Page 69 - 《广西植物》2020年第2期
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2 0 6                                 广  西  植  物                                         40 卷

                           表 4  Gr8HGO 蛋白和 Cr8HGO 蛋白的三维结构预测
              Table 4  Three dimensional structure prediction of Gr8HGO proteins and Cr8HGO proteins

       蛋白      模板                                                   建模位置               序列相似度
      Protein  Template                                          Modelling position  Sequence similarity
     Gr8HGO ̄1  鼠Ⅱ类乙醇脱氢酶 [1e3e.1.A]                                   9 ̄353               39.65
               Mouse Class Ⅱ alcohol dehydrogenase [1e3e.1.A]
     Gr8HGO ̄2  鼠Ⅱ类乙醇脱氢酶 [1e3e.1.A]                                   7 ̄376               38.42
               Mouse Class Ⅱ alcohol dehydrogenase [1e3e.1.A]
     Gr8HGO ̄3  鼠Ⅱ类乙醇脱氢酶 [1e3e.1.A]                                   7 ̄376               38.42
               Mouse Class Ⅱ alcohol dehydrogenase [1e3e.1.A]
     Gr8HGO ̄4  鼠Ⅱ类乙醇脱氢酶 [1e3e.1.A]                                   9 ̄376               38.80
               Mouse Class Ⅱ alcohol dehydrogenase [1e3e.1.A]
     Gr8HGO ̄5  鼠Ⅱ类乙醇脱氢酶 P47H 突变体 [1e3l.1]                            7 ̄376               38.42
               P47H mutant of mouse Class Ⅱ alcohol dehydrogenase [1e3l.1]
      Cr8HGO   鼠Ⅲ类乙醇脱氢酶 [3qj5.1.A]                                   9 ̄378               44.44
               Mouse Class Ⅲ alcohol dehydrogenase [3qj5.1.A]



























    A. Cr8HGOꎻ B. Gr8HGO ̄1ꎻ C. Gr8HGO ̄2ꎻ D. Gr8HGO ̄3ꎻ E. Gr8HGO ̄4ꎻ F. Gr8HGO ̄5ꎻ 红色表示 α ̄螺旋ꎻ 黄色表示 β ̄折叠ꎻ 绿色表示环ꎮ
    A. Cr8HGOꎻ B. Gr8HGO ̄1ꎻ C. Gr8HGO ̄2ꎻ D. Gr8HGO ̄3ꎻ E. Gr8HGO ̄4ꎻ F. Gr8HGO ̄5ꎻ Red indicates α ̄helixꎻ Yellow indicates β ̄foldꎻ
    Green indicates loop.
                        图 4  Gr8HGO 蛋白和 Cr8HGO 蛋白同源二聚体的三维结构预测
          Fig. 4  Three ̄dimensional structure predictions of homodimers of Gr8HGO proteins and Cr8HGO proteins


   Gr8HGO 基因在两年生滇龙胆的根、茎和叶等组织                         al.ꎬ 2017)ꎬ因此克隆滇龙胆龙胆苦苷生物合成途
   器官中的表达情况进行分析ꎬ结果显示 Gr8HGO 基                        径中的基因并对其进行组织特异性表达分析ꎬ对
   因在叶中表达量最高ꎬ分别是根和茎中的 31.46 倍                        于揭示这一类药材主要药效成分的生物合成都具
   和 26.70 倍ꎬ根和茎中仅有少量表达(图 6)ꎮ                        有重要意义ꎮ 在滇龙胆生产中ꎬ主要存在龙胆苦
                                                     苷含量低( Pan et al.ꎬ 2015) 和连作障碍( 来源于
   3  讨论                                             临沧耀阳生物药业科技公司) 两个问题ꎬ可通过合
                                                     成生物学手段工厂化生产龙胆苦苷和培育高龙胆
       龙胆苦苷是滇龙胆、龙胆、三花龙胆和条叶龙                          苦苷含量的新品种来解决ꎬ但前提是需要首先阐
   胆、秦艽、川西獐牙菜等中药材的主要药效成分                             明龙胆苦苷的生物合成途径ꎮ 8 ̄羟香叶醇氧化还

   (Hua et al.ꎬ 2014ꎻ 国家药典委员会ꎬ 2015ꎻ Liu et          原酶是龙胆苦苷和其他单萜类生物合成途径中的
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