Page 164 - 《广西植物》2023年第7期
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1 3 3 2                                广  西  植  物                                         43 卷
                                                 表 3  4 对 SSR 引物信息
                                        Table 3  Information of four pairs of SSR primers
                  引物               正向引物序列(5′ ̄3′)                  反向引物序列(5′ ̄3′)                 退火温度
                 Primer        Forward primer sequence (5′ ̄3′)  Reverse primer sequence (5′ ̄3′)  Annealing temperature (℃ )

                RCM1634       TCAAGTTAAGTAGTGGGACATGACA        CAAAGTCATGCTCGATTAGGC             59.98
                RCM1639         AATACCAAACAAGCCCCATT          CATGGAATCAATTTCTGAGATCAT           58.30

                RCM1435         ACAAATCCTAAAGGGACCCG           CGAAACCCAGTTTTGGAGAA              60.18
                RCM1368      CAGTTATGTAATGCACAAATATACGA        GCTCGAATCCCATGTGTAAAA             57.47



                     表 4  与抗病性关联的分子标记                          抗性评价结果更为客观ꎮ 本研究参考枯萎病鉴定
             Table 4  Molecular markers associated with resistance  的经验ꎬ形成了根腐病的鉴定方法ꎬ即孢子浓度为
                                                                   6
                                                                            ̄1
                           皮尔逊                                 1×10 个mL 的孢子悬浮液灌根接种ꎬ以接种后的
                          相关系数      回归显著性        回归方程
                标记                                             枯萎天数划分抗性等级ꎮ 此法创造了充分的发病
                           Pearson   Regression  Regression
                Marker
                          correlation  significance  equation  条件ꎬ对材料抗性作出了客观评价ꎬ 这一结果与
                          coefficient
                                                               Shaw 等(2018ꎬ 2022) 的研究结果相似ꎮ 本研究还
                          -0.139∗    0.013∗   y = 2.772-0.553x
             RCM1634 -160 bp
                                                               证明了枯萎天数与发病率的一致性ꎬ因此ꎬ建议后
                          -0.142∗    0.012∗   y = 2.893-0.465x
             RCM1634 -190 bp
                                                               续在对大批量材料进行鉴定时ꎬ可以把枯萎天数作
                          -0.182∗∗   0.002∗∗  y = 2.782-0.806x
                                                               为评价标准ꎬ在对重点材料进行深入鉴定时ꎬ除枯
             RCM1639 -305 bp
                          -0.128∗    0.021∗   y = 2.826-0.427x
             RCM1639 -350 bp
                                                               萎天数外ꎬ还可将发病率作为参考标准ꎮ
                          -0.211∗∗   <0.001∗∗  y = 2.819-0.881x
             RCM1435 -255 bp                                       目前ꎬ国内外尚无蓖麻根腐病抗性种质筛选
                          -0.190∗∗   0.001∗∗  y = 2.991-0.626x  的报道ꎮ 因此ꎬ本研究筛选出的 130 份抗病材料
             RCM1435 -275 bp
                          -0.284∗∗   <0.001∗∗  y = 2.965-1.003x  (包含 105 份高抗)ꎬ为抗根腐病育种提供了一批
             RCM1368 -208 bp
                          -0.165∗∗   0.004∗∗  y = 2.780-0.695x  急需的基因资源ꎬ这将扭转抗源缺乏的被动局面ꎬ
             RCM1368 -255 bp
                                                               为抗病育种迈出了坚实的一步ꎮ 野生材料的抗病
              注: ∗∗表示 P<0.01ꎻ∗表示 P<0.05ꎮ
                                                               材料比率(66%) 远高于栽培材料(35%)ꎬ这可能
              Note: ∗∗ means P<0.01ꎻ∗ means P<0.05.
                                                               是因为野生材料保留了更高的遗传多样性ꎬ蕴含
            杂性ꎮ 不同抗病材料携带的抗病标记数为 0 ~ 6                          着更 多 的 抗 性 基 因 ( 毕 川 等ꎬ 2010ꎻ Xu et al.ꎬ
            个ꎬ随着标记数的增加ꎬ 抗病材料比率呈现先升后                            2019ꎬ 2021ꎻ 范伟等ꎬ2020ꎻ 陆建军等ꎬ2021)ꎮ 中
            降的趋势ꎮ 大部分抗病材料携带 3 ~ 4 个标记ꎮ 但                       国华南野生材料的抗病材料比率(69%) 高于整个
            是ꎬ携带 5 ~ 6 个标记的材料ꎬ其抗病材料比率并非                        野生材料群体ꎬ这与它们具有更高的遗传多样性
            最高ꎬ携带不同标记的材料中都有一些材料表现                              密切相关(汪亚菲等ꎬ2019ꎻAgyenim ̄Boateng et al.ꎬ
            感病(表 5)ꎬ甚至不含抗病标记的材料也有表现                            2019ꎻ 杨婷等ꎬ2020)ꎮ 而且ꎬ根腐病作为华南地
            抗病的( 表 6)ꎬ这可能是某些抗病基因之间存在                           区的主要病害ꎬ与该地区特有的自然气候土壤条
            负向互作及标记与抗病基因之间交换重组所致ꎬ                              件密不可分ꎬ由于长期的自然选择使中国华南野
            有待进一步研究ꎮ                                           生材料进化出了相应的防御机制ꎬ因此表现出较
                                                               高的抗性ꎮ 基于野生材料具有较高的遗传多样性
            3  讨论与结论                                           和抗根腐病比率ꎬ可能在枯萎病和灰霉病等其他
                                                               主要病害中ꎬ也表现出较高的抗性ꎮ 因此ꎬ野生材
                 目前ꎬ国内外尚无蓖麻根腐病统一的鉴定方法                          料不失为一个研究切入点ꎬ建议在今后的抗病育
            和评价标准ꎮ Raoof 等(2008) 和 Shaw 等(2016) 的              种中ꎬ可以加强野生材料ꎬ尤其是中国华南野生材
            研究结果表明ꎬ在蓖麻枯萎病的抗性鉴定中ꎬ采用                             料的研究和利用ꎮ
            孢子悬浮液灌根接种法更接近于大田发病条件ꎬ其                                 本研究采用的引物筛选方法ꎬ 既避免了多态
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