Page 144 - 《广西植物》2023年第7期
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１ ３ １ ２ 广 西 植 物 ４３ 卷
９.１２×１０ ＣＦＵｍＬ 和 ６.４８×１０ ＣＦＵｍＬ ꎬ但均 时ꎬ原生质体产量显著下降ꎮ 因此ꎬ４ ~ ５ ｈ 为制备
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与酶解时间 ５ ｈ 无显著差异ꎻ当酶解时间大于 ５ ｈ 巨大侧耳原生质体的适宜酶解时间ꎮ
Ａ. 菌龄ꎻ Ｂ. 稳渗剂种类ꎻ Ｃ. 溶壁酶浓度ꎻ Ｄ. 酶解温度ꎻ Ｅ. 酶解时间ꎮ 不同小写字母、大写字母分别表示对 ＰＧ４６、ＰＧ７９ 的原生
质体产量有显著差异(Ｐ<０.０５)ꎮ
Ａ. Ｍｙｃｅｌｉａｌ ａｇｅꎻ Ｂ. Ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔａｂｉｌｉｚｅｒ ｔｙｐｅꎻ Ｃ. Ｌｙｗａｌｌｚｙｍｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎꎻ Ｄ. Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅꎻ Ｅ. Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ
ｄｕｒａｔｉｏｎ. Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｏｗｅｒｃａｓｅ ｌｅｔｔｅｒｓ ａｎｄ ｃａｐｉｔａｌ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆｏｒ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ＰＧ４６ ａｎｄ ＰＧ７９ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ
(Ｐ<０.０５).
图 ２ 不同因素对两株巨大侧耳菌株原生质体产量的影响
Ｆｉｇ. ２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｔｗｏ Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｇｉｇａｎｔｅｕｓ ｓｔｒａｉｎｓ
２.３ 正交试验交互作用分析结果 响程度 大 小 依 次 为 菌 龄 > 溶 壁 酶 浓 度 > 酶 解 温
为探究不同因素对原生质体制 备 的 交 互 影 度>酶 解 时 间ꎬ 且 各 因 素 影 响 差 异 极 显 著 ( Ｐ <
响ꎬ采用正交试验的方法ꎬ进一步探究制备巨大 ０.００１) ꎮ
侧耳原生质体的最适条件ꎮ 由表 ３ 可知ꎬ９ 种正 由表 ５ 可知ꎬ９ 种正交组合均可用于 ＰＧ７９ 的
交组合均可用于 ＰＧ４６ 的原生质体制备和再生ꎮ 原生质体制备ꎬ但部分组合不适宜其原生质体再
其中ꎬ原生质体得率最高的为组合 ２ ( 菌龄 ５ ｄꎬ 生ꎮ 其中ꎬＰＧ７９ 原生质体得率最高的为组合 ３( 菌
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溶壁酶浓度 ２.５％ꎬ０.６ ｍｏｌＬ 的甘露醇ꎬ３２ ℃ 龄 ５ ｄꎬ溶壁酶浓度 ３.０％ꎬ０.６ ｍｏｌＬ 的甘露醇ꎬ
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酶解 ４ ｈ) ꎬ原生质体产量高达 １１.２２ × １０ ＣＦＵ ３５ ℃ 酶 解 ５ ｈ)ꎬ 原 生 质 体 产 量 高 达 ７. ２８ × １０
ｍＬ ꎬ显著高于其他组合ꎮ 原生质体再生率最高 ＣＦＵｍＬ ꎬ但与组合 １ 和组合 ２ 的原生质体得率
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的为 组 合 １ ( 菌 龄 ５ ｄꎬ 溶 壁 酶 浓 度 ２. ０％ꎬ ０. ６ 无显著差异ꎮ 原生质体再生率最高的为组合 １( 菌
ｍｏｌ Ｌ 的 甘 露 醇ꎬ ３０ ℃ 酶 解 ３ ｈ) ꎬ 再 生 率 达 龄 ５ ｄꎬ溶壁酶浓度 ２.０％ꎬ０.６ ｍｏｌＬ 的甘露醇ꎬ
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１.２０％ꎮ 可 见ꎬＰＧ４６ 原 生 质 体 再 生 与 原 生 质 体 ３０ ℃ 酶解 ３ ｈ)ꎬ再生率为 ０.４５％ꎮ 但是ꎬ在原生质
制备的最适 条 件 存 在 一 定 差 异ꎮ 由 表 ３ 和 表 ４ 体最适制备条件下ꎬ原生质体再生率为 ０ꎮ 由表 ５
可知ꎬ４ 个主要因素对 ＰＧ４６ 原生质体制备的影 和表 ６ 可知ꎬ各因素对 ＰＧ７９ 原生质体制备的影响
