Page 180 - 《广西植物》2023年第6期
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1 1 6 6 广 西 植 物 43 卷
25923) 和铜绿假单胞菌( ATCC 27853) ꎮ 抽取供
试菌液(1×10 CFUmL ) 200 μL 置于 LB 培养
 ̄1
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基中ꎬ通过经典的圆盘扩散试验评估 3 种精油的
抗菌敏感性( Rota et al.ꎬ 2008) ꎮ 用 等 量 DMSO
制备阴性对照ꎬ用庆大霉素作阳性对照ꎮ 37 ℃ 下
孵育 24 h 后ꎬ通过测量抑菌圈的大小来评估抑菌
活性ꎮ
1.3.4.2 最低抑菌浓度(MIC) 的测定 采用肉汤微
量稀释法测定精油对供试菌的 MIC( Zhang et al.ꎬ
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2017)ꎮ 试验菌悬液用无菌生理盐水调至 1 × 10
CFUmL ꎮ 不同部位精油在 DMSO 中采用 2 倍
 ̄1
稀释法配制ꎬ加入 LB 肉汤培养基中ꎬ得到 ( 1 ~
32)μgmL 的最终浓度ꎮ 将 20 μL 菌悬液转移
 ̄1
到 96 孔培养板上ꎮ 阳性对照品和阴性对照品分
别用相同体积的庆大霉素溶液和空白溶液制备ꎬ
不加供试品ꎮ 37 ℃ 下孵育 24 hꎮ MIC 定义为无肉
眼可见菌生长的测试样品的最低浓度ꎮ
1.4 数据处理
利用峰面积归一化法对其挥发性成分进行定
量分析( 魏婧等ꎬ2022)ꎮ 所有数据均以 3 次重复
测量的平均值±标准差表示ꎮ
2 结果与分析
2.1 化学成分分析
苦橙不同部位挥发油经 GC ̄MS 分析后ꎬ得到
图 1 的总离子流图ꎮ 对分离出的各挥发性成分
采用 NIST17.L 标准谱库计算机检索进行定性分
析ꎬ经质谱解析ꎬ苦橙 3 个部位中共鉴定出 94 种
挥发性成分ꎬ其中叶 34 种、花 32 种、幼果 69 种ꎮ
苦橙不同部位挥发油的化学成分有一定差异ꎬ
叶和花中含量最高的均是芳樟醇ꎬ分别为 30.51%、
57.59%ꎻ幼果中含量较高的有 d ̄柠檬烯(25.55%) 图 1 苦橙叶挥发油(A)、花挥发油(B)、幼果
和 γ ̄萜品烯(10.48%)ꎮ 苦橙叶挥发油中醇类化合 挥发油(C)的 GC ̄MS 总离子流图
物含 量 最 多ꎬ 占 总 化 学 成 分 的 55. 37%ꎬ 酯 类 占 Fig. 1 GC ̄MS total ion current chromatograms of the
22.71%ꎬ烯类占 20. 25%ꎻ主要化学成分有芳樟醇 essential oils from leaves (A)ꎬ flowers (B) and
( 30.51% )、 α ̄松 油 醇 ( 14.78% )、 甲 酸 芳 樟 酯 young fruits in Citrus aurantium var. amava (C)
(11.60%)、橙花醇(8.56%)、3 ̄蒈烯(7.39%)、 β ̄蒎
烯(4.45%)等ꎮ 苦橙花挥发油中醇类化合物成分最 发油中烯类成分最多ꎬ占 75.43%ꎬ醇类占 17.31%ꎬ
多ꎬ占总化学成分的 65.70%ꎬ其次是烯类占30.81%ꎬ 酯类占 1.31%ꎻ主要化学成分有 d ̄柠檬烯(25.55%)、
酯类占 2.02%ꎻ主要化学成分有芳樟醇(57.59%)、 γ ̄萜品烯(10.48%)、γ ̄多烯(4.05%)、桧烯(3.66%)、
d ̄柠檬烯(16.15%)、3 ̄蒈烯(5.35%)、桧烯(4.36%)、 3 ̄蒈烯(3.25%)等ꎮ 表 1 结果表明烯类成分是苦橙
α ̄松油醇(3.32%)、β ̄蒎烯(3.26%)等ꎮ 苦橙幼果挥 幼果区别于叶、花的特异性成分ꎮ