Page 122 - 《广西植物》2022年第9期

ϟ ጢ ጢ ऐ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗԰ 卷

ሕজ 讨论与结论

利用生物学手段实现植物体中关键代谢基因
的定点突变ᖔ能提高植物对除草剂的敏感性ᖔ从而
提高突变植株对除草剂的抗性ᖔ但效率较高的基
᤹঎ ᧕શዶ ԰ ԡԡԡ ᤦᡱ 标记ଫ ஏϓͦஏ࣮঎ 扩增含 ጢऐऐ 位点区域ଫ ᤇϓͦᤇ࣮঎ 扩增
因定点编辑生物学手段 ऊ኏᧧୩۪኏ ᣰ ऊᑕ༁ 及 ఋዶᓂጶશ 技
含 ϟᎮϟँ 位点区域ᤥ
术ᖔ在操作的过程中引入了外源基因 ྉ᧧༁ၤᔽႿᆍ ᔀᡷ
᤹঎ ᧕શዶ ԰ ԡԡԡ ᤦᡱ ᥘᑕʢҴᔀʢଫ ஏϓͦஏ࣮঎ ዶቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ औᔽᡷၤ ༁ᔀ੫ቝᔀႿᡷ ዹᆍႿᡷᑕᔽႿᔽႿ੫
ጢऐऐ ༁ᔽᡷᔀଫ ᤇϓͦᤇ࣮঎ ዶቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ औᔽᡷၤ ༁ᔀ੫ቝᔀႿᡷ ዹᆍႿᡷᑕᔽႿᔽႿ੫ ϟᎮϟँ ༁ᔽᡷᔀ঎ ᑕ᤟঎ᖔ ϟँऐᎮଫ ᥘᔽዹၤႿᆍ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡ԰ԡɯᤥ 因此ᖔ在转基因
图 Ꭾজ 含突变位点区段 ۪ऊ኏ 扩增 作物严格管制的今天难以广泛推广种植ᤥᨃᥘᥘ
èᔽ੫঎ Ꭾজ ۪ऊ኏ ᑕቝᡱ᤟ᔽ஦ᔽዹᑕᡷᔽᆍႿ औᔽᡷၤ ༁ᔀ੫ቝᔀႿᡷ 技术理论上不涉及转基因ᖔ该技术所得新种质ᖔ在
ዹᆍႿᡷᑕᔽႿᔽႿ੫ ቝࣼᡷᑕᡷᔽᆍႿ ༁ᔽᡷᔀ༁ 种植领域上有其得天独厚的优势ᤥ

ࣷ၊ᤀ঎ 抗性植株的测序结果ଫ ۩௴঎ 野生型的测序结果ᤥ
ࣷ၊ᤀ঎ ୩ᔀीࣼᔀႿዹᔽႿ੫ ʢᔀ༁ࣼ᤟ᡷ ᆍ஦ ʢᔀ༁ᔽ༁ᡷᑕႿᡷ ᡱ᤟ᑕႿᡷ༁ଫ ۩௴঎ ୩ᔀीࣼᔀႿዹᔽႿ੫ ʢᔀ༁ࣼ᤟ᡷ ᆍ஦ औᔽ᤟ʛ ᡷᢃᡱᔀ ᡱ᤟ᑕႿᡷ༁঎
图 ऐজ 含突变位点区段测序
èᔽ੫঎ ऐজ ୩ᔀ੫ቝᔀႿᡷ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔽႿ੫ औᔽᡷၤ ቝࣼᡷᑕᡷᔽᆍႿ ༁ᔽᡷᔀ

জজ 烟草品种ጸ ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ 基因测序结果发现ᖔ该 成 ВВ᥈ᖔ然而都编码氨基酸 ᓂᔀࣼᖔ为简并突变ᖔ经过
品种 ዛᒦ୒ 基因序列全部为编码区ᖔ无内含子序列ᖔ 多次 ۪ऊ኏ 和重复测序证实结果正确无误ᖔ证实这
从起始密码子至终止子序列完整ᖔ而 શऊା᧧ 报道的 一突变为烟草品种ጸ ᣽ሕ԰ᤃᆥ 本身的差异性ᤥ 根据
普通烟草品种与ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥ品种的 ዛᒦ୒ 基因存在一定 ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥዛᒦ୒ ୒ࣩቴዛ 和ጸ ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ ୒ࣩቴଧ 的保守区ᖔ
差别 ྉ ᣽ᔀᔀ᤟ᔀʢ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ϟँँሕ ɯᤥ શऊା᧧ 中烟草 ዛᒦ୒ 结合 ାᔀᔀᡷၤᑕႿ 等 ྉ ϟँँँɯܦ ᣽ᆍዹၤᔀ׹ᔀႿҴᆍ 和 ۼᔽ᤟᤟ቝᔽᡷझᔀʢ
୒ࣩቴዛ 基 因序列长度为 ԰ ԡԡ࿗ ᤦᡱᖔ 与 ጸ ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ ྉ԰ԡԡሕɯ的报道ᖔ设计了用于ጸ ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ 定点突变
୒ࣩቴዛ 基因序列长度一致ଫዛᒦ୒ ୒ࣩቴଧ 基因序列长度 的 ኏શዶ ᣰ ᧕શዶᤥ
为 ϟ ँँጢ ᤦᡱᖔ而ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥዛᒦ୒ ୒ࣩቴଧ 长度为 ԰ ԡϟԡ ᤦᡱᖔ 由于 ᣽ᆍዹၤᔀ׹ᔀႿҴᆍ 和 ۼᔽ᤟᤟ቝᔽᡷझᔀʢྉ԰ԡԡሕɯ 研究的
推测是由品种之间 的 差 异 性 所 致ᤥ ጸ ᣽ሕ԰ᤃᆥ ዛᒦ୒ 烟草品种 ዛᒦ୒ 基因并非ጸ ᣽ሕ԰ᤃᆥᖔ因此在报道位点
୒ࣩቴዛ 基因与 શऊା᧧ 报道的烟草品种 ዛᒦ୒ ୒ࣩቴዛ 基因 上存在位置偏离ᤥ 为了解决这个问题实验中找到
尽管序列长度一致ᖔ但存在一个碱基的区别ᖔ即烟 与其完全配对的目标序列ᖔ设计突变位点ᖔ命名为
草品种ጸ᣽ሕ԰ᤃᆥዛᒦ୒ 基因编码区序列的第 ऐሕϟ 位发 ऊၤ᤟᥋ጢऐऐ 和 ऊၤ᤟᥋ϟᎮϟँᤥ 在寡聚核苷酸嵌合体设计过
生了 ዶ 到 ᥈ 的简并突变ᖔ氨基酸密码子由 ВВዶ 变 程中ᖔ为避免嵌合体的不稳定ᖔ对片段进行甲基化