Page 77 - 《广西植物》2023年第7期

７ 期 程小卿等: 内生真菌 Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ. ＧＨＸ￣Ｐ１７ 代谢产物防治广藿香青枯病及保护酶的变化 １ ２ ４ ５

( １. Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ
Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０００６ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｃｅｎｔｅｒꎬ Ｙａｎｇｃｈｕｎ
Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌꎬ Ｙａｎｇｃｈｕｎ ５２９６００ꎬ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇꎬ Ｃｈｉｎａ )

Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｅｒｅ ｉｓ ａ ｌｏｎｇ ｈｉｓｔｏｒｙ ｔｏ ｃｕｌｔｉｖａｔｅ ｔｈｅ Ｐｏｇｏｓｔｅｍｏｎ ｃａｂｌｉｎ ｉｎ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅꎬ ａｎｄ ｉｔ ｉｓ ａ ｆａｍｏｕｓ
ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｍａｔｅｒｉａｌ. Ｔｈｅ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｉｌｔ ｉｓ ｔｈｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｄｉｓｅａｓｅ ｔｈａｔ ｉｍｐａｃｔｓ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｐ. ｃａｂｌｉｎ.
Ａｉｍｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ. ＧＨＸ￣Ｐ１７ ｓｔｒａｉｎ ｔｈａｔ ｉｓ ｂｅｌｏｎｇｉｎｇ ｔｏ ａｎ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｕｓ
ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ Ｐ. ｃａｂｌｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｎ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｉｌｔꎬ ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｈａｄ ｂｅｅｎ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｉｌｔ ｉｎ Ｐ. ｃａｂｌｉｎ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ
ａｆｔｅｒ ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ ｔｏ ｉｎｏｃｕｌａｔｅ ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ. ＧＨＸ￣Ｐ１７ ａｎｄ ｔｏ ｓｐｒａｙ ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓꎬ ａｎｄ
ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎｄｅｘ (ＤＩ) ｗａｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ. Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｏｆ ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ ａｍｍｏｎｉａ ｌｙａｓｅ (ＰＡＬ)ꎬ
ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ (ＰＯＤ) ａｎｄ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ (ＳＯＤ) ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ ｉｎ Ｐ. ｃａｂｌｉｎ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ
ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ｔｈｅ ＤＩ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ. ＧＨＸ￣Ｐ１７ ａｔ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ＤＩ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ２７.１６％ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ａｔ ２０４ ｈ
ａｆｔｅｒ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ. Ｔｈｅ ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ (Ｐ<０.０５). (２) Ｔｈｅ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｉｌｔ ｗａｓ
ｒｅｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ ｏｆ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｉｎ Ｐ. ｃａｂｌｉｎꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｌｏｗｌｙ ｉｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｇｒｏｕｐｓ. Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ ａｔ ２０４ ｈꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｅｃｔｓ
ｒｅａｃｈｅｄ ７４.６５％. (３) Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｏｆ ＰＡＬꎬ ＰＯＤ ａｎｄ ＳＯＤ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｏｂｓｅｒｖａｂｌｙ ａｆｔｅｒ ｔｏ ｉｎｏｃｕｌａｔｅ
ｓｐｏｒｅ ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ ａｎｄ ｔｏ ｓｐｒａｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｉｎ Ｐ. ｃａｂｌｉｎꎬ ｂｕｔ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｐｅａｋ ｔｉｍｅ ｗａｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ. ＰＡＬ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｇｒａｄｕａｌｌｙ
ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｆｔｅｒ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎꎻ ＰＯＤ ｆｉｒｓｔ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄꎬ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｇａｉｎꎬ ａｎｄ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｔｗｏ ｔｈｅ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｐｅａｋｓꎻ ＳＯＤ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｒａｐｉｄｌｙ ａｎｄ ｔｈｅｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｇｒａｄｕａｌｌｙ. Ｏｂｖｉｏｕｓｌｙꎬ ｔｈｅ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｏｆ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐ. ＧＨＸ￣
Ｐ１７ ｃａｎ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｉｎ Ｐ. ｃａｂｌｉｎꎬ ａｎｄ ｄｅｌａｙ ｔｈｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｒａｌｓｔｏｎｉａ

ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍꎬ ｂｕｔ ａｌｓｏ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｉｌｔ. Ｈｏｗｅｖｅｒꎬ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ
ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｏｆ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｂｉｏｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓꎬ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｅｃｔｓꎬ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｉｌｔꎬ Ｐｏｇｏｓｔｅｍｏｎ ｃａｂｌｉｎꎬ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅｓ

广藿香(Ｐｏｇｏｓｔｅｍｏｎ ｃａｂｌｉｎ)为唇形科刺蕊草属 欣悦等(２０２０)从烟草根际分离出 ２ 株拮抗细菌菌
一年生草本植物ꎬ干燥全草可入药ꎬ是著名南药ꎬ 株 ＧＺＹＣＴ￣４ 和 ＧＺＹＣＴ￣９ 用于防治室内烟草青枯
具有芳香化浊ꎬ开胃止呕ꎬ发表解暑之功效( 李薇 病ꎬ具有一定的防效ꎮ Ｈａｎｅｍｉａｎ 等( ２０１３) 用 ｈｒｐ
和徐鸿华ꎬ ２００３)ꎮ 新的临床研究发现ꎬ以广藿香 基因插入突变获得的无致病力青枯菌突变株ꎬ番
为主打成分的宣肺败毒基础方剂在预防新型冠状 茄青枯病病情显著降低ꎮ
病毒肺炎(ＣＯＶＩＤ￣１９) 方面也有不错的疗效( 王钏 内生菌因长期定殖于宿主植物组织内与宿主
等ꎬ２０２０ꎻ徐旭等ꎬ２０２０)ꎮ 生产上ꎬ广藿香青枯病 协同进化ꎬ二者形成了一种非常复杂的共生关系ꎬ
(ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｗｉｌｔ)是威胁广藿香生产和质量的主要病 并影响着宿主植物各种成分的积累和对胁迫的应
害ꎬ每年减产 ３０％ ~ ８０％ꎮ 广藿香青枯病是由茄科 激反应(Ｃｌｅｙ ＆ Ｓｃｈａｒｄｉꎬ ２００２)ꎮ 几乎所有被研究
雷尔氏菌(Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ)引起的一种细菌 过的植物中均能检测到内生菌的存在ꎬ这些内生
性病害ꎬ该菌被认为是热带与亚热带地区最重要 菌分布广且具有丰富的生物多样性ꎮ 药用植物是
的病原细菌之一ꎬ可危害多种作物ꎮ 茄科雷尔氏 挖掘活性内生菌资源的重要宝库ꎬ其内生菌群落
菌主要从根部伤口入侵ꎬ穿过皮层进入维管束ꎬ产 组成丰度、定殖率、分离频率、优势种群数量超过
生侵填体(ｔｙｌｏｓｅ)和胼胝质(ｃａｌｌｏｓｅ) 堵塞导管和筛 其他非药用植物ꎮ 目前ꎬ已从铁皮石斛( Ｄｅｎｄｒｏ￣
管ꎬ引起寄主青枯死亡ꎮ 青枯病属于土传病害ꎬ较 ｂｉｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ) ( 胡 克 兴 等ꎬ ２０１０ꎻ 周 琢 艳 等ꎬ
难防治ꎬ除常规的农业防治和化学防治外ꎬ多人也 ２０１７)、 甘 草 ( Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｕｒａｌｅｎｓｉｓ ) ( 陈 静 等ꎬ
从生防角度对青枯病防治进行了研究ꎮ 例如ꎬ烟 ２０１９)、 杜 仲 ( Ｅｕｃｏｍｍｉａ ｕｌｍｏｉｄｅｓ) ( 梁 雪 娟 等ꎬ
草作为典型青枯病指示植物( ｉｎｄｉｃａｔｉｖｅ ｐｌａｎｔ)ꎬ张 ２０１４)、拐枣(Ｈｏｖｅｎｉａ ａｃｅｒｂａ) ( Ｇａｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５)、