Page 96 - 《广西植物》2023年第6期
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1 0 8 2                                广  西  植  物                                         43 卷
            1.2 样品采收和指标测定                                          式中: A 为样品峰面积ꎻA 为对照品峰面积ꎻC
                                                                          1               2
                 每年观察植株长势情况ꎬ于种植后第 4 年的                         为对照品浓度ꎻV 为稀释倍数ꎻW 为样品称样量ꎻ统
            10 月ꎬ采用等距取样法采挖根茎ꎬ每个种植地选择                           计数据使用 Excel 和 SPSS 19.0 软件处理ꎻ品种的
            3 个采样点ꎬ每个采样点面积为 1 m × 2 mꎬ每个采                      聚类分析使用 SPSS 19.0 软件进行分析ꎻ皂苷成分
            样点随机采挖 9 株ꎬ洗净ꎬ去根ꎬ称取鲜重ꎬ置于烘                          与土壤等相关性分析和多元线性回归法分析使用

            箱烘干至恒重ꎬ称干重ꎬ并分别检测重楼皂苷Ⅰ、                             SPSS 19.0 软件进行分析ꎮ
            重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅶ的含量ꎬ计算出这 3 种皂
            苷的总和ꎬ同时分别采挖种植地土壤ꎬ进行土壤营                             2  结果与分析

            养成分分析ꎮ
            1.3 重楼皂苷的提取                                        2.1 不同种植地土壤条件及华重楼生长情况比较
                 重楼皂苷提取参照 2020 年版« 中国药典» 的                         不同种植地土壤特性及华重楼生长情况见表
            提取方法( 中华人民共和国药典ꎬ2020)ꎮ 取干粉                         1 和表 2ꎮ 由表 1 可知ꎬ7 个样本的 pH 值在 4.73 ~

            末过 3 号筛ꎬ精密称定 0.5 gꎬ置于具塞锥形瓶中ꎬ                       6.48 之间ꎬ均为酸性土壤ꎬ瓜里乡、崀山镇、龙合乡
            加入乙醇 25 mLꎬ称定重量ꎬ加热回流 30 min 后ꎬ                     生长地的有机质含量较丰富ꎬ瓜里乡杉木林、梅溪
            放冷ꎬ再称定重量ꎬ用乙醇补足减失的重量ꎬ摇匀ꎬ                            镇、崀山镇、龙合乡土壤全氮含量较丰富ꎬ梅溪镇
            滤过ꎬ取续滤液进行 HPLC 检测重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、                          和崀山镇全磷含量较丰富ꎬ除了两水乡和杆洞乡
            Ⅶ的成分ꎮ                                              外ꎬ其余种植地碱解氮含量较丰富ꎬ梅溪镇速效磷
            1.4 重楼皂苷的高效液相检测                                    含量较丰富ꎬ崀山镇速效钾含量较丰富ꎮ 由表 2
                 对照品溶液配制:对照品均由成都恩斯特生物                          可知ꎬS2 和 S6 鲜重分别为 167.45 g 和 178.45 gꎬ
            技术有限公司提供ꎬ精密称取重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ各                            差异不大ꎬ而两者的干重分别为 52.33 g 和 63.73
            对照品适量ꎬ分别加入甲醇溶解ꎬ配制成含重楼皂                             gꎬ差异较大( P < 0.05)ꎬ表明 S2 鲜货的含水量比
                               ̄1                         ̄1
            苷Ⅰ 0.563 mgmL 、重楼皂苷Ⅱ 0.506 mgmL 、              S6 高ꎬ而 S6 干重显著高出其他种植地样品 1.2 ~
                                     ̄1
            重楼皂苷Ⅶ 0.507 mgmL 的混合对照品溶液ꎮ                       8.6 倍ꎻ露地种植的 S7 产量最低ꎬ干重仅为 7.40 gꎬ
                 色谱条件(Wu et al.ꎬ 2012):流动相乙腈(A) -              远低于其余样品(P<0.05)ꎻ同一地区不同生长环
            水(B)ꎬ梯度洗脱(0 ~ 40 minꎬ30% ~ 60% Aꎻ40 ~ 45           境的 2 个样品ꎬ干重存在差异ꎬS2 是 S3 的 1. 91
            minꎬ60% ~90% Aꎻ45 ~ 55 minꎬ90% Aꎻ55 ~ 56 minꎬ      倍ꎮ 由表 2 还可知ꎬ林下栽培或遮阳种植的样品
            90% ~30% Aꎻ56 ~ 64 minꎬ 30% A)ꎻ检测波长 203            生长较好ꎬ植株比较健壮ꎬ而露地种植的样品产量
            nmꎻ体积流量 1.0 mLmin ꎻ柱温 35 ℃ꎻ进样量                   比较低ꎬ长势较差、植株比较弱小ꎬ表明光照强度
                                       ̄1
            10 μLꎮ                                             会影响其生长ꎮ
            1.5 土壤成分检测                                         2.2 不同种植地对重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ含量的影响
                 土壤的 pH 值、有机质、全氮、全磷、全钾、碱解                          样品及混合对照品的离子色谱图见图 1ꎬ根据

            氮、速效磷、速效钾含量分别按照林业标准( LY / T                        各组分的峰面积计算出样品中 3 种重楼皂苷含
            1239—1999、 LY / T 1237—1999、 LY / T 1228—          量ꎬ皂苷含量统计见表 3ꎮ 由表 3 可知ꎬ不同的生
            2015、LY / T 1232—2015、LY / T 1234—2015、LY / T      长地根茎重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ以及 3 种皂苷的总含
            1228—2015、 LY / T 2445—2015、 LY / T 2445—          量均有有差异ꎮ 从 3 种皂苷总量来看ꎬS2 含量最
            2015)进 行 测 定ꎬ 根 据 全 自 动 间 断 化 学 分 析 仪              高ꎬ为 1.773%ꎬ与其他样品差异显著( P < 0.05)ꎻ
            ( Dechem ̄Tech CleverChem 380) 分析结果进行统              S1、S3、S6、S5 含量较高ꎬ其中 S5 和 S6 含量超过

            计ꎬ每个样品进行 3 次重复ꎮ                                    1.00%ꎬ S1 和 S3 含量分别为 0.886%和 0.927%ꎬ
            1.6 数据分析                                           均超过«中国药典»规定 0.600%的限量标准ꎻS4 和
                 重 楼 皂 苷 含 量 按 外 标 一 点 法 计 算ꎮ 计 算              S7 含量较低ꎬ分别为 0. 536% 和 0. 520%ꎬ均未达

            公式:                                                标ꎮ S6 和 S5 的 重 楼 皂 苷 I 含 量 较 高ꎬ 分 别 为
                 皂苷 含 量 (%) = ( A × C × V × 100) / ( A × W ×   0.650%和 0.547%ꎬ高于其他 5 个样品的重楼皂苷 Iꎬ
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            1 000)ꎮ                                            而 S7 未检测到该成分ꎻ S5 重楼皂苷Ⅱ含量最高ꎬ
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