Page 127 - 《广西植物》2020年第6期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｊｕｎ. ２０２０ꎬ ４０(６): ８７３－８８１
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１８１１０２１
陈星星ꎬ 夏莹ꎬ 黄龙全ꎬ 等. 茶树 ＣｓＰＬＫ 基因的鉴定与表达分析 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ２０２０ꎬ ４０(６): ８７３－８８１.
ＣＨＥＮ ＸＸꎬ ＸＩＡ Ｙꎬ ＨＵＡＮＧ ＬＱꎬ ｅｔ ａｌ. Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＣｓＰＬＫ ｇｅｎｅ ｉｎ ｔｅａ ｐｌａｎｔ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ２０２０ꎬ ４０(６): ８７３－８８１.
茶树 ＣｓＰＬＫ 基因的鉴定与表达分析
陈星星 ꎬ 夏 莹 ꎬ 黄龙全 ꎬ 张剑韵 ２
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( １. 安徽农业大学 茶与食品科技学院ꎬ 合肥 ２３００３６ꎻ ２. 安徽农业大学 外国语学院ꎬ 合肥 ２３００３６ )
摘 要: 茶树中富含茶氨酸、儿茶素和咖啡碱等重要功能成分ꎬ具有较高的价值功效ꎬ茶树在生命周期中经
常遭受逆境胁迫ꎬ维生素 Ｂ (ＶＢ )在植物体内参与逆境应答ꎬ吡哆醛激酶(ｐｙｒｉｄｏｘａｌ ｋｉｎａｓｅꎬＰＬＫ)是 ＶＢ 补救
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途径中的关键酶ꎮ 为进一步了解 ＰＬＫ 在茶树生物合成中的功能和作用机理ꎬ该研究基于茶树基因组数据
库ꎬ以龙井 ４３ 为材料ꎬ采用逆转录 ＰＣＲ(ＲＴ￣ＰＣＲ)的方法从茶树中克隆出 ＣｓＰＬＫ 的基因ꎮ 结果表明:该基因
序列长为１ １７９ ｂｐꎬ编码 ３９３ 个氨基酸ꎻＣｓＰＬＫ 蛋白和已知物种中 ＰＬＫ 蛋白具有较高的同源性ꎬ都是核糖激
酶超家族成员ꎻ通过构建 ｐＥＴ￣ＣｓＰＬＫ 载体进行原核表达ꎬ并鉴定出重组蛋白有很强的催化活性ꎻ组织表达特
异性分析表明ꎬ叶中的表达量比茎、根的高ꎬ在根中最低ꎻ荧光定量 ＰＣＲ 表示ꎬ低温诱导 ＣｓＰＬＫ 上调表达ꎬ干
旱诱导 ＣｓＰＬＫ 下调表达ꎬ发现该基因在茶树中有明显的逆境应答ꎬ推测 ＣｓＰＬＫ 在茶树的生长发育、逆境胁迫
发挥重要作用ꎮ
关键词: 茶树ꎬ 基因鉴定ꎬ 逆境胁迫ꎬ 组织特异性
中图分类号: Ｓ５７１.１ 文献标识码: Ａ
文章编号: １０００￣３１４２(２０２０)０６￣０８７３￣０９ 开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):
Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ
ｏｆ ＣｓＰＬＫ ｇｅｎｅ ｉｎ ｔｅａ ｐｌａｎｔ
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ＣＨＥＮ Ｘｉｎｇｘｉｎｇ ꎬ ＸＩＡ Ｙｉｎｇ ꎬ ＨＵＡＮＧ Ｌｏｎｇｑｕａｎ ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｊｉａｎｙｕｎ
( １. Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｔｅａ ａｎｄ Ｆｏｏｄ Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ Ａｎｈｕｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｈｅｆｅｉ ２３００３６ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ
２. Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｆｏｒｅｉｇｎ Ｌａｎｇｕａｇｅｓꎬ Ａｎｈｕｉ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｈｅｆｅｉ ２３００３６ꎬ Ｃｈｉｎａ )
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｅａ ｐｌａｎｔ ｉｓ ｒｉｃｈ ｉｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｔｈｅａｎｉｎｅꎬ ｃａｔｅｃｈｉｎ ａｎｄ ｃａｆｆｅｉｎｅꎬ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ ｖａｌｕｅ
ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ. Ｔｅａ ｐｌａｎｔｓ ａｒｅ ｏｆｔｅｎ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｓｔｒｅｓｓ ｉｎ ｔｈｅｉｒ ｌｉｆｅ ｃｙｃｌｅꎬ ａｎｄ ＶＢ ｉｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｒｅｓｓ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ
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ｐｌａｎｔｓꎬ Ｐｙｒｉｄｏｘａｌ ｋｉｎａｓｅ (ＰＬＫ) ｉｓ ａ ｋｅｙ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎ ｔｈｅ ｖｉｔａｍｉｎ Ｂ (ＶＢ ) ｓａｌｖａｇｅ ｐａｔｈｗａｙ. Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｆｕｒｔｈｅｒ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄ
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ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ＰＬＫ ｉｎ ｔｅａ ｐｌａｎｔ ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓꎬ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｔｅａ ｐｌａｎｔ ｇｅｎｏｍｅ ｄａｔａｂａｓｅꎬ ａｎｄ
ｕｓｉｎｇ ｌｏｎｇｊｉｎｇ ４３ ａｓ ｍａｔｅｒｉａｌꎬ ｔｈｅ ＣｓＰＬＫ ｇｅｎｅ ｗａｓ ｃｌｏｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｅａ ｐｌａｎｔ ｂｙ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃ￣
ｔｉｏｎ (ＲＴ￣ＰＣＲ). Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: Ｔｈｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ＣｓＰＬＫ ｗａｓ １ １７９ ｂｐ ｉｎ ｌｅｎｇｔｈꎬ ｅｎｃｏｄｉｎｇ ３９３ ａｍｉｎｏ
收稿日期: ２０１９－０４－０３
基金项目: 国家自然科学基金面上项目(３１６７０２９７)[Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ (３１６７０２９７)]ꎮ
作者简介: 陈星星(１９９２－)ꎬ女ꎬ安徽桐城人ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事维生素 Ｂ ６ 代谢转换研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｘｘｃｈｅｎ１１１８＠ １６３.ｃｏｍꎮ
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通信作者: 黄龙全ꎬ博士ꎬ教授ꎬ主要从事维生素 Ｂ ６ 代谢和生物多样性研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)Ｅｍａｉｌ ｌｑｈｕａｎｇ２１８＠ ａｌｉｙｕｎ.ｃｏｍꎮ
