Page 27 - 《广西植物》2025年第2期

２ 期 宋利沙等: 广西莪术叶枯病病原菌鉴定、生物学特性及室内药剂筛选 ２ ２ ９

Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｃａｕｓｉｎｇ ｌｅａｆ ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍａ ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ ｉｎ Ｑｉｎｚｈｏｕ Ｃｉｔｙꎬ Ｇｕａｎｇｘｉꎬ ａｎｄ
ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｉｔｓ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ｏｕｔ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｒｅａｇｅｎｔｓ. Ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙꎬ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ
ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｌｅａｖｅｓ ｂｙ ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｔｉｓｓｕｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄꎬ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ Ｋｏｃｈ’ｓ ｒｕｌｅꎬ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ
ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｔａｔｕｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ＩＴＳ ａｎｄ
ＴＵＢ ｇｅｎｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ. Ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅꎬ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｆｏｕｒ ｒｅａｇｅｎｔｓ ｗｅｒｅ
ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｍｙｃｅｌｉｕｍ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ ｗａｓ
ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｃａｕｓｉｎｇ ｌｅａｆ ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍａ ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ ｉｎ Ｇｕａｎｇｘｉ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ
ｐａｔｈｏｇｅｎ ｃｏｌｏｎｙꎬ ｓｐｏｒｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｍｕｌｔｉ￣ｇｅｎｅ ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ. ( ２) Ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｕｉｔａｂｌｅ
ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｗａｓ ＰＤＡꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｃａｒｂｏｎ ａｎｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓｏｕｒｃｅｓ ｗｅｒｅ ｇｌｕｃｏｓｅ ａｎｄ ｐｅｐｔｏｎｅꎬ
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ２５ ℃ ａｎｄ ２８ ℃ ｗａｓ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｆｏｒ ｍｙｃｅｌｉｕｍ ｇｒｏｗｔｈꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｅｔｈａｌ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
ｗａｓ ５６ ℃. ｐＨ ５－７ ｗａｓ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｆｏｒ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ. Ｆｕｌｌ ｌｉｇｈｔ ｗａｓ ｆａｖｏｒａｂｌｅ ｆｏｒ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ. (３) Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ
ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ ｔｅｓｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ａｌｌ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ ｔｅｓｔｅｄ ｓｈｏｗｅｄ ｓｔｒｏｎｇ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ Ｃ. ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ ｌｅａｆ
￣１
ｂｌｉｇｈｔ. Ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍꎬ ａｎｄ ２５０ ｇＬ ｐｙｒａｃｌｏｓｔｒｏｂｉｎ ＥＣ ａｎｄ ７５％ ｏｘｉｍｍｅｐｅｎｔａｚｏｌｏｌ ＷＧ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ
￣１ ￣１
ｅｆｆｅｃｔꎬ ｗｉｔｈ ＥＣ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ０.０５５ ０ μｇＬ ａｎｄ ０.１２１ ６ μｇｍＬ ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｉｎ ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎꎬ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｏｆ ｌｅａｆ
５０
ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ Ｃ. ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ ｂｅｌｏｎｇｓ ｔｏ Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ. Ｔｈｅ ｍｙｃｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ Ｄ. ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ
￣１
ａｆｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅꎬ ｌｉｇｈｔꎬ ｐＨꎬ ｃａｒｂｏｎ ａｎｄ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ｓｏｕｒｃｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓꎬ ａｎｄ ２５０ ｇＬ ｐｙｒａｃｌｏｓｔｒｏｂｉｎ ＥＣ ａｎｄ ７５％
ｏｘｉｍｍｅｐｅｎｔａｚｏｌｏｌ ＷＧ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｒｅａｇｅｎｔｓ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｌｅａｆ ｂｌｉｇｈｔ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｐｒｏｖｉｄｅ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｇｕｉｄａｎｃｅ
ｆｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｌｅａｆ ｂｌｉｇｈｔ ｏｆ Ｃ. ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ ｉｎ Ｇｕａｎｇｘｉ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｃｕｒｃｕｍａ ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓꎬ ｌｅａｆ ｂｌｉｇｈｔꎬ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓꎬ ｒｅａｇｅｎｔ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ

广 西 莪 术 ( Ｃｕｒｃｕｍａ ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ )ꎬ 为 姜 科 面积枯黄ꎬ后期整株萎蔫枯死ꎬ严重影响广西莪术
(Ｚｉｎｇｂｅｒａｃｅａｅ)ꎬ姜黄属(Ｃｕｒａｕｍａ Ｌ.)植物ꎬ又称“毛 的栽培生产ꎮ 关于广西莪术病害的研究较少ꎬ仅
莪术”或“桂莪术”ꎬ与蓬莪术(Ｃ. ｐｈａｅｏｃａｕｌｉｓ)、温郁 见蒋 妮 等 ( ２０１６) 报 道 茎 点 霉 属 真 菌 Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ
金 (Ｃ. ｗｅｎｙｕｊｉｎ)同为中药材莪术的基源植物(中国 ｓｐ.引起广西隆安县栽培种植的广西莪术叶斑病ꎬ
科学院中国植物志编辑委员会ꎬ１９８１ꎻ国家药典委员 与其症状相似但是不同ꎬ在田间容易混淆ꎬ叶斑病
会ꎬ２０２０)ꎮ 中药材莪术为历版«中国药典» 收载品 形成边缘褐色、中间暗褐色并凹陷的“ Ｖ” 形大病
种ꎬ是广西“桂十味”道地药材ꎬ具有行气破血、消积 斑ꎬ病斑上可见黑色小颗粒( 分生孢子器)ꎻ王晗怡
止痛、清心凉血等功效ꎬ现代研究表明莪术中含有 (２０２３)报道由间座壳属真菌引起广西莪术叶枯病
挥发油类和姜黄素类活性化学成分ꎬ这两类成分都 病原菌发病症状与蒋妮等(２０１６) 报道的相似ꎬ但
具有抗肿瘤、抗凝血、抗血小板聚集等功效(李泽宇 其对 该 病 原 菌 形 态 和 分 子 鉴 定 结 果 与 蒋 妮 等

等ꎬ２０２１)ꎮ 随着莪术药用功效的不断挖掘和开发ꎬ (２０１６)报道的不是同一种病原菌ꎮ 此外ꎬ还有少
药材需求量不断增加ꎬ广西莪术种植面积也随之在 量研究 姜 黄 属 植 物 叶 部 病 害 的 报 道ꎬ 如 李 珊 珊
逐年扩大ꎬ由 ２０２２ 年的２ ３３３ ｈｍ 扩大至 ２０２３ 年的 (２０２１) 报 道 由 拟 盘 多 毛 孢 属 Ｎｅｏｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ
２
３ ３３３ ｈｍ ꎬ主要分布在钦州市灵山县、玉林市博白 ａｓｉａｔｉｃａ 真菌可引起蓬莪术叶枯病ꎬ并对该病原菌
２
县、贺州市八步区、南宁市隆安县等多个市县ꎬ其中 进行了生物学特性和室内药剂筛选的研究ꎻ冯阿
钦州市灵山县是广西莪术道地核心产区ꎬ占全广西 芳(２０１２)和马瑞(２０１８) 对温郁金叶部病害进行

种植面积的 ４０％ꎮ 研 究ꎬ 结 果 发 现 由 辣 椒 炭 疽 菌 ( Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ
叶部病害是影响广西莪术生长过程中的一类 ｕｒｃｕｍａｅｉ)和郁金炭疽菌(Ｃ. ｃｕｒｃｕｍａｅ) 引起温郁金
重要病害ꎬ２０２２—２０２３ 年广西灵山县陆屋镇叶枯 的叶斑病ꎬ而张兴国等(２００５) 仅描述了温郁金炭
病较为严重ꎬ发病率为 ３０％ ~ ５０％ꎬ严重发生的地 疽病的发病症状和化学防治ꎬ没有做详细的研究ꎮ
块发病率高达 ８０％ꎮ 病害田间症状多表现为早期 蓬莪术、温郁金病原菌的鉴定均采用了目前常用
在叶尖、叶缘或叶中处出现黄色斑点ꎬ随着病原菌 的形态鉴定结合构建分子系统发育树的方法( 多
的不断侵染ꎬ病斑逐渐向叶中脉扩展ꎬ引起叶片大 个序列)ꎬ但目前广西莪术仅通过 ＩＴＳ 测序ꎬ鉴定