Page 8 - 《广西植物》2023年第6期
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９ ９ ４ 广 西 植 物 ４３ 卷
Ｓｉｌｖａ 进行物种注释分析ꎬ统计各样本的群落组成ꎮ １ꎬ图 １:ｃ)ꎬ管叶槽舌兰根内生真菌的相对丰度发生
以样本中数据量最少的为标准进行均一化处理 了改变ꎬ青霉属( Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ)、Ａｐｏｒｏｓｐｏｒａ、瘤菌根菌
后ꎬ基于 Ｑｉｉｍｅ 软件计算 α 多样性指数及 β 多样 属( Ｅｐｕｌｏｒｈｉｚａ) 经 干 燥 后 的 丰 度 降 低ꎬ 而 枝 孢 属
性指数ꎬ并进行 ｔ￣ｔｅｓｔ 差异显著性检验ꎮ 利用 Ｒ 软 (Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ)、镰刀菌属(Ｆｕｓａｒｉｕｍ)和 Ｍｙｃｏａｃｉａ 在
件的 ＶｅｎｎＤｉａｇｒａｍ 包和 Ｖｅｇａｎ 包进行维恩图及无 干燥后丰度明显升高ꎬ小脆柄菇属(Ｐｓａｔｈｙｒｅｌｌａ) 和
度 量 多 维 标 定 法 ( ｎｏｎ￣ｍｅｔｒｉｃ ｍｕｌｔｉ￣ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ 刺盘孢属(Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ)的相对丰度经硅胶干燥后
ｓｃａｌｉｎｇꎬＮＭＤＳ)分析ꎮ 为进一步挖掘分组样本间的 的丰度为零ꎮ 从排名前 １５ 的硅胶干燥处理前后管
差异显著性真菌和细菌类群ꎬ选用 Ｍｅｔａｓｔａｔ、ＬＥｆＳｅ 叶槽舌兰根部内生真菌属水平绝对丰度值变化可
统计分析方法对分组样本的物种组成和群落结构 以看出ꎬ青霉属、瘤菌根菌属、Ｋｅｉｓｓｌｅｒｉｅｌｌａ 及亚隔孢
进行差异显著性检验ꎮ 对所有样品的相关性指数 壳属( Ｄｉｄｙｍｅｌｌａ) 在干燥后丰度值降低ꎬ其余属如
(斯皮尔曼相关系数 ＳＣＣ) 进行计算后ꎬ用 ｃｕｔｏｆｆ ＝ Ａｐｏｒｏｓｐｏｒａ、枝孢属、曲霉属(Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ)、镰刀菌属、
０.６ 对相关系数的绝对值进行过滤ꎬ结合物种丰度 假裸囊菌属( Ｐｓｅｕｄｏｇｙｍｎｏａｓｃｕｓ)、红菇属( Ｒｕｓｓｕｌａ)
构建共发生网络(Ｎｅｔｗｏｒｋ)图ꎮ 和链格孢属(Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ) 等在干燥后丰度值增加ꎬ而
小脆柄菇属和刺盘孢属在经硅胶干燥后的根部样
２ 结果与分析 品的丰度值为零ꎮ 这与管叶槽舌兰根内生真菌在
属水平的相对丰度变化趋势总体相似ꎮ
基于 Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＨｉＳｅｑ 测序技术ꎬ从 １６ 个管叶槽 根据 ＯＴＵｓ 聚类结果(本文将未注释到的 ＯＴＵ
舌兰根部 ＩＴＳ 共获得 ２ ８３４ ０４６ 条有效 Ｔａｇｓꎬ有效 包含在内一起计算ꎬ下同)ꎬ绘制 ＯＴＵｓ 韦恩图( 图
Ｔａｇｓ 范围为 １６４ ６６５ ~ １８７ ２３６ꎮ 从管叶槽舌兰根 １:ｇ)ꎬ结果显示新鲜管叶槽舌兰根样中内生真菌
部 １６Ｓ 共获得 ２ ３７５ ４０２ 条有效 Ｔａｇｓꎬ有效 Ｔａｇｓ 范 特有的 ＯＴＵｓ 有 ５６ 个ꎬ 主 要 是 子 囊 菌 门 ( １６ 个
围为 １２２ ８８６ ~ １６１ ５１６ꎮ ＯＴＵｓ)和担子菌门(１２ 个 ＯＴＵｓ)ꎻ而经硅胶干燥后
２.１ 内生菌群落物种组成和采样处理对其影响 根样中内生真菌有 １２３ 个特有 ＯＴＵｓꎬ主要隶属于
注释结果发现ꎬ新鲜管叶槽舌兰注释到的根内 子囊 菌 门 ( ４７ 个 ＯＴＵｓ)ꎬ 担 子 菌 门 仅 有 １０ 个
生真菌有 ６ 门 ４６ 科 ５１ 属ꎬ其中子囊菌门相对丰度 ＯＴＵｓꎻ２ 个分组共有的 ＯＴＵｓ 仅有 ６１ 个ꎬ其中有 ２１
为 ５２.２０％ꎬ担子菌门相对丰度为 ２０.２２％ꎬ球囊菌门 个 ＯＴＵｓ 属于子囊菌门ꎬ８ 个 ＯＴＵｓ 属于担子菌门ꎮ
(Ｇｌｏｍｅｒｏｍｙｃｏｔａ)、罗兹菌门(Ｒｏｚｅｌｌｏｍｙｃｏｔａ)、被孢霉 这表明干燥后的管叶槽舌兰根样中内生真菌群落
门(Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌｏｍｙｃｏｔａ)、毛霉门相对丰度在 １％左右ꎻ 在丧失掉新鲜根样中的一些真菌类群的同时ꎬ也
而经硅胶干燥后的管叶槽舌兰注释到的根内生真 产生了相当数量的新的真菌类群ꎬ这些新产生的
菌有 ６ 门 ８８ 科 １１６ 属ꎬ其中子囊菌门相对丰度为 真菌主要隶属于子囊菌门ꎮ
５７.８４％ꎬ担子菌门相对丰度为 ３.６８％ꎬ球囊菌门、被 在内生细菌方面ꎬ新鲜管叶槽舌兰根内生细菌
孢霉门、毛霉门、罗兹菌门的相对丰度在 １％以下ꎮ 注释到 １５ 门 １０５ 科 １７８ 属ꎬ其中变形菌门相对丰度
在 ２ 个分组中ꎬ子囊菌门都占绝对优势ꎮ 相比较而 为 １８. ２１％ꎬ 蓝 藻 门 ( Ｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ) 相 对 丰 度 为
言ꎬ干燥后管叶槽舌兰根样内生真菌类群数量变 １.７８％ꎬ厚 壁 菌 门 相 对 丰 度 为 １. ４１％ꎬ 放 线 菌 门
多ꎻ新鲜管叶槽舌兰根样内生真菌群落中子囊菌 (Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ) 相 对 丰 度 为 １. １４％ꎬ 拟 杆 菌 门
门、球囊菌门占比低于硅胶干燥根样中的内生真菌 (Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ)、螺旋体门(Ｓｐｉｒｏｃｈａｅｔｅｓ)、酸杆菌门
群落ꎬ而兰科菌根真菌最多的担子菌门明显高于硅 (Ａｃｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ)、绿弯菌门(Ｃｈｌｏｒｏｆｌｅｘｉ) 的相对丰度
胶干燥根样中的内生真菌群落(图 １:ａ)ꎮ 经硅胶干 低于 １％ꎻ而经硅胶干燥后的管叶槽舌兰注释到的
燥后ꎬ管叶槽舌兰根内生真菌在科水平(图 １:ｂ) 的 根内生细菌有 ２１ 门 １５４ 科 ３３６ 属ꎬ其中变形菌门相
相对丰度发生了改变ꎬ曲霉科(Ａｓｐｅｒｇｉｌｌａｃｅａｅ) 在干 对丰度为 ４８.７１％ꎬ厚壁菌门(Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ) 相对丰度
燥后丰度明显降低ꎬ而枝孢霉科( Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉａｃｅａｅ) 为 ８.３１％ꎬ放线菌门相对丰度为 ５.６７％ꎬ拟杆菌门
在干燥后丰度明显升高ꎬ小丛壳科(Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｅａｅ) (Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ)相对丰度为 ３.４１％ꎬ蓝藻门相对丰度
和胶膜菌科(Ｔｕｌａｓｎｅｌｌａｃｅａｅ)的相对丰度在经硅胶干 为 ２. ５８％ꎬ 螺 旋 体 门、 酸 杆 菌 门、 硝 化 螺 旋 菌 门
燥后的根样品中的丰度几乎为零ꎮ 在属水平上(表 (Ｎｉｔｒｏｓｐｉｒａｅ)、绿弯菌门的相对丰度低于 １％(图 １:
