Page 30 - 《广西植物》2025年第2期
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2 3 2                                  广  西  植  物                                         45 卷
                                    表 2  参与多基因序列分析的菌株及 NCBI 登录号信息
                     Table 2  Information of strains and NCBI accession number used in multigene sequence analysis

                                                                             NCBI 登录号 NCBI accession number
                            物种                        菌株编号
                           Species                    Strain code
                                                                              ITS                TUB
                  菜豆间座壳 Diaporthe phaseolorum         CBS 116020            KC343176           MW595779
                    菜豆间座壳 D. phaseolorum              CBS 116019            KC343175           MW595780
                    菜豆间座壳 D. phaseolorum              CBS 127465            KC343177           KC344142
                    香港间座壳 D. hongkongensis            CBS 115448            KC343119           MT749776
                    香港间座壳 D. hongkongensis           CBS 115448 T          NR111848            OR806914
                油杉拟盘多毛孢 Pestalotiopsis arceuthobii    CBS 433.65           MH554046            KM199427
                   油杉拟盘多毛孢 P. arceuthobii            CBS 434.65  T         NR147561            MH554722
                   油杉拟盘多毛孢 P. arceuthobii             CBS 434.66           KM199341            ON101251
                 尖孢炭疽菌 Colletotrichum acutatum        CBS 127534           MH864559             JQ950047
                     尖孢炭疽菌 C. acutatum               CBS 797.72  T         MH860607             JQ950048
                     尖孢炭疽菌 C. acutatum                CBS 126521           MH864144             JQ950052
                  变红镰刀菌 Fusarium incarnatum           CBS 163.57           MH857681            MK439850
                 嘴突凸脐蠕孢 Exserohilum rostratum         CBS 273.52           MH857032            MT348153
                    嘴突凸脐蠕孢 E. rostratum               CBS 229.39           MH855990            MT348153
                    嘴突凸脐蠕孢 E. rostratum               CBS 131565           MH865917            MW133269
                    Gaertneriomyces semiglobiferus   AFTOL ̄ID 34           AY997051            AY138778
              注: T 为模式菌株ꎮ
              Note: T indicates type strain.

            株 E ̄10 接种于健康的广西莪术叶片上ꎬ48 h 开始                       长ꎬ适宜温度范围为 25 ~ 30 ℃ ꎬ在较低(5 ℃ )和较
            发病ꎬ病斑呈水渍状ꎬ到接种 4 d 时病斑外围有明                          高(40 ℃ ) 温度下菌丝不再生长ꎬ培养 5 d 后ꎬ在
            显的黄色晕圈ꎬ接种 6 d 后病斑完全黄化枯萎ꎬ与                          25 ℃ 和 28 ℃ 下菌丝生长直径较大ꎬ分别达 8.50
            田间发病症状相似( 图 1:C、D、E)ꎬ对照叶片未见                        cm 和 8.32 cmꎬ这两者温度差异不显著(P>0.05)ꎬ

            感病症状( 图 1:F)ꎮ 再次重新分离发病的叶片ꎬ                         但与其他温度处理差异显著(P<0.05)ꎻ超过 30 ℃
            得到的菌株与接种病菌一致ꎬ由此验证柯赫氏法                              时菌株 E ̄10 菌丝对温度比较敏感ꎮ 故 E ̄10 病原

            则ꎬ确定广西莪术病菌菌株 E ̄10 为致病菌ꎮ                            菌的菌丝生长最适温度为 25 ~ 28 ℃ ꎮ
            2.2 病原菌的形态鉴定                                           菌株 E ̄10 经不同温度处理 20 min 后ꎬ其菌落
                 由图 2:A、B 可知ꎬ菌株 E ̄10 菌落正面为白色                   还能长出菌丝ꎬ然后把 55 ℃ 加了 2 个梯度ꎬ结果
            絮状ꎬ菌落呈散射状ꎬ菌落背面为米黄色无轮纹ꎻ在                            发现 56 ℃ 时菌丝停止生长ꎬ故菌株 E ̄10 菌丝致死

            光学显微镜下观察到 α 型孢子为长圆形(图 2:C)ꎬ                        温度为 56 ℃ 下处理 20 minꎮ
            两端较平ꎬ单胞ꎬ大小为(3.05 ~ 3.35) μm × (0.81 ~              2.3.2 不同光照对病原菌 E ̄10 的生长影响  由
            1.16) μmꎬβ 型孢子为线型(图 2:D)ꎬ一端呈弯钩                     图 3:B 可知ꎬ菌株 E ̄10 在 L / D = 24 h / 0 h、L / D =
            状ꎬ较尖ꎬ另一端平而圆润ꎬ大小为(16.87 ~ 24.98)                    12 h / 12 h、L / D = 0 h / 24 h 3 种条件下均能生长ꎬ
            μm × (0.89 ~1.68) μmꎮ 根据上述形态特征ꎬ初步                  并均有 黄 色 色 素 产 生ꎬ 菌 落 直 径 分 别 为 8. 35、
            认为病原菌 E ̄10 为间座壳属真菌 Diaporthe sp.ꎮ                  6. 2、4. 97 cmꎬ以 L / D = 24 h / 0 h 条件下生长最
            2.3 病原菌的生物学特性                                      佳ꎬ与 L / D = 0 h / 24 h 条件下的菌丝生长有显著
            2.3.1 不同温度对 E ̄10 病原菌菌丝生长的影响                        性差异( P < 0.05) ꎬ说明菌丝生长对光照的要求
            由图 3:A 可知ꎬ菌株 E ̄10 在 10 ~ 35 ℃ 之间均能生                比较高ꎮ
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