Page 115 - 《广西植物》2022年第9期

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谢宇峰ᖔ 秦利军঎ 寡聚核苷酸介导的基因突变技术创制抗除草剂烟草新种质 ЏȮ૒঎ 广西植物ᖔ ԰ԡ԰԰ᖔ ࿗԰ྉँɯ᧥ ϟጢጢϟͱϟጢᤃԡ঎
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寡聚核苷酸介导的基因突变技术

创制抗除草剂烟草新种质

谢宇峰ᕷ 秦利军 ᥍

ྉ 贵州大学 农业生物工程研究院 ᣰ 山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室 ᣰ 生命科学学院ᖔ 贵阳 ጢጢԡԡ԰ጢ ɯ

摘জ 要ᧅ 为进一步优化烟草ྉટᔠዞᅳᡙᔠᐹႥᐹ ᡙᐹᤇᐹዞࣩቂɯ品种ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ的种质ᖔ该研究采用寡聚核苷酸介导的基因突变
ྉᆍ᤟ᔽ੫ᆍႿࣼዹ᤟ᔀᆍᡷᔽʛᔀ᥋ቝᔀʛᔽᑕᡷᔀʛ ቝࣼᡷᑕ੫ᔀႿᔀ༁ᔽ༁ᖔᨃᥘᥘɯ技术ᖔ利用植物中支链氨基酸合成途径中第一个关键酶ᗵᗵᗵ乙酰
乳酸合成酶ྉᑕዹᔀᡷᆍ᤟ᑕዹᡷᑕᡷᔀ ༁ᢃႿᡷၤᑕ༁ᔀᖔዶᓂ୩ɯ突变后烟草对氯磺隆除草剂不敏感且产生抗性的特征ᖔ以及 શऊା᧧ 报道
的 ዛᒦ୒ 基因序列同源克隆了烟草品种ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ中的 ዛᒦ୒ 基因ᖔ并根据 ዛᒦ୒ 基因序列设计用于定点突变的 ኏શዶᣰ
᧕શዶ 嵌合体ᖔ导入烟草品种ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ 创制对氯磺隆除草剂具有抗性的烟草新种质ᤥ 结果表明᧥ྉϟɯ 烟草品种
ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ具有 ԰ 条 ዛᒦ୒ 基因ᖔ即 ዛᒦ୒ ୒ࣩቴዛ 和 ዛᒦ୒ ୒ࣩቴଧᖔ大小分别为 ԰ԡԡ࿗ ᤦᡱ 和 ԰ԡϟԡ ᤦᡱᤥ ྉ԰ɯ根据 ԰ 个基因的
保守位点 ዛᒦ୒ ୒ࣩቴዛ ጢऐऐ 脯氨酸位点和 ዛᒦ୒ ୒ࣩቴଧ ϟᎮϟँ 色氨酸位点设计用于 ዛᒦ୒ 基因核苷酸第 ጢऐऐ 位点的 ऊၤ᤟᥋
ጢऐऐ 嵌合体和第 ϟᎮϟँ 位点的 ऊၤ᤟᥋ϟᎮϟँ 嵌合体ᤥྉሕɯ利用基因枪成功将这 ԰ 个片段导入烟草愈伤组织ᖔ愈伤组
织依次经抗性芽分化和生根ᖔ共获得氯磺隆抗性植株 ԰԰ 株ᤥྉ࿗ɯ抗性植株 ዶᓂ୩ 酶活性测定显示ᖔऐ 株抗性植
株具有较强的活性ᖔ进一步对抗性植株中跨突变位点保守扩增ܦ测序ᖔ最终确定有 ԰ 株ྉ஦ϟϟ 和 ᤦϟऐɯ 分别在
ጢऐऐܦϟᎮϟँ位点产生定点突变ᤥ 综上认为ᖔ该研究在获得烟草品种ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ抗氯磺隆新种质同时ᖔ也为培育抗性
烟草新种质提供了理想的亲本材料ᤥ
关键词ᧅ 烟草ᖔ ዛᒦ୒ 基因ᖔ 除草剂抗性ᖔ 氯磺隆ᖔᨃᥘᥘ 技术
中图分类号ᧅ ͐ँ࿗ሕ঎԰জ জ 文献标识码ᧅ ዶজ জ 文章编号ᧅ ϟԡԡԡ᥋ሕϟ࿗԰ྉ԰ԡ԰԰ɯԡँ᥋ϟጢጢϟ᥋ϟԡ

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收稿日期ᧅ ԰ԡ԰ϟͱԡ࿗ͱϟԡ
基金项目ᧅ 贵州大学人才引进基金ྉ Џ԰ԡϟጢ૒԰࿗ 号ɯଫ贵州大学人才培育项目ྉ贵州科技计划项目 Џ԰ԡϟऐ૒ጢᎮऐϟ 号ɯ Џ୩ࣼᡱᡱᆍʢᡷᔀʛ ᤦᢃ
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第一作者ᧅ 谢宇峰ྉϟँँጢͱɯᖔ硕士研究生ᖔ研究方向为植物基因工程ᖔྉጶ᥋ቝᑕᔽ᤟ɯጢᎮᎮጢ԰ँᎮሕԡ݀ ीी঎ዹᆍቝᤥ
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通信作者ᧅ 秦利军ᖔ副教授ᖔ硕士研究生导师ᖔ研究方向为烟草分子抗逆境ᖔྉጶ᥋ቝᑕᔽ᤟ɯ᤟ᔀᔀीࣼᔽႿᔀᡸዹၤᔽႿ݀ ϟ԰ᤃ঎ዹᆍቝᤥ