Page 133 - 《广西植物》2023年第4期

࿗ 期 覃 雯 等 ᧥ 野生茯苓鉴定及其木质纤维素降解酶系研究 Ꭾ ϟ ጢ

馏水调零ᤥ 以标准稀释液为横坐标ྉଝɯᖔ以其对应 程为 ᡥ ᢉ ԡ঎ ऐ࿗ϟ ᤃଝ ͱ ԡ঎ ԡ԰ሕ ᤃᖔ 相关系数 ቴ ᢉ
԰
的 ᪵ዶ 标准为纵坐标ྉ ᡥɯᖔ绘制标准曲线ᖔ得到线 ԡ঎ँँᤃ ጢྉ图 ϟ᧥ዶɯଫ绘制 ᧕ 木糖标准曲线ᖔ得到回
性回归方程 ᡥ ᢉ Ҵଝշᤦᖔ将 ᪵ዶ 测定带入公式中得到 归方程为 ᡥ ᢉ ԡ঎ᤃऐሕ ԰ଝ ͱ ԡ঎ԡԡऐ ࿗ᖔ相关系数 ቴ ᢉ
԰
ଝྉቝ੫ኼቝᓂ ɯᤥ 绘制葡萄糖标准曲线ᖔ得到回归方 ԡ঎ँँᤃ Ꭾྉ图 ϟ᧥ାɯᤥ
᥋ϟ

图 ϓই 茯苓菌葡萄糖和 ᦵ 木糖标准曲线
èᔽ੫঎ ϟজ ୩ᡷᑕႿʛᑕʢʛ ዹࣼʢ׹ᔀ ᆍ஦ ੫᤟ࣼዹᆍ༁ᔀ ᑕႿʛ ᧕᥋଴ᢃ᤟ᆍ༁ᔀ ஦ʢᆍቝ ۩ᅳᤀஏᔠᡓᅳʗᔠᐹ ዞᅳዞᅳ໧

ϟ঎ጢ঎ϟ 纤维素酶活力测定জ 酶标仪检测外切 Ꭻ᥋葡 微ᖔ ԰ԡϟᎮɯᤥ ሂ᥋葡萄糖苷酶加入 ϟቝᆍ᤟ኼᓂ શᑕ ऊᨃ
᥋ϟ
԰ ሕ
聚糖酶ྉऊା̀ɯܦ内切 Ꭻ᥋葡聚糖酶ྉጶ᥈ɯ 和 Ꭻ᥋葡萄糖 溶液 ᤃᤃ঎Ꭾ ဂᓂ 终止反应ᖔ振荡混匀后测定波长在 ࿗ϟԡ
苷酶ྉା᥈ᓂɯ 的活性ᖔ梯度试验后最终采用 ϟጢԡ ဂᓂ Ⴟቝ 处的吸光度ᤥ 酶活单位定义为每分钟分解底物
反应体系ᤥ 首先ᖔ取粗酶液的量依次为 ԰ጢܦጢԡܦጢԡ 所释放出 ϟဂቝᆍ᤟ 还原糖所需的酶量ᤥ 采用无木屑
ဂᓂଫ其次ᖔ取各自不同体积底物溶液ᖔ检测 ऊା̀ 所 和有松木屑为对照处理ᖔ分别检测第 ԰ܦ第 ࿗ܦ第 ᤃܦ
采用的底物溶液为 ԰ᠮ微晶纤维素溶液 ጢԡ ဂᓂᖔ检 第 ऐܦ第 ϟԡܦ第 ϟ԰ ʛ 的酶活力ᖔ各设置 ሕ 个重复ᤥ
测 ጶ᥈ 所采用底物溶液为 ϟᠮ羧甲基纤维素钠溶液 ϟ঎ጢ঎ሕ 木质素降解酶活力测定জ 酶标仪检测锰过
԰ጢ ဂᓂᖔ检测 ା᥈ᓂ 所采用底物溶液为 ϟᠮ水杨苷溶 氧化物酶ܦ漆酶ܦ木质素过氧化物酶活性ᖔ梯度试
液 ԰ጢ ဂᓂଫ放入 ጢԡ ቩ 恒温水浴锅中水浴反应ᖔ反应 验后最终采用 ϟԡԡ ဂᓂ 反应体系ᤥሕ 种酶分别采用
时间各依次为 ϟ԰ԡܦሕԡܦሕԡ ቝᔽႿଫ再次ᖔ加入 ᧕શ୩ 显 ԰ᖔᤃ᥋᧕ᥘ۪ܦ藜芦醇ྉ჆ዶɯܦዶାఋ୩ 为底物ᖔ分别测定

色液均为 Ꭾጢ ဂᓂଫ最后ᖔ混匀后沸水浴时长均为 ጢ 吸光度在 ࿗Ꭾԡܦ࿗԰ԡܦሕϟԡ Ⴟቝ 处 ϟጲሕ ቝᔽႿ 内的变化
ቝᔽႿᖔ冷却后测定波长在 ጢ࿗ԡ Ⴟቝ 处的吸光度ྉ 高微 值ᤥ 酶活 单 位 ྉВɯ᧥ 上述条件下ᖔ 每分 钟 催 化 ϟ
微ᖔ ԰ԡϟᎮɯᤥ 酶活单位定义为每分钟分解特定底 ဂቝᆍ᤟ ԰ᖔᤃ᥋᧕ᥘ۪ᖔዶାఋ୩ 或 ჆ዶ 所需的酶量ྉ 池玉杰
物释放出 ϟဂቝᆍ᤟ 还原糖所需的酶量ᤥ 采用无松木 和闫洪波ᖔ ԰ԡԡँɯᤥ 计算中的 ቶ࿗Ꭾԡ ᢉ ࿗ँ ᤃԡԡྉቝᆍ᤟ኼ
屑和有松木屑为对照处理ᖔ分别检测第 ԰ܦ第 ࿗ܦ第 ᓂ ዹቝɯ ᖔቶ࿗԰ԡ ᢉ ሕᤃ ԡԡԡ ྉ ቝᆍ᤟ ኼ ᓂ ዹቝɯ ᖔቶሕϟԡ ᢉ
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ᤃܦ第 ऐܦ第 ϟԡܦ第 ϟ԰ ʛ 的酶活力ᖔ各设置 ሕ 个重复ᤥ ँ ሕԡԡྉቝᆍ᤟ኼᓂ ዹቝɯ ᤥ
ϟ঎ጢ঎԰ 半纤维素酶活力测定জ 酶标仪检测木聚糖 ϓॹᣤ 数据处理
酶ܦ甘露聚糖酶ܦሂ᥋葡萄糖苷酶活性ᖔ梯度试验最终 采用 ᥘᔽዹʢᆍ༁ᆍ஦ᡷ ጶ଴ዹᔀ᤟ 软件对数据进行处理和
采用 ԰ԡԡ ဂᓂ 反应体系ᤥ 首先ᖔ取粗酶液的量依次 分析ᖔ利用 ୩۪୩୩ ԰ᤃ঎ԡ 对数据进行方差分析并评价
为 ᤃᎮܦᤃᎮܦᤃ঎Ꭾ ဂᓂଫ其次ᖔ各取自不同底物溶液ᖔ检测 其差异显著性ᖔ使用 ᨃʢᔽ੫ᔽႿ԰ԡϟऐ 进行图形绘制ᤥ
木聚糖酶所采用的底物溶液为 ԡ঎ऐᠮ的木聚糖溶液
ሕሕ ဂᓂᖔ检测甘露聚糖酶所采用底物溶液为 ԡ঎ऐᠮ的 ԰জ 结果与分析
甘露聚糖溶液 ሕሕ ဂᓂᖔ检测 ሂ᥋葡萄糖苷酶所采用底
物溶液为 ԡ঎࿗ᠮ的 ᡱશ۪᥈ 溶液 ᤃԡ ဂᓂଫጢԡ ቩ恒温水浴 ԣॹϓ 茯苓 ɔᣏϓ 的生物学特性
锅中水浴反应时间依次为 ሕԡܦሕԡܦᤃԡ ቝᔽႿଫ再次ᖔ使反 茯苓 ɟᣮϟ 在 ۪᧕ዶ 培养基上培养 ࿗ጲ ጢ ʛᖔ于光
应终止ᖔ木聚糖酶ܦ甘露聚糖酶均使用 ᧕શ୩ 显色液 学显微镜观察菌丝的正反面ྉ 图 ԰᧥ዶɯᖔ茯苓菌丝
终止反应ᖔ加入 ᧕શ୩ 试剂 ϟԡԡ ဂᓂଫ最后ᖔ混匀沸水浴 体呈白色绒毛状ᖔ菌丝直径 ԰ጲጢ ဂቝᖔ菌丝光滑无
ጢቝᔽႿᖔ冷却后测定波长在 ጢ࿗ԡ Ⴟቝ 处的吸光度ྉ高微 色ᖔ多分支ᖔ有横隔膜ᖔ偶见锁状联合ྉ 图 ԰᧥ାɯᤥ