Page 142 - 《广西植物》2023年第6期

１ １ ２ ８ 广 西 植 物 ４３ 卷
１.２.５ 数据处理与分析 采用 Ｅｘｃｅｌ ２０１３ 软件进行 质量浓度为横坐标ꎬ峰面积为纵坐标ꎬ绘制标准曲
数据处理和灰度关联分析ꎻ采用 ＳＰＳＳ ２６ 软件进行 线ꎬ以 信 噪 比 为 ３ ∶ １ 计 算 分 析 方 法 的 检 测 限
皮尔逊 相 关 分 析 和 系 统 聚 类 分 析ꎻ 采 用 ＳＩＭＣＡ (ＬＯＤ)ꎮ 结果显示各化合物在一定的质量浓度范
１４.１ 软件进行 ＰＬＳＲ 分析ꎮ 色谱图和 ＰＬＳＲ 结果 围下ꎬ峰面积有良好的线性相关性( 表 ２)ꎬ相关系

￣１
通过 Ｏｒｉｇｉｎ ２０２１ 软件进行绘制ꎮ 数大于 ０.９９９ꎬＬＯＤ 为 ２.２ ~ ３０.４ ｎｇｍＬ ꎮ
２.４ 加标回收实验
２ 结果与分析 称取已知含量的牡荆叶样品ꎬ平行精密称定 ６

份ꎬ加入一定量的对照品混合储备溶液ꎬ于“１.２.３”
２.１ 指纹图谱方法学考察 项下的色谱条件进样分析ꎮ 表 ２ 结果显示ꎬ１０ 种
２.１. １ 精 密 度 试 验 取 牡 荆 叶 ( 批 号 为 Ｓ２)ꎬ 按 化合 物 的 回 收 率 为 ９０. １３％ ~ ９９. ５６％ꎬ ＲＳＤ ≤
“１.２.２”项下方法制备成供试品溶液ꎬ于“１.２.３” 项 ６.４１％ꎬ该方法的准确度良好ꎮ
的色谱条件连续进样 ６ 次ꎬ２１ 个共有峰保留时间 ２.５ 含量测定
的 ＲＳＤ≤０.４５％ꎬ峰面积的 ＲＳＤ≤１.３１％ꎬ这说明 按“ １. ２. ２” 项 下 方 法 制 备 供 试 品 溶 液ꎬ 于
试验方法符合分析检测要求ꎮ “１.２.３”项的色谱条件下ꎬ测定不同产地牡荆叶的 １０
２.１. ２ 重 复 性 试 验 取 牡 荆 叶 ( 批 号 为 Ｓ２)ꎬ 按 个化合物含量ꎬ结果见表 ３ꎮ 由表 ３ 可知ꎬ牡荆叶含
“１.２. ２” 项 下 方 法 制 备 成 ６ 份 供 试 品 溶 液ꎬ 于 有丰富的酚酸和黄酮类化合物ꎬ不同批次和产地的
“１.２.３”项的色谱条件下进样分析ꎬ２１ 个共有峰保 各成分含量存在较大差异ꎮ 以各批次含量的平均
留时间的 ＲＳＤ≤１.７２％ꎬ峰面积的 ＲＳＤ≤４.８１％ꎬ 值计算ꎬ含量最高的化合物为绿原酸ꎬ其次分别为
结果表明试验建立的方法重复性较好ꎮ 异荭草苷、木犀草苷、异牡荆素、异绿原酸 Ａ、异绿原
２.１. ３ 稳 定 性 试 验 取 牡 荆 叶 ( 批 号 为 Ｓ２) 按 酸 Ｃ、原儿茶酸、荭草苷、异绿原酸 Ｂ、新绿原酸ꎮ
“１.２.２”项下方法制备成供试品溶液ꎬ在“１.２.３” 项 ２.６ 聚类分析
的色谱条件下分别于 ０、４、８、１２、１６、１８、２４ ｈ 进样 为了研究产地与含量之间的关系ꎬ以 ２１ 个共
分析ꎬ２１ 个共有峰保留时间的 ＲＳＤ≤０.５８％ꎬ峰面 有峰的相对峰面积为变量ꎬ采用 ＨＣＡ 分析方法ꎬ
积的 ＲＳＤ≤３.９４％ꎬ结果表明 ２４ ｈ 内稳定性较好ꎮ 通过 ＳＰＳＳ ２６ 软件采用平方欧式距离为测量度对
２.２ ＨＰＬＣ￣ＥＣＤ 指纹图谱的建立及共有峰指认 １８ 批牡荆叶样品进行聚类分析(图 ３)ꎮ 图 ３ 结果
分别取 １８ 批牡荆叶ꎬ按照“１.２.２”项下方法制 表明ꎬ当欧式距离为 ４ 左右时ꎬ药材可分为 ３ 类ꎬ
备供试品溶液ꎬ同“１.２.３” 条件测定并记录色谱图 即测 定 的 １０ 个 化 合 物 总 含 量 分 别 为 １３. ０６ ~
和总峰面积ꎬ将色谱图导入« 中药色谱指纹图谱相 ３１.６９、３８.０１ ~ ４１.０３、７８.９９ ｍｇｇ ꎮ 河北产地药
￣１
似度评价系统(２０１２ 版)»ꎬ以 Ｓ８ 为参照图谱ꎬ生 材为 １３.０６ ~ ３１.６９ ｍｇｇ ꎬ而广东和广西的在分
￣１
成牡荆叶 ＨＰＬＣ￣ＥＣＤ 指纹图谱( 图 １)、混合标准 类中存在交叉情况ꎮ
品图(Ａ)和对照指纹图谱( Ｂ) ( 图 ２)ꎮ 通过多点 ２.７ 总峰面积、总酚含量、总黄酮含量及体外抗氧
校正和 Ｍａｒｋ 峰匹配得到 ２１ 个共有峰ꎬ其中峰 １、 化实验结果
２、５、８、９、１１、１２、１４、１５、１７ 分别为原儿茶酸、新绿 １８ 批牡荆叶 ＨＰＬＣ￣ＥＣＤ 总峰面积、总酚、总黄
原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷、异牡荆素、木犀 酮含量及体外抗氧化实验结果见表 ４ꎮ 由表 ４ 可
草苷、异绿原酸 Ｂ、异绿原酸 Ａ、异绿原酸 Ｃꎮ 计算 知ꎬ不同批次牡荆叶的总酚、总黄酮类化合物存在
其与 对 照 指 纹 图 谱 的 相 似 度ꎬ 相 似 度 结 果 为 较大差异ꎬ其含量分别为 １５.８２ ~ ６１.８３ ｍｇｇ 和
￣１
０.８１６ ~ ０. ９８３ꎬ 样 品 Ｓ１ － Ｓ１８ 的 相 似 度 分 别 为 ２７.８５ ~ １５７.６５ ｍｇｇ ꎮ 牡荆叶具有一定的 ＤＰＰＨ
￣１
０.８４３、０.９８３、 ０. ９６７、 ０. ９５９、 ０. ９５３、 ０. ９１６、 ０. ９６９、 自由基清除能力、ＡＢＴＳ 自由基清除能力、氧自由
０. ９６６、０. ９６８、０. ９８０、０. ９７８、０. ９５３、０. ９７４、０. ９４７、 基吸收能力及铁离子还原能力ꎬ说明牡荆叶 ８０％
０.９６４、０.８４７、０.８１６、０.９５０ꎮ 甲醇提取物具有一定抗氧化活性ꎮ
２.３ 标准曲线和检测限 ２.８ 谱－效关系分析
分别取“１.２.１”项下的对照品溶液制备成系列 ２.８.１ 皮尔逊相关分析 对牡荆叶 ＨＰＬＣ￣ＥＣＤ 样
质量混合标准品溶液ꎬ在“１.２.３”条件下ꎬ以对照品 品的总峰面积、总酚含量、 总黄酮含量分别与体外