Page 94 - 《广西植物》2024年第11期

２ ０ ７ ８ 广 西 植 物 ４４ 卷
穿心莲( Ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｉｓ ｐａｎｉｃｕｌａｔａ) 是我国重要 ( ａｍｍｏｎｉｕｍ ｎｉｔｒｏｇｅｎꎬ ＡＮ )、 酰 胺 态 氮 ( ｕｒｅａ
的南药大宗药材之一ꎬ在全球草药市场占有重要 ｎｉｔｒｏｇｅｎꎬＵＮ)和氨基酸态氮( ｇｌｙｃｉｎｅ ｎｉｔｒｏｇｅｎꎬＧＮ)
地位ꎮ 它起源于南亚的印度和斯里兰卡ꎬ广泛应 处理ꎮ 营 养 液 中 的 其 他 矿 物 质 营 养 素 含 有 １
用于南亚、东南亚和东亚传统医药ꎬ具有祛热解 ｍｍｏｌＬ ＮａＨ ＰＯ 、２ ｍｍｏｌＬ ＫＣｌ、２ ｍｍｏｌＬ ￣１
￣１
￣１
２ ４
毒ꎬ消炎止痛等功效ꎬ是“天然抗生素药物”ꎮ 笔者 ＣａＣｌ 、１ ｍｍｏｌ Ｌ ＭｇＳＯ 、１８ μｍｏｌ Ｌ Ｈ ＢＯ 、
￣１
￣１
２ ４ ３ ３
前期研究表明ꎬ氮素形态影响穿心莲主要活性成 ￣１ ￣１
０.１５ μｍｏｌＬ ＺｎＳＯ 、０.１５ μｍｏｌＬ ＣｕＳＯ 、０.５２
４ ４
分穿心莲内酯的积累ꎬ铵态氮和有机态的酰胺态 μｍｏｌＬ ( ＮＨ ) Ｍｏ Ｏ 、９.５ μｍｏｌＬ ＭｎＳＯ 和
￣１
￣１
氮和氨基酸态氮相对于硝态氮能提高穿心莲内酯 ４ ６ ７ ２４ ４
３６ μｍｏｌＬ Ｆｅ￣ＥＤＴＡꎮ 为了维持各处理中 Ｋ 和
￣１
＋
含量(Ｚｈｏｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２１)ꎮ 鉴于植物对不同氮素
Ｃａ 浓度 一 致ꎬＮＮ 处 理 不 加 ＫＣｌ 和 ＣａＣｌ ꎬ Ｋ 和
＋
２＋
形态的吸收利用普遍存在差异ꎬ因此推测不同氮 ２
２＋
Ｃａ 由 ＫＮＯ 和 Ｃａ( ＮＯ ) 提供ꎮ 将溶液的 ｐＨ 值
素形态对穿心莲内酯成分积累的影响可能与穿心 ３ ３ ２ ￣１
莲对不同形态氮源的吸收、分配差异有关ꎮ 本研 调至 ５.８ ~ ６.０ꎬ并在营养液中加入 １０ ｍｇＬ 氨苄
青霉素以抑制微生物繁殖ꎮ 每周浇营养液 ２ 次ꎬ
究以 ４ 种氮素形态作为唯一氮源ꎬ采用无土基质
每盆 １００ ｍＬꎮ 每处理长势一致的植株有 ４０ 株左
培育穿心莲植株ꎬ通过生理生化研究方法和 Ｎ 稳
１５
右ꎬ可满足取样的需求ꎮ 处理 ３０、５０、７０、８５ ｄ 后取
定同位素示踪技术ꎬ拟探讨穿心莲不同生长时期
样分析ꎮ
对各氮素形态的吸收利用特征及其与穿心莲内酯
成分积累的关系ꎬ以期为穿心莲氮素养分的科学 １.２ 测定方法
１.２.１ 光合作用 ＣＯ 响应曲线 分别在移栽后 ３０ ｄ
管理提供理论依据ꎮ ２
(快速生长期)、５０ ｄ( 拔节期)、７０ ｄ( 现蕾期) 和
１ 材料与方法 ８５ ｄ(开花期)选取长势一致的植株 ３ 株ꎬ采用 ＬＩ￣
６４００ＸＴ 便携式光合测定系统ꎬ测定主茎上第 ９ 至
１.１ 试验材料和处理 第 １２ 叶位( 不同时期叶位不同ꎬ但同一时期各处
以药用植物穿心莲为材料ꎬ原始种子由广西 理叶位相同) 叶片光合作用 ＣＯ 响应特征ꎮ 使用
２
药用植物园种子库提供ꎬ由钟楚博士鉴定为爵床 内置 ＬＥＤ 光源ꎬ红蓝光比例为 ９ ∶ １ꎬ光合有效辐
￣２ ￣１
科穿心莲属植物穿心莲ꎮ 经本课题组筛选和纯 射(ＰＡＲ) 为 １ ５００ μｍｏｌ ｍ ｓ ꎬ叶 室 温 度 ２５
化后获得性状一致、稳定的株系ꎬ用于后续研究ꎮ ℃ ꎬ相对湿度 ６０％ ~ ７０％ꎬＣＯ 浓度梯度为 ５０、１００、
２
在培养室昼夜恒温( 约 ２８ ℃ ) 条件下ꎬ将穿心莲 １５０、２００、３００、４００、６００、８００、１ ０００、１ ２００、１ ５００
￣１
种子放在装有湿滤纸的培养皿中发芽ꎬ过程中保 μｍｏｌｍｏｌ ꎮ
￣２
持滤纸完全湿润ꎮ 光照周期为 １４ ｈ 光照 / １０ ｈ 黑 将叶片置于叶室中ꎬ在 １ ５００ μｍｏｌｍ ｓ ￣１
￣１
￣２ ｓ 的 光 合 有 效 辐 射 ＰＡＲ、４００ μｍｏｌ ｍｏｌ ￣１ ＣＯ 浓 度 下 适 应 至 少 ２０
暗ꎬ ２００ μｍｏｌ ｍ ２
( ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃａｌｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｒａｄｉａｔｉｏｎꎬ ＰＡＲ) ꎬ相对湿 ｍｉｎꎬ待各参数稳定后ꎬ开始测量各 ＣＯ 浓度下的光
２
度 ６０％ꎮ 大约 １０ ｄ 后ꎬ将发芽的幼苗移植到装 合气 体 交 换 参 数ꎮ 根 据 ＦｖＣＢ 模 型 ( Ｆａｒｑｕｈａｒ ｅｔ
有 蛭 石、 珍 珠 岩 和 品 氏 泥 炭 土 ( 体 积 比 约 为 ａｌ.ꎬ １９８０)对 ＣＯ 响应曲线进行拟合ꎬ计算最大羧
２
４ ∶ １ ∶ １) 混合基质的育苗盘中继续生长ꎬ定期浇 化速率(Ｖ ｃ ｍａｘ )和最大电子传递速率(Ｊ ｍａｘ )ꎮ
水防止幼苗干旱ꎬ直到 ５ 对叶龄ꎮ 选取健康、长 １.２.２ 叶绿素含量、比叶重和比叶氮测定 测定完
光合作用之后ꎬ用直径 ６ ｍｍ 的打孔器在叶片中部
势一致的幼苗移植到装有蛭石和珍珠岩( ４ ∶ １)
的花盆中进行 Ｎ 形态处理ꎮ 每盆 １ 株ꎬ移栽前抖 主脉两侧各取 ４ 片叶圆片置于 １０ ｍＬ 离心管中ꎬ
净根上附着的基质ꎬ每处理 ４８ 盆( 株) ꎮ 将植物 加入 ５ ｍＬ 丙酮 ∶ 乙醇(１ ∶ １ꎬ体积比) 混合液ꎬ在
置于光温培养室中进行生长ꎬ光、温环境同上ꎮ 室温暗处浸提 ２４ ｈꎬ直至叶片完全变白ꎮ 测定浸
￣１ ￣１ 提溶液在 ６６３ ｎｍ 和 ６４５ ｎｍ 处的吸光值ꎬ计算叶绿
分别 以 ２ ｍｍｏｌ Ｌ ＫＮＯ 和 ２ ｍｍｏｌ Ｌ
３
Ｃａ(ＮＯ ) 、６ ｍｍｏｌＬ ＮＨ Ｃｌ、３ ｍｍｏｌＬ 尿 素 素 ａ、ｂ 和总叶绿素含量(张宪政ꎬ１９８６)ꎮ
￣１
￣１
３ ２ ４
￣１ 另用打孔器在叶片两侧各取 ５ 片叶圆片ꎬ７０
[ＣＯ(ＮＨ ) ]以及 ６ ｍｍｏｌＬ 甘氨酸提供氮源ꎬ
２ ２
分别 作 为 硝 态 氮 ( ｎｉｔｒａｔｅ ｎｉｔｒｏｇｅｎꎬ ＮＮ)、 铵 态 氮 ℃ 烘干至恒重ꎬ称重后ꎬ叶片用 Ｈ ＳＯ －Ｈ Ｏ 在 ２６０
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４
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