并分别检测重楼皂苷Ⅰ、 SPSS 19.0 软件进行分析ꎮ
重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅶ的含量ꎬ计算出这 3 种皂
苷的总和ꎬ同时分别采挖种植地土壤ꎬ进行土壤营 2 结果与分析
养成分分析ꎮ
1.3 重楼皂苷的提取 2.1 不同种植地土壤条件及华重楼生长情况比较
重楼皂苷提取参照 2020 年版« 中国药典» 的 不同种植地土壤特性及华重楼生长情况见表
提取方法( 中华人民共和国药典ꎬ2020)ꎮ 取干粉 1 和表 2ꎮ 由表 1 可知ꎬ7 个样本的 pH 值在 4.73 ~
末过 3 号筛ꎬ精密称定 0.5 gꎬ置于具塞锥形瓶中ꎬ 6.48 之间ꎬ均为酸性土壤ꎬ瓜里乡、崀山镇、龙合乡
加入乙醇 25 mLꎬ称定重量ꎬ加热回流 30 min 后ꎬ 生长地的有机质含量较丰富ꎬ瓜里乡杉木林、梅溪
放冷ꎬ再称定重量ꎬ用乙醇补足减失的重量ꎬ摇匀ꎬ 镇、崀山镇、龙合乡土壤全氮含量较丰富ꎬ梅溪镇
滤过ꎬ取续滤液进行 HPLC 检测重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、 和崀山镇全磷含量较丰富ꎬ除了两水乡和杆洞乡
Ⅶ的成分ꎮ 外ꎬ其余种植地碱解氮含量较丰富ꎬ梅溪镇速效磷
1.4 重楼皂苷的高效液相检测 含量较丰富ꎬ崀山镇速效钾含量较丰富ꎮ 由表 2
对照品溶液配制:对照品均由成都恩斯特生物 可知ꎬS2 和 S6 鲜重分别为 167.45 g 和 178.45 gꎬ
技术有限公司提供ꎬ精密称取重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ各 差异不大ꎬ而两者的干重分别为 52.33 g 和 63.73
对照品适量ꎬ分别加入甲醇溶解ꎬ配制成含重楼皂 gꎬ差异较大( P < 0.05)ꎬ表明 S2 鲜货的含水量比
 ̄1  ̄1
苷Ⅰ 0.563 mgmL 、重楼皂苷Ⅱ 0.506 mgmL 、 S6 高ꎬ而 S6 干重显著高出其他种植地样品 1.2 ~
 ̄1
重楼皂苷Ⅶ 0.507 mgmL 的混合对照品溶液ꎮ 8.6 倍ꎻ露地种植的 S7 产量最低ꎬ干重仅为 7.40 gꎬ
色谱条件(Wu et al.ꎬ 2012):流动相乙腈(A) - 远低于其余样品(P<0.05)ꎻ同一地区不同生长环
水(B)ꎬ梯度洗脱(0 ~ 40 minꎬ30% ~ 60% Aꎻ40 ~ 45 境的 2 个样品ꎬ干重存在差异ꎬS2 是 S3 的 1. 91
minꎬ60% ~90% Aꎻ45 ~ 55 minꎬ90% Aꎻ55 ~ 56 minꎬ 倍ꎮ 由表 2 还可知ꎬ林下栽培或遮阳种植的样品
90% ~30% Aꎻ56 ~ 64 minꎬ 30% A)ꎻ检测波长 203 生长较好ꎬ植株比较健壮ꎬ而露地种植的样品产量
nmꎻ体积流量 1.0 mLmin ꎻ柱温 35 ℃ꎻ进样量 比较低ꎬ长势较差、植株比较弱小ꎬ表明光照强度
 ̄1
10 μLꎮ 会影响其生长ꎮ
1.5 土壤成分检测 2.2 不同种植地对重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ含量的影响
土壤的 pH 值、有机质、全氮、全磷、全钾、碱解 样品及混合对照品的离子色谱图见图 1ꎬ根据
氮、速效磷、速效钾含量分别按照林业标准( LY / T 各组分的峰面积计算出样品中 3 种重楼皂苷含
1239—1999、 LY / T 1237—1999、 LY / T 1228— 量ꎬ皂苷含量统计见表 3ꎮ 由表 3 可知ꎬ不同的生
2015、LY / T 1232—2015、LY / T 1234—2015、LY / T 长地根茎重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ以及 3 种皂苷的总含
1228—2015、 LY / T 2445—2015、 LY / T 2445— 量均有有差异ꎮ 从 3 种皂苷总量来看ꎬS2 含量最
2015)进 行 测 定ꎬ 根 据 全 自 动 间 断 化 学 分 析 仪 高ꎬ为 1.773%ꎬ与其他样品差异显著( P < 0.05)ꎻ
( Dechem ̄Tech CleverChem 380) 分析结果进行统 S1、S3、S6、S5 含量较高ꎬ其中 S5 和 S6 含量超过
计ꎬ每个样品进行 3 次重复ꎮ 1.00%ꎬ S1 和 S3 含量分别为 0.886%和 0.927%ꎬ
1.6 数据分析 均超过«中国药典»规定 0.600%的限量标准ꎻS4 和
重 楼 皂 苷 含 量 按 外 标 一 点 法 计 算ꎮ 计 算 S7 含量较低ꎬ分别为 0. 536% 和 0. 520%ꎬ均未达
公式: 标ꎮ S6 和 S5 的 重 楼 皂 苷 I 含 量 较 高ꎬ 分 别 为
皂苷 含 量 (%) = ( A × C × V × 100) / ( A × W × 0.650%和 0.547%ꎬ高于其他 5 个样品的重楼皂苷 Iꎬ
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1 000)ꎮ 而 S7 未检测到该成分ꎻ S5 重楼皂苷Ⅱ含量最高ꎬ