Page 139 - 《广西植物》2023年第6期

６ 期 吴其妹等: 基于 ＨＰＬＣ￣ＥＣＤ 研究牡荆叶抗氧化的谱－效关系 １ １ ２ ５

Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｓｐｅｃｔｒｕｍ￣ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ
Ｖｉｔｅｘ ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａꎬ ｔｈｅ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｏｆ １８ ｂａｔｃｈｅｓ ｏｆ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ
ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ￣ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ (ＨＰＬＣ￣ＥＣＤ)ꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｌｕｓｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ
ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｕｒｃｅｓ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ. Ｔｈｅ ｍａｉｎ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｒｏｍ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ.
ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ. Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ
ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｗｅｒｅ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ＤＰＰＨ
ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙꎬ ＡＢＴＳ ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙꎬ ｏｘｙｇｅｎ ｒａｄｉｃａｌ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｃａｐａｃｉｔｙ ａｎｄ ｆｅｒｒｉｃ ｉｏｎ
ｒｅｄｕｃｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ｐｏｗｅｒ. Ｔｈｅ ｓｐｅｃｔｒｕｍ￣ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｏｆ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ Ｐｅａｒｓｏｎ
ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓꎬ ｇｒａｙ ｒｅｌａｔｉｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｐａｒｔｉａｌ ｌｅａｓｔ ｓｑｕａｒｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: (１)
Ｔｈｅ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｏｆ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｗｉｔｈ ２１ ｃｏｍｍｏｎ ｐｅａｋｓ ａｎｄ ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ １０ ｐｅａｋｓ
ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ. Ｔｈｅ ｏｒｄｅｒ ｏｆ ｃｏｎｔｅｎｔ ｗａｓ ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ > ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ > ｌｕｔｅｏｌｏｓｉｄｅ > ｉｓｏｖｉｔｅｘｉｎ > ｉｓｏｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ Ａ >
ｉｓｏｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ Ｃ > ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃ ａｃｉｄ > ｏｒｉｅｎｔｉｎ > ｉｓｏｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ Ｂ > ｎｅｏｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ. Ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ
ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ａｒｅａｓ ｗａｓ ｈｉｇｈꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｖａｌｕｅｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０.８１６ ｔｏ ０.９８３. (２) Ｔｈｅ
ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｌｕｓｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｈａｄ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｎ ｔｈｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ
ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｏｕｒｃｅｓ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｃａｔｅｇｏｒｉｅｓꎬ ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｏｕｔｈ ａｎｄ ｔｈｅ
ｎｏｒｔｈ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ. (３) Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ｉｎ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ
￣１ ￣１
１５.８２ ｔｏ ６１.８３ ｍｇｇ ａｎｄ ２７.８５ ｔｏ １５７.６５ ｍｇｇ ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｌｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ
Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｅｘｉｓｔｅｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ. ( ４) Ｔｈｅ ｓｐｅｃｔｒｕｍ￣ｅｆｆｅｃｔ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ
ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ ｗａｓ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍａｎｙ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓꎬ ａｎｄ
ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｐｅａｋ ９ (ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ)ꎬ ｐｅａｋ ４ ａｎｄ ｐｅａｋ ５ (ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ) ｍａｄｅ ｔｈｅ ｇｒｅａｔｅｓｔ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ
ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓ. Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｈａｓ ｇｏｏｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙꎬ
ａｎｄ ｔｈｅ ｍａｉｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘｅｓ ａｒｅ ｉｓｏｏｒｉｅｎｔｉｎ ａｎｄ ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ. Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｃａｎ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ
ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ Ｖ. ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｖｉｔｅｘ ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ ｌｅａｖｅｓꎬ ＨＰＬＣꎬ ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎꎬ ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎꎬ ｓｐｅｃｔｒｕｍ￣ｅｆｆｅｃｔ
ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐꎬ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃｓꎬ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ

牡荆( Ｖｉｔｅｘ ｎｅｇｕｎｄｏ ｖａｒ. ｃａｎｎａｂｉｆｏｌｉａ) 是马鞭 来反映中药的内在品质ꎬ其广泛应用于药用植物内
草科牡荆属植物ꎬ分布于中国华东各省及广西、广 在质量控制评价研究(王勤等ꎬ２０１７ꎻ晏朝操和张建
东、河北、贵州、四川等地ꎬ其叶具有解表化湿、祛 峰ꎬ２０２０)ꎮ ＨＰＬＣ 具有灵敏度高、分离度和重现性
痰平喘等功效(« 全国中草药汇编» 编写组ꎬ１９９６ꎻ 好、高效快速、应用范围广等特点ꎬ目前已成为色谱
国家药典委员会ꎬ２０２０)ꎮ 牡荆主要成分为酚酸、 指 纹 图 谱 研 究 的 首 选 方 法ꎬ 而 电 化 学 检 测 法
黄酮、木脂素和萜类等化合物ꎮ 现代药理研究表 (ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎꎬ ＥＣＤ)通过测量物质的电
明ꎬ牡荆具有抗氧化、抗炎镇痛、抑菌、抗肿瘤等生 信号变化ꎬ可选择性地检测具有氧化还原性质的化
物活性( 舒柄垚等ꎬ２０２０)ꎮ 抗氧化是牡荆的主要 合物ꎬ如带有硝基、巯基、酚羟基等基团的有机化合
生物活性之一ꎬ向蓉等(２０２１) 研究表明牡荆水提 物ꎮ 因此ꎬ可用 ＨＰＬＣ￣ＥＣＤ 筛查药用植物的抗氧化
取物和醇提取物均具有一定的抗氧化活性ꎬ其中 活性成分(罗敏等ꎬ２０２０ꎻ Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２１)ꎮ 目
酚酸和 黄 酮 类 物 质 是 其 主 要 活 性 成 分ꎮ Ｈｕ 等 前ꎬ谱－效关系研究的分析方法众多ꎬ其中灰度关联
(２０１５)研究上证实大部分酚酸类物质具有较强的 分析法(ｇｒａｙ ｒｅｌａｔｉｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓꎬ ＧＲＡ)能够分析共有

２ꎬ ２′￣联 氮￣二 ( ３￣乙 基 苯 并 噻 唑 啉￣６￣磺 酸 ) 峰峰面积的变化与药效指标的变化趋势ꎬ偏最小二
(ＡＢＴＳ)自由基清除活性ꎮ 然而ꎬ其抗氧化活性药 乘 回 归 分 析 法 ( ｐａｒｔｉａｌ ｌｅａｓｔ ｓｑｕａｒｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ
效物质基础尚不明确ꎬ并且未将指纹图谱结合生 ａｎａｌｙｓｉｓꎬ ＰＬＳＲ) 对于系统的信息和噪声更易于辨

物活性进行质量控制评价研究ꎮ 别ꎬ可以弥补灰度关联分析法中关联度均为正值所
谱－效关系研究是将药用植物的指纹图谱与其 带来的分析误差 ( 刘晓燕等ꎬ２０２０)ꎮ 因此ꎬ 常将
药效结果相结合起来ꎬ通过建立“谱－效” 数学模型 ＧＲＡ 和 ＰＬＳＲ 相结合应用于谱－效关系分析研究ꎮ