Page 141 - 《广西植物》2022年第12期
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12 期                       王公达等: 莲种胚在温度胁迫下的逆境生理研究                                         2 1 3 1

                    表 1  莲目的基因 qRT ̄PCR 引物
            Table 1  qRT ̄PCR primers of Nelumbo nucifera target gene
                                            退火温度
            引物名称                                     基因名
                       引物序列 (5′→ 3′)        Annealing
            Primer                                   Gene
                       Primer sequence (5′→ 3′)  temperature
            name                                     name
                                             (℃ )
            ACTIN2 ̄F   GCGTTCTGCCGTCTTCTAAA  55.5    Actin 2
            ACTIN2 ̄R   CCCTCTTGGATTGTGCCTC   57.3
            CAT1 ̄F     GGAGGAGCCAATCATAGC    54.9    Catalase
                                                     isozyme 1
            CAT1 ̄R     CACATCAAGAGGGTCAAAGT  53.4    Glutathione ̄
                                                     reductaseꎬ
                                                     cytosolic
            GR ̄F       TGATGCCGAGACAGATAA    54.6    Serine/
                                                     threonine
                                                     protein
                                                     kinase
                                                     OXI1 ̄
                                                     like
            GR ̄R       ATTGTGCCTTGGTTGCT     54.3
            OXI1 ̄F     GTTTGTTAGCGGGCATTT    50.3
            OXI1 ̄R     TCCTCATATTTCCTCGTGTC  53.4
            Cu / Zn SOD ̄F  TGCTCCCGAGGATGAA  53.1    Superoxide
                                                     dismutase
                                                     [Cu ̄Zn]
            Cu / Zn SOD ̄R ATTGGGTCCAGAAAGAGG  55.2
                                                                  图 1  高温与超低温下莲子萌发的形态差异
            Mn SOD ̄F   AGGGTTAGGGTTTAGTCAT   50.9    Superoxide  Fig. 1  Morphological differences of lotus seed germination
                                                     dismutase
                                                              under high temperature and ultra ̄low temperature treatments
                                                     [Mn]
            Mn SOD ̄R   AAGAGCCTTATTGTAGTTGG  51.3
            APX ̄F      CAACCGTGAGTGAGGAAT    52.6    L ̄ascorbate  90 ℃ 和 100 ℃ 处理组的莲子生长发育减缓( 图
                                                     peroxidase
                                                     2ꎬ cytosolic  1)ꎬ其发芽率相对 CK 组分别显著降低 39%、52%
                                                               和 57%ꎬ 莲 子 种 芽 长 相 比 CK 组 分 别 显 著 降 低
            APX ̄R      AATCGGAGCATCAAAGG     50.2
            POD41 ̄F    ACACTGTCCGTTTGGGTC    54.9    Peroxidase  3.35、9.07、10.03 cmꎮ 这表明超低温处理对莲子
                                                     41 ̄like
                                                               细胞活力无显著影响ꎬ莲子在接受超低温处理后
            POD41 ̄R    TGGATGCGAAGAAGGTAA    50.3
                                                               仍能保 持 完 好 的 生 长 发 育 活 性ꎻ 莲 子 尚 能 接 受
            POD73 ̄F    TCAGCACAACTTAGACGGAACT  51.6  Peroxidase  70 ~ 80 ℃ 的高温胁迫ꎬ表现出较好的胁迫耐受能
                                                     73 ̄like
                                                               力ꎬ随着胁迫温度的升高ꎬ莲子的胁迫表现越显严
            POD73 ̄R    CCGAAGCATCACAACCCT    50.8
                                                               重ꎬ发芽率、种芽长度均有不同程度的降低ꎮ 由于
            Rab18 ̄F    ATGATGGACAAGGTGGAA    55.6    dehydrin
                                                     DHN1 ̄     在 90 ℃ 和 100 ℃ 胁迫处理下ꎬ表现出显著变化ꎬ
                                                     like
                                                               因此选定 CK( 常温处理)、80 ℃ 和 100 ℃ 进行胁
            Rab18 ̄R    TAGCTTCTCCTTGATCTTG   52.9
                                                               迫生理评价ꎮ
                                                               2.2 高温与超低温处理下莲种胚的形态指标测定
            2  结果与分析                                               由图 3 可知ꎬ CK 组和 80 ℃ 处理组莲种胚的
                                                               相对电导率在吸水萌发 18 h 分别显著下降 38%和
            2.1 高温与超低温处理下莲种胚的逆境形态观测                            20%ꎬ而 100 ℃ 处理组莲种胚相对电导率在吸水萌
                 超低温( -80 ℃ 和-196 ℃ ) 与高温 70 ℃ 胁迫              发期间持续保持在 80%以上的较高水平ꎬ仅在 12
            处理对莲子的生长发育没有显著影响ꎬ其发芽率                              h 和 24 h 时有小幅下降ꎮ CK 组、80 ℃ 和 100 ℃ 处

            与种芽长相比 CK 组无明显变化(图 2:Aꎬ B)ꎻ80、                     理组莲种胚的含水量在 18 h 均出现显著上升ꎬ对
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