Page 197 - 《广西植物》2023年第4期
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࿗ 期 付 欢 欢 等 ᧥ 正交法优选调控秦艽次生代谢产物含量变化的条件 Ꭾ Ꭾ ँ
成前者的主要供给者ᤥɟᑕႿ੫ 等ྉԡϟɯ 和 ɟᑕႿ੫ 等 ᓂ 的 શᑕᨃ̀ᖔ静置 ሕԡ ቝᔽႿᖔ加入适量 ϟቝᆍኼᓂ ̀ऊ
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ྉԡϟँɯ在丹参毛状根中添加洛伐他汀和膦胺霉 调节 ᡱ̀ 至 Ꭾᖔ 加纯化水定容至 ጢԡ ቝᓂᖔ 得 ጢԡԡ
素ᖔ探讨 ᥘዶ 和 ᥘጶ۪ 通路在丹参毛状根细胞生 ဂቝᆍኼᓂ 的洛伐他汀母液ᖔ࿗ ቩ 备用ᤥ
᥋ϟ
长和次生代谢产物积累中的作用ᖔ发现 ᥘዶ 途径 称取 ԡԡϟԡ ԡ ੫ 膦胺霉素于 ጢԡ ቝᓂ 容量瓶中ᖔ
在丹参 毛 状 根 细 胞生长中发挥着重要作用ᖔ 而 加纯化水定容至 ጢԡ ቝᓂᖔ超声溶解ᖔ得到浓度为
ᥘጶ۪ 途径是丹参次生代谢产物含量的积累的主要 ጢ࿗ᤃ ဂቝᆍኼᓂ 的膦胺霉素母液ᖔ࿗ ቩ 备用ᤥ
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途径ᤥ 但是ᖔ有关 ᥘዶ 和 ᥘጶ۪ 途径在秦艽次生 称取马钱苷酸 ԡँጢ ቝ੫ܦ獐牙菜苦苷 ϟᤃ ቝ੫ܦ
代谢产物生物合成途径中的作用机制尚缺乏相关 龙胆苦苷 ጢ ቝ੫ 和獐牙菜苷 ϟ࿗ ቝ੫ 的对照品ᖔ
的研究ᤥ 基于此ᖔ本研究依据抑制剂膦胺霉素和 加甲醇定容至 ϟቝᓂ 容量瓶中ᖔ混匀ᖔ得到质量浓
洛伐他汀的抑制原理ᖔ采用 ሕ 因素 ࿗ 水平正交试验 度为马钱苷酸 ԡ ँጢ ቝ੫ኼቝᓂ ܦ獐牙菜 苦 苷 ϟ ᤃ
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的方法ᖔ通过设置不同浓度的膦胺霉素和洛伐他 ቝ੫ኼቝᓂ ܦ龙胆苦苷 ጢ ቝ੫ ኼ ቝᓂ 和獐牙菜苷
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汀处理一月生秦艽幼苗ᖔ选取不同的取样天数ᖔ通 ϟ࿗ ቝ੫ኼቝᓂ 的母液ᖔ࿗ ቩ 备用ᤥ
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过评估其次生代谢产物含量的变化ᖔ拟筛选可抑 ϓॹ 正交试验及样品处理
制秦艽中马钱苷酸ܦ獐牙菜苷ܦ獐牙菜苦苷ܦ龙胆 参照ྉ 于淑池ᖔԡϟሕଫ罗云云ᖔԡϟँɯ 按表 ϟ 的
苦苷含量的最优条 件ᖔ 以期为进一步研究秦艽 因素ܦ水平进行试验设计喷施处理 ϟᤃ 组秦艽幼
ᥘጶ۪ 和 ᥘዶ 代谢途径调控机制和解析环烯醚萜 苗ᖔ每组处理 ሕԡ 株ᤥ 处理后放置 ᤃ ቩ 下光照 ϟᤃ
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类化合物的合成机理奠定基础ᤥ ၤኼʛ ᤥ 取不同处理条件下的幼苗ᖔ用纯水冲洗干
净幼苗上的土壤和杂质ᖔ滤纸吸干水分后置于旋
ϟজ 材料与方法 蒸瓶中ᖔ加入少量甲醇减压 ϟጢ ၤ 抽干水分ᤥ 将干
燥后的秦艽幼苗称重后加入 ϟጢ ቝᓂ 离心管中ᖔ加
ϓॹϓ 材料和主要仪器 入 ϟቝᓂ 甲醇超声提取 ሕ 次ᖔ每次 ϟጢ ၤᖔ过滤得到
秦艽种子购自甘肃庆阳正宁县ᖔ于温室撒播 绿色的提取液ᖔ减压浓缩ᖔ得到灰绿色的固体物
种子给予 ϟᤃ ၤ 光照ᖔऐ ၤ 黑暗处理ᖔ覆膜出苗后培 质ᖔ黏附在瓶壁ᖔ称重ᤥ 加入 ϟቝᓂ 甲醇溶解ᖔ过
养一个月ྉ 叶片 对生ᖔ高度 ዹቝ 左右ɯ 用于试 ԡ ဂቝ 滤膜ᖔ滤液为样品溶液ᤥ
验ᤥᓂऊ᥋ԡᣮ 分析型高效液相色谱仪ྉ 日本岛津 ϓॹጇ ̵ۗᒦࣷ 色谱条件及标准曲线绘制
公司ɯᖔ色谱柱ྉ ۼᔀዹၤᖔ࿗ᤃ ቝቝ ġ ጢԡ ቝቝᖔጢ ဂቝɯᖔ 流动相为 ԡϟᠮ磷酸水 ᨒ 乙腈ᖔ洗脱梯度为 ԡጲ
精密电子天平ྉ 赛多利斯科学仪器有限公司ɯᖔ超 ϟԡ ቝᔽႿᖔϟᠮ 乙腈ଫϟԡ ጲ ϟሕ ቝᔽႿᖔϟԡᠮ 乙腈ଫϟሕ ጲ ሕԡ
声波清洗仪ྉ 小美仪器有限公司ɯᖔᨃା୩᥋ϟԡԡ 油浴 ቝᔽႿᖔϟᠮ乙腈ᖔ流速为 ԡ ऐ ቝᓂኼ ቝᔽႿ ᖔ检测波长
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锅ྉ上海爱朗仪器有限公司ɯᤥ ጢ࿗ Ⴟቝᖔ进样量 ϟԡ ဂᓂᖔ柱温为 ሕԡ ቩ ᤥ
ϓॹԣ 试剂 将配制好的标准品溶液分别用甲醇按照倍数
马钱 苷 酸 ྉ 批号᧥ ϟᎮ୩ϟϟାϟ࿗ԡᎮᖔ 纯度 ᤠ 稀释ᖔ制备不同浓度梯度的标准品溶液ᤥ 马钱苷酸
ँऐᠮɯܦ獐牙 菜 苦 苷 ྉ 批号᧥ ɟጢȮϟ᥈ϟ࿗ँᖔ 纯度 ᤠ 浓 度 梯度为 ԡँጢԡ ԡܦ ԡ࿗Ꭾጢ ԡܦ ԡሕᎮ ጢܦ ԡϟϟऐ ऐܦ
ँऐᠮɯܦ龙胆苦苷ྉ 批号᧥ɟँዶϟϟ͐ϟϟԡᖔ纯度ᤠ ԡԡጢँ ࿗ܦԡԡँ Ꭾܦ ԡԡϟ࿗ ँܦ ԡԡԡᎮ ጢܦ ԡԡԡሕ ऐܦ ԡԡԡϟ ँ
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ँऐᠮɯܦ獐牙菜苷 ྉ 批号᧥۪ጢᨃϟԡèϟԡϟሕ࿗࿗ᖔ纯度 ᤠ ቝ੫ኼቝᓂ ଫ獐牙菜苦苷浓度梯度为ϟᤃԡ ԡܦԡᤃሕԡ ԡܦ
ँऐᠮɯܦ 洛伐他汀 ྉ 批号᧥ ɟሕ᧕ᤃऊᎮሕᎮጢᖔ 纯度 ᤠ ԡሕϟጢ ԡܦ ԡϟጢᎮ ጢܦ ԡԡᎮऐ ऐܦ ԡԡሕँ ࿗ܦ ԡԡϟँ Ꭾ ቝ੫ ኼ
ँऐᠮɯ均购自上海源叶生物科技有限公司ᤥ 膦胺 ቝᓂ ଫ 龙胆苦苷浓度梯度为 ጢԡ ԡܦ ϟᤃԡ ԡܦ
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霉素 ྉ 批号᧥ ᣮԡ࿗ԡጢጢᖔ ऊ̀ጶᥘጶ᥈ጶႿ 公司ɯᖔ 甲醇 ԡᤃሕԡ ԡܦԡሕϟጢ ԡܦ ԡϟጢᎮ ጢܦ ԡԡᎮऐ ऐܦ ԡԡሕँ ࿗ܦ ԡԡϟँ Ꭾ
ྉ成都市科隆化学品有限公司ɯᖔ乙腈ྉ上海霍尼韦 ቝ੫ኼቝᓂ ଫ獐牙菜苷浓度梯度为ϟ࿗ԡ ԡܦԡᤃԡ ԡܦ
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尔贸易有限公司ɯᖔ磷酸ྉ 天津市科密欧化学试剂 ԡሕϟԡ ԡܦԡϟጢጢ ԡܦԡԡᎮᎮ ጢܦԡϟँሕ ऐܦԡԡԡँ Ꭾܦԡԡԡ࿗ ऐܦ
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有限公司ɯᤥ ԡԡԡ ࿗ ቝ੫ኼቝᓂ 的对照品溶液ᖔ依据上述色谱条件
ϓॹᇺ 溶液配制 依次进样测定ᤥ 以进样浓度ྉᣏᖔ੫ኼቝᓂ ɯ和峰面积
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称取 ԡԡϟԡ ࿗ ੫ 洛伐他汀于 ጢԡ ቝᓂ 容量瓶中ᖔ ྉɔɯ绘制标准曲线ᤥ 马钱苷酸的线性回归方程为
加入 ቝᓂ 无水乙醇ᖔ混匀后加入 ԡ ဂᓂ ԡᤃ ቝᆍኼ ɔ ᢉ ࿗ ጢᎮϟ ࿗ϟᤃԡᣏͱϟϟ ԡጢँᖔ线性范围为 ԡԡԡ ԡ ጲ
