Page 118 - 《广西植物》2020年第6期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｊｕｎ. ２０２０ꎬ ４０(６): ８６４－８７２
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１８１２０３７
徐梦璇ꎬ 吴玲ꎬ 类彦东ꎬ 等. 马尾松细胞分裂素羟化酶基因 ＰｍＣＹＰ７３５Ａ 克隆与表达分析 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ２０２０ꎬ ４０(６): ８６４－８７２.
ＸＵ ＭＸꎬ ＷＵ Ｌꎬ ＬＥＩ ＹＤꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ｈｙｂｒｏｘｙｌａｓｅ ｇｅｎｅ ＰｍＣＹＰ７３５Ａ ｉｎ Ｐｉｎｕｓ ｍａｓｓｏｎｉａｎａ [ Ｊ].
Ｇｕｉｈａｉａꎬ ２０２０ꎬ ４０(６): ８６４－８７２.
马尾松细胞分裂素羟化酶基因 ＰｍＣＹＰ７３５Ａ
克隆与表达分析
徐梦璇 １ꎬ２ ꎬ 吴 玲 １ꎬ２ ꎬ 类彦东 １ꎬ ２ ꎬ 徐立安 １ꎬ ２∗ ꎬ 胥 猛 １ꎬ２
( １. 南京林业大学 南方现代林业协同创新中心ꎬ 南京 ２１００３７ꎻ ２. 南京林业大学 林学院ꎬ 南京 ２１００３７ )
摘 要: 该文首次在针叶树种马尾松(Ｐｉｎｕｓ ｍａｓｓｏｎｉａｎａ) 中采用 ｃＤＮＡ 末端快速克隆(ＲＡＣＥ) 技术克隆ꎬ并
鉴定出 １ 个 ＣＹＰ７３５Ａ 基因ꎮ 结果表明:马尾松 ＣＹＰ７３５Ａ 基因( ＰｍＣＹＰ７３５Ａ) ｃＤＮＡ 全长为 １ ７４４ ｂｐꎬ包括
１ ６４７ ｂｐ 的开放阅读框ꎬ４４ ｂｐ 的 ５′端非翻译区和 ５３ ｂｐ 的 ３′端非翻译区ꎮ 该基因编码蛋白由 ５４８ 个氨基酸
残基组成ꎬ其二级结构含有丰富的 α￣螺旋和无规则卷曲ꎮ 该基因编码蛋白不含跨膜区域ꎬ且无信号肽酶切
位点ꎬ在 ３９９~ ４０６ 个和 ４７５~ ４８４ 个氨基酸残基存在 Ｐ４５０ 超家族保守特征序列 ＥＴＬＲＬＹＰ(ＥｘｘＲｘｘＰ)和血红
素结 合 区 域 ( Ｈｅｍｅ￣ｂｉｎｄｉｎｇ ｒｅｇｉｏｎ ) ＦＳＦＧＰＲＫＣＶＧ ( ＦｘｘＧｘＲｘＣｘＧ )ꎮ 系 统 进 化 树 分 析 表 明ꎬ 马 尾 松
ＰｍＣＹＰ７３５Ａ 与水稻、玉米、拟南芥 ＣＹＰ７３５Ａ 蛋白归属于同一小的进化枝ꎬ可可、毛果杨、麻风树和橡胶树等
的 ＣＹＰ７３５Ａ 同源蛋白相对集中的定位于另一进化分支ꎮ 实时定量 ＰＣＲ 检测发现ꎬＰｍＣＹＰ７３５Ａ 基因在马尾
松根和茎中的表达量显著高于叶ꎬ该基因响应外源生长素 ＮＡＡ 诱导表达ꎬ随着诱导时间呈现先上升再下降
的表达趋势ꎮ 以上结果有助于深入探究 ＣＹＰ７３５Ａ 基因家族的生物学功能及其在物种间的表达调控异同ꎬ
为进一步挖掘马尾松优异基因资源奠定基础ꎮ
关键词: 细胞分裂素羟化酶ꎬ ＲＡＣＥꎬ 表达模式ꎬ 马尾松ꎬ 系统进化分析
中图分类号: Ｑ９４３ 文献标识码: Ａ
文章编号: １０００￣３１４２(２０２０)０６￣０８６４￣０９ 开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):
Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ｈｙｂｒｏｘｙｌａｓｅ
ｇｅｎｅ ＰｍＣＹＰ７３５Ａ ｉｎ Ｐｉｎｕｓ ｍａｓｓｏｎｉａｎａ
１ꎬ ２ １ꎬ ２ １ꎬ２ １ꎬ ２∗ １ꎬ ２
ＸＵ Ｍｅｎｇｘｕａｎ ꎬ ＷＵ Ｌｉｎｇ ꎬ ＬＥＩ Ｙａｎｄｏｎｇ ꎬ ＸＵ Ｌｉａｎ ꎬ ＸＵ Ｍｅｎｇ
( １. Ｃｏ￣Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ ｉｎ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｃｈｉｎａꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００３７ꎬ
Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｆｏｒｅｓｔｒｙꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００３７ꎬ Ｃｈｉｎａ )
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ｉｓ ａ ｓｏｒｔ ｏｆ ａｄｅｎｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｔｈａｔ ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅ ｃｅｌｌ ｄｉｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎꎬ ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｗｉｄｅｌｙ
ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｐｌａｎｔ ｏｒｇａｎ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｓｔｒｅｓｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ. Ｃｙｔｏｋｉｎｉｎ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ ＣＹＰ７３５Ａ ｂｅｌｏｎｇｓ ｔｏ ｔｈｅ ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０
收稿日期: ２０１９－０３－１９
基金项目: 广西科技重大专项项目 (桂科 ＡＡ１７２０４０８７￣１)ꎻ 国家自然科学基金 (３１５６０２１６) [Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｍａｊｏｒ Ｐｒｏｇｒａｍ
ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ (ＡＡ１７２０４０８７￣１)ꎻ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ (３１５６０２１６)]ꎮ
作者简介: 徐梦璇(１９９４－)ꎬ女ꎬ安徽芜湖人ꎬ硕士ꎬ研究方向为林木分子生物学ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ａｔｒｅｃｅｅ＠ ｏｕｔｌｏｏｋ.ｃｏｍꎮ
∗
通信作者: 徐立安ꎬ博士ꎬ教授ꎬ研究方向为林木遗传育种ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｌａｘｕ＠ ｎｊｆｕ.ｅｄｕ.ｃｎꎮ
