Page 71 - 《广西植物》2020年第2期
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２ ０ ８ 广 西 植 物 ４０ 卷
达区分开ꎬ因此目前无法判断究竟是哪一个或哪
几个 Ｇｒ８ＨＧＯ 基因在叶中高表达ꎬ今后可采用高通
量测序技术加以区分ꎮ 我们的结果与在喜树中
Ｃａ８ＨＧＯ 主要在茎和叶中表达ꎬ在喜树碱累积的根
中不表达的结果相一致(Ｖａｌｌｅｔｔａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１０)ꎮ 而
与在两年生花期的麻花艽 Ｇｓ１０ＨＧＯ 基因在花中表
达量最高ꎬ其次是根ꎬ表达量最低的是叶的结果刚
好相反(Ｚｈｏｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１６)ꎬ与在温室栽培的印度
獐牙菜 植 株 中 Ｓｃ８ＨＧＯ 基 因 在 叶 和 根 中 均 表 达
(Ｐａｄｈａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５)、在川西獐牙菜中 Ｓｍ８ＨＧＯ
基因在根、茎、叶和花中的表达量差异不大( Ｌｉｕ ｅｔ
ａｌ.ꎬ ２０１７)的结果也不同ꎮ 以上结果表明滇龙胆
Ｍ. ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ Ⅲꎻ １. 质粒 ｐＥＴ３２ａ￣Ｇｒ８ＨＧＯ￣２ 的 ＢａｍＨＩ 和
和喜树具有相似的活性成分合成与累积模式ꎬ而
ＸｈｏＩ 双酶切ꎮ
Ｍ. ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ Ⅲꎻ １. Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｐｌａｓｍｉｄ ｐＥＴ３２ａ￣ 与麻 花 艽 和 印 度 獐 牙 菜 不 同ꎮ 下 一 步 将 对
Ｇｒ８ＨＧＯ￣２ ｂｙ ＢａｍＨＩ ａｎｄ ＸｈｏＩ. Ｇｒ８ＨＧＯ 蛋白进行诱导表达、蛋白纯化和酶活性分
图 ５ 质粒 ｐＥＴ３２ａ￣Ｇｒ８ＨＧＯ￣２ 的双酶切检测 析ꎬ为该基因功能的阐明奠定基础ꎮ
Ｆｉｇ. ５ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｓｍｉｄ ｐＥＴ３２ａ￣Ｇｒ８ＨＧＯ￣２
ｂｙ ｄｏｕｂｌｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎｓ
参考文献:
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ＤＵＧÉ ＤＥ ＢＥＲＮＯＮＶＩＬＬＥ Ｔꎬ ＦＯＵＲＥＡＵ Ｅꎬ ＰＡＲＡＧＥ Ｃꎬ ｅｔ
图 ６ Ｇｒ８ＨＧＯ 基因在根、茎和叶中的相对表达 ａｌ.ꎬ ２０１５. Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｅｃｏｎｄ ｓｅｃｏｌｏｇａｎｉｎ ｓｙｎｔｈａｓｅ
Ｆｉｇ. ６ Ｒｅｌａｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｇｒ８ＨＧＯ ｉｓｏｆｏｒｍ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｂｏｔｈ ｓｅｃｏｌｏｇａｎｉｎ ａｎｄ ｓｅｃｏｘｙｌｏｇａｎｉｎ ａｌｌｏｗｓ
ｇｅｎｅ ｉｎ ｒｏｏｔꎬ ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｆ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｄｅ ｎｏｖｏ ａｓｓｅｍｂｌｙ ｏｆ ａ Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ ｒｏｓｅｕｓ ｔｒａｎ￣
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(Ｉｋｅｄａ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９９１)ꎮ 因此ꎬ需要通过实验来进一 Ｐｏｐｕｌａｒｉｓ Ｓｉｎｉｃａｅ [ Ｍ ]. Ｂｅｉｊｉｎｇ: Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｒｅｓｓꎬ ６２:
步验证ꎮ １００. [中国植物志编委会ꎬ １９８８. 中国植物志 [Ｍ]. 北京:
组织器官特异性表达分析结果显示ꎬ本研究 科学出版社ꎬ ６２: １００. ]
ＨＵＡ ＷＰꎬ ＺＨＥＮＧ Ｐꎬ ＨＥ ＹＨꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１４. Ａｎ ｉｎｓｉｇｈｔ ｉｎｔｏ ｔｈｅ
中的 Ｇｒ８ＨＧＯ 基因主要在叶中表达ꎬ而在根和茎中
ｇｅｎｅｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｓｅｃｏｉｒｉｄｏｉｄ ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｉｎ Ｇｅｎｔｉａｎａ ｍａｃｒｏ￣
几乎不表达ꎮ 这与滇龙胆的主要药效成分龙胆苦 ｐｈｙｌｌａ ｂｙ ＲＮＡ￣ｓｅｑ [Ｊ]. Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ Ｒｅｐꎬ ４１(７): ４８１７－４８２５.
苷主要在叶中合成、根中累积的结果相一致( 杨美 ＨＵＡＮＧ ＬＱꎬ ＬＩＵ ＣＸꎬ ２０１５. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｙ
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权等ꎬ ２０１１ꎻ 朱宏涛等ꎬ ２０１１)ꎬ这表明所克隆的 ５
刘昌孝ꎬ ２０１５. 分子生药学 [Ｍ]. ３ 版. 北京: 科学出版
个 Ｇｒ８ＨＧＯ 基因在叶中而不是根中促进龙胆苦苷
社: ２３９－２４３. ]
的生物合成ꎮ 由于 ５ 个 Ｇｒ８ＨＧＯ 基因的高度相似
ＩＫＥＤＡ Ｈꎬ ＥＳＡＫＩ Ｎꎬ ＮＡＫＡＩ Ｓꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９９１. Ａｃｙｃｌｉｃ ｍｏｎｏｔ￣
性ꎬ很难设计特异性引物将它们的组织特异性表 ｅｒｐｅｎｅ ｐｒｉｍａｒｙ ａｌｃｏｈｏｌ: ＮＡＤＰ ｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ ｏｆ Ｒａｕｗｏｌｆｉａ
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