Page 109 - 《广西植物》2023年第1期
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１ 期 张汝胜等: 广西地不容非药用部位化学成分研究 １ ０ ５
利用重点实验室ꎮ 物 ４ (８.７ ｇ)ꎮ 将 Ｆｒ.２ (３.６ ｇ) 用二氯甲烷 ∶ 甲
供试菌种:所用菌种为大肠杆菌( Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ 醇 ∶ 水体系(３６ ∶ １ ∶ ０.１ꎬ１８ ∶ １ ∶ ０.１ꎬ９ ∶ １ ∶ ０.１ꎬ
ｃｏｌｉ)、金色葡萄球菌( Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ)、枯草 Ｖ / Ｖ / Ｖ)进行硅胶柱层析ꎬ得到 ６ 个馏分ꎬ即 Ｆｒ.２￣
芽孢杆菌( Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ)、尖孢镰刀菌( Ｆｕｓａｒｉｕｍ １~ Ｆｒ.２￣６ꎮ 将 Ｆｒ.２￣２(１.２ ｇ) 用二氯甲烷 ∶ 甲醇体
ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ)ꎬ均由桂林理工大学化学与生物工程学 系(１００ ∶ ０ ~ ５０ ∶ ５０ꎬＶ / Ｖ) 进行聚酰胺柱层析ꎬ得
院李海云老师课题组提供ꎮ 到 ９ 个 馏 分ꎬ 即 Ｆｒ. ２￣２￣１ ~ Ｆｒ. ２￣２￣９ꎮ 将 Ｆｒ. ２￣２￣１
仪器:ＬＣ￣ＭＳ / ＩＦ￣ＴＯＦ 液质联用色谱仪( 日本ꎬ (０.２ ｇ) 用 二 氯 甲 烷 ∶ 甲 醇 ( １ ∶ １ꎬ Ｖ / Ｖ) 进 行
岛津公司)、Ｂｒｕｃｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ Ш ＨＤ￣５００ ＭＨｚ 超导 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱 色 谱 分 离 纯 化 得 到 化 合 物 １
核磁共振波谱仪( 瑞士ꎬＢｒｕｃｋｅｒ 公司)、ＯＳＢ￣２１００ (１２.０ ｍｇ)、２ (３.０ ｍｇ)、３ (６.１ ｍｇ)、８ (５.３ ｍｇ)ꎮ
油浴锅、真空泵( 上海爱朗仪器有限公司)、ＨＨ 将 Ｆｒ.３ (８.４ ｇ) 用二氯甲烷 ∶ 甲醇体系(１ ∶ １ꎬＶ /
ＢＩＩ３６０￣Ｓ￣ＩＩ 恒 温 培 养 箱 ( 上 海 跃 进 医 疗 器 械 Ｖ)进行反复 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱色谱分离ꎬ得到 ６
厂)、ＳＷ￣ＣＪ￣１Ｆ 超净工作台( 苏净集团安泰公司)、 个馏分ꎬ即 Ｆｒ.３￣１~ Ｆｒ.３￣６ꎮ 将 Ｆｒ.３￣３ (１.５ ｇ )用二
ＴＱＺ￣３１２ 振荡器( 上海精宏实验设备有限公司)、 氯甲烷 ∶ 甲醇 ∶ 水体系(１８ ∶ １ ∶ ０.１ꎬ９ ∶ １ ∶ ０.１ꎬ
ＹＸＱ￣ＬＳ￣５０ＳＩＩ 高压灭菌锅( 上海博迅实业有限公 ８ ∶ ２ ∶ ０.２ꎬＶ / Ｖ / Ｖ)进行反复硅胶柱层析等色谱技
司医疗设备厂)ꎮ 术分离纯化ꎬ最终得到化合物 ５(４.５ ｍｇ)、６ (５.１
材料 与 试 剂: Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ ( ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ｍｇ)、７ (６.３ ｍｇ)、９ (１１.０ ｍｇ)、１０ (３.３ ｍｇ)ꎮ 化
Ｂｉｏ￣Ｓｃｉｅｎｃｅ ＡＢꎬＳｗｅｄｅｎ)、ＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ￣２０Ｐ (７５ ~ 合物 １－１０ 的化学结构如图 １ 所示ꎮ
１５０ μｍꎻＭｉｔｓｕｂｉｓｈｉ Ｃｈｅｍｉｃａｌꎬ Ｔｏｋｙｏꎬ 日本)、硅胶
(２００ ~ ３００ 目ꎬ青岛海洋化工有限公司)、聚酰胺 ２ 化合物的结构鉴定
(１００ ~ ２００ 目ꎬ江苏长丰化工有限公司)、ＴＬＣ 薄
层色谱板( 德国 Ｍｅｒｃｋ 公司)、ＬＢ 营养琼脂( 青岛 ２５
化合物 １ Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ无色固体ꎬ [ α] Ｄ ＋３６.０
１３
３
２０
高科技工业园海博生物技术有限公司)、ＬＢ 肉汤
( ｃ ０. １６ꎬ ＭｅＯＨ )ꎮ ＨＲ￣ＥＳＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ: ２２５.１４６ １
(青岛高科技工业园海博生物技术有限公司)、氨
＋
１
[ Ｍ＋ Ｈ ] ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ５００ ＭＨｚꎬ ＭｅＯＤ ) δ: ５. ８８
苄青霉素( 上海源叶生物科技有限公司)、９９％生
(１Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣４)ꎬ ５.７９ (２Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ ６.３ Ｈｚꎬ Ｈ￣７ꎬ
物技术级二甲基亚砜( ＤＭＳＯꎬ上海麦克林生化科
Ｈ￣８)ꎬ ４. ３７ ( １Ｈꎬ ｍꎬ Ｈ￣９)ꎬ ２. ５１ ( １Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝
技有限公司)、提取与分离所使用的试剂皆为实验
１６.９ Ｈｚꎬ Ｈ￣２)ꎬ ２.１６ ( １Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ １６.９ Ｈｚꎬ Ｈ￣
室常用分析纯ꎮ
２)ꎬ １.９３ (３Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ １.４ Ｈｚꎬ Ｈ￣１３)ꎬ １.２４ (３Ｈꎬ
１.２ 提取和分离
ｄꎬ Ｊ ＝ ６.４ Ｈｚꎬ Ｈ￣１０)ꎬ １.０４ (３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣１２)ꎬ １.０１
取干燥广西地不容地上部分 ４.２ ｋｇꎬ粉碎后用
１３
(３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣１１)ꎮ Ｃ￣ＮＭＲ ( １２５ ＭＨｚꎬ ＭｅＯＤ) δ:
甲醇室温浸提 ３ 次ꎬ每次 ３０ Ｌꎬ每次 １ 周ꎬ合并过
４２.４ (Ｃ￣１)ꎬ ５０.７ (Ｃ￣２)ꎬ ２０１.４ (Ｃ￣３)ꎬ １３０.０ (Ｃ￣
滤提取液ꎬ减压浓缩后得到浸膏 ４８０.１ ｇꎮ 浸膏加
４)ꎬ １６３. ９ ( Ｃ￣５)ꎬ ７９. ５ ( Ｃ￣６)ꎬ １２７. １ ( Ｃ￣７)ꎬ
蒸馏水使其混悬后依次使用石油醚、乙酸乙酯、正
１３６.９ (Ｃ￣８)ꎬ ６８.７ (Ｃ￣９)ꎬ ２４.５ (Ｃ￣１０)ꎬ ２３.８ (Ｃ￣
丁醇各萃取 ３ 次ꎬ减压回收萃取溶剂ꎬ得石油醚萃
１１)ꎬ ２３.４ (Ｃ￣１２)ꎬ １９.６ ( Ｃ￣１３)ꎮ 以上数据与文
取物 ４４.０ ｇ、乙酸乙酯萃取物 ３３.４ ｇ、正丁醇萃取
献(Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２１)报道一致ꎬ故鉴定化合物 １
物 ８０.０ ｇꎮ 取正丁醇萃取物 ７５.０ ｇ 上 ＭＣＩ 柱层析
为吐叶醇ꎮ
(７ ｃｍ × ８０ ｃｍ)ꎬ 用 甲 醇 － 水 ( ０％、 １０％、 ２０％、
２５
３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％) 进 化合物 ２ Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ无色固体ꎬ [ α] Ｄ －２７.０
２０
３
１３
行梯度洗脱ꎬ经 ＴＬＣ 薄层层析检测后合并得到 １２ (ｃ ０.１ꎬ ＭｅＯＨ)ꎮ ＨＲ￣ＥＳＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ:２４７.１２８１ [ Ｍ＋
个馏 分ꎬ 即 Ｆｒ. １ ~ Ｆｒ. １２ꎮ 将 Ｆｒ. １ ( ２６. ３ ｇ) 进 行 Ｎａ] ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ５００ ＭＨｚꎬ ＭｅＯＤ) δ:５. ８４ ( １Ｈꎬ
１
＋
Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱色谱(甲醇－水ꎬ０％ ~ １００％ꎬ每 ｓꎬ Ｈ￣８)ꎬ ４.２３ (１Ｈꎬ ｍꎬ Ｈ￣３)ꎬ ２.２３ (１Ｈꎬ ｍꎬ Ｈ￣
２０％为 １ 个 梯 度) 分 离 纯 化ꎬ 得 到 ５ 个 馏 分ꎬ 即 ４ａ)ꎬ ２.２０ (３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣１０)ꎬ １.９３ (１Ｈꎬ ｍꎬ Ｈ￣２ａ)ꎬ
Ｆｒ. １￣１ ~ Ｆｒ. １￣５ꎮ 将 Ｆｒ. １￣１ ( １６. ８ ｇ) 进 行 反 复 １.４２ (１Ｈꎬ ｍꎬ Ｈ￣２ｂ)ꎬ １.３９ ( ６Ｈꎬｓꎬ Ｈ￣１２ꎬ １３)ꎬ
Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱层析(２０％ 甲醇 －水) 得到化合 １.３０ (１Ｈꎬ ｍꎬ Ｈ￣４ｂ)ꎬ １.１６ (３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣１１)ꎮ １３ Ｃ￣
