Page 164 - 《广西植物》2023年第7期
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1 3 3 2 广 西 植 物 43 卷
表 3 4 对 SSR 引物信息
Table 3 Information of four pairs of SSR primers
引物 正向引物序列(5′ ̄3′) 反向引物序列(5′ ̄3′) 退火温度
Primer Forward primer sequence (5′ ̄3′) Reverse primer sequence (5′ ̄3′) Annealing temperature (℃ )
RCM1634 TCAAGTTAAGTAGTGGGACATGACA CAAAGTCATGCTCGATTAGGC 59.98
RCM1639 AATACCAAACAAGCCCCATT CATGGAATCAATTTCTGAGATCAT 58.30
RCM1435 ACAAATCCTAAAGGGACCCG CGAAACCCAGTTTTGGAGAA 60.18
RCM1368 CAGTTATGTAATGCACAAATATACGA GCTCGAATCCCATGTGTAAAA 57.47
表 4 与抗病性关联的分子标记 抗性评价结果更为客观ꎮ 本研究参考枯萎病鉴定
Table 4 Molecular markers associated with resistance 的经验ꎬ形成了根腐病的鉴定方法ꎬ即孢子浓度为
6
 ̄1
皮尔逊 1×10 个mL 的孢子悬浮液灌根接种ꎬ以接种后的
相关系数 回归显著性 回归方程
标记 枯萎天数划分抗性等级ꎮ 此法创造了充分的发病
Pearson Regression Regression
Marker
correlation significance equation 条件ꎬ对材料抗性作出了客观评价ꎬ 这一结果与
coefficient
Shaw 等(2018ꎬ 2022) 的研究结果相似ꎮ 本研究还
-0.139∗ 0.013∗ y = 2.772-0.553x
RCM1634 -160 bp
证明了枯萎天数与发病率的一致性ꎬ因此ꎬ建议后
-0.142∗ 0.012∗ y = 2.893-0.465x
RCM1634 -190 bp
续在对大批量材料进行鉴定时ꎬ可以把枯萎天数作
-0.182∗∗ 0.002∗∗ y = 2.782-0.806x
为评价标准ꎬ在对重点材料进行深入鉴定时ꎬ除枯
RCM1639 -305 bp
-0.128∗ 0.021∗ y = 2.826-0.427x
RCM1639 -350 bp
萎天数外ꎬ还可将发病率作为参考标准ꎮ
-0.211∗∗ <0.001∗∗ y = 2.819-0.881x
RCM1435 -255 bp 目前ꎬ国内外尚无蓖麻根腐病抗性种质筛选
-0.190∗∗ 0.001∗∗ y = 2.991-0.626x 的报道ꎮ 因此ꎬ本研究筛选出的 130 份抗病材料
RCM1435 -275 bp
-0.284∗∗ <0.001∗∗ y = 2.965-1.003x (包含 105 份高抗)ꎬ为抗根腐病育种提供了一批
RCM1368 -208 bp
-0.165∗∗ 0.004∗∗ y = 2.780-0.695x 急需的基因资源ꎬ这将扭转抗源缺乏的被动局面ꎬ
RCM1368 -255 bp
为抗病育种迈出了坚实的一步ꎮ 野生材料的抗病
注: ∗∗表示 P<0.01ꎻ∗表示 P<0.05ꎮ
材料比率(66%) 远高于栽培材料(35%)ꎬ这可能
Note: ∗∗ means P<0.01ꎻ∗ means P<0.05.
是因为野生材料保留了更高的遗传多样性ꎬ蕴含
杂性ꎮ 不同抗病材料携带的抗病标记数为 0 ~ 6 着更 多 的 抗 性 基 因 ( 毕 川 等ꎬ 2010ꎻ Xu et al.ꎬ
个ꎬ随着标记数的增加ꎬ 抗病材料比率呈现先升后 2019ꎬ 2021ꎻ 范伟等ꎬ2020ꎻ 陆建军等ꎬ2021)ꎮ 中
降的趋势ꎮ 大部分抗病材料携带 3 ~ 4 个标记ꎮ 但 国华南野生材料的抗病材料比率(69%) 高于整个
是ꎬ携带 5 ~ 6 个标记的材料ꎬ其抗病材料比率并非 野生材料群体ꎬ这与它们具有更高的遗传多样性
最高ꎬ携带不同标记的材料中都有一些材料表现 密切相关(汪亚菲等ꎬ2019ꎻAgyenim ̄Boateng et al.ꎬ
感病(表 5)ꎬ甚至不含抗病标记的材料也有表现 2019ꎻ 杨婷等ꎬ2020)ꎮ 而且ꎬ根腐病作为华南地
抗病的( 表 6)ꎬ这可能是某些抗病基因之间存在 区的主要病害ꎬ与该地区特有的自然气候土壤条
负向互作及标记与抗病基因之间交换重组所致ꎬ 件密不可分ꎬ由于长期的自然选择使中国华南野
有待进一步研究ꎮ 生材料进化出了相应的防御机制ꎬ因此表现出较
高的抗性ꎮ 基于野生材料具有较高的遗传多样性
3 讨论与结论 和抗根腐病比率ꎬ可能在枯萎病和灰霉病等其他
主要病害中ꎬ也表现出较高的抗性ꎮ 因此ꎬ野生材
目前ꎬ国内外尚无蓖麻根腐病统一的鉴定方法 料不失为一个研究切入点ꎬ建议在今后的抗病育
和评价标准ꎮ Raoof 等(2008) 和 Shaw 等(2016) 的 种中ꎬ可以加强野生材料ꎬ尤其是中国华南野生材
研究结果表明ꎬ在蓖麻枯萎病的抗性鉴定中ꎬ采用 料的研究和利用ꎮ
孢子悬浮液灌根接种法更接近于大田发病条件ꎬ其 本研究采用的引物筛选方法ꎬ 既避免了多态