Page 146 - 《广西植物》2023年第7期
P. 146
１ ３ １ ４ 广 西 植 物 ４３ 卷
表 ５ ＰＧ７９ 菌株的正交试验结果
Ｔａｂｌｅ ５ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｆｏｒ ＰＧ７９ ｓｔｒａｉｎ
酶解温度 酶解时间 原生质体再生率
溶壁酶浓度 原生质体产量
组合 菌龄 Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ
Ｌｙｗａｌｌｚｙｍｅ Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｙｉｅｌｄ
Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ Ｍｙｃｅｌｉａｌ ａｇｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ６ ￣１ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ( ×１０ ＣＦＵｍＬ )
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｄｕｒａｔｉｏｎ ｒａｔｅ (％)
１ １ １ １ １ ６.９８±０.７９ａ ０.４５
２ １ ２ ２ ２ ５.６２±１.０６ａｂ ０.２０
３ １ ３ ３ ３ ７.２８±１.６９ａ ０.００
４ ２ １ ３ ２ ３.５２±０.９５ｃｄ ０.１０
５ ２ ２ １ ３ ４.４６±１.１０ｂｃｄ ０.０５
６ ２ ３ ２ １ ４.８６±０.４２ｂｃ ０.２５
７ ３ １ ２ ３ １.５６±１.１１ｅ ０.００
８ ３ ２ ３ １ ４.６８±０.８１ｂｃ ０.００
９ ３ ３ １ ２ ２.６８±０.８２ｄｅ ０.００
Ｋ１ １９.８８ １２.０６ １４.１２ １６.５２
Ｋ２ １２.８４ １４.７６ １２.０４ １１.８２
Ｋ３ ８.９２ １４.８２ １５.４８ １３.３０
ｋ１ ６.６３ ４.０３ ４.７１ ５.５１
ｋ２ ４.２８ ４.９２ ４.０１ ３.９４
ｋ３ ２.９７ ４.９４ ５.１６ ４.４３
Ｒ ３.６６ ０.９１ １.１５ １.５７
主次顺序
Ａ>Ｄ>Ｃ>Ｂ
Ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｏｒｄｅｒ
最优水平
Ａ１ Ｂ３ Ｃ３ Ｄ１
Ｏｐｔｉｍａｌ ｌｅｖｅｌ
最优组合
Ａ１Ｂ３Ｃ３Ｄ１
Ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ
表 ６ ＰＧ７９ 菌株的方差分析 著ꎬ但溶壁酶浓度、酶解温度和酶解时间对两菌株
Ｔａｂｌｅ ６ Ｖａｒｉａｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＰＧ７９ ｓｔｒａｉｎ 的影响程度存在差异ꎮ 推测是由于巨大侧耳的遗
Ⅲ型 传多样性丰富ꎬＰＧ４６ 和 ＰＧ７９ 菌株间产生了遗传
平方和
来源 自由度 分化(Ｄａｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１９)ꎮ
Ｓｕｍ ｏｆ Ｆ Ｐ
Ｓｏｕｒｃｅ ｄｆ
ｓｑｕａｒｅｓ 菌株的生理状态和不同的酶解条件ꎬ对食用
ｏｆ Ｔｙｐｅ Ⅲ
菌原生质体产量和质量均具有不同程度的影响
菌龄 Ｍｙｃｅｌｉａｌ ａｇｅ １０２.８０５ ２ ４８.８９８ ０.０００
(孙佳星等ꎬ２０２２)ꎮ 在本研究中ꎬ菌丝体的菌龄ꎬ
溶壁酶浓度
８.２８４ ２ ３.９４０ ０.０２８
Ｌｙｗａｌｌｚｙｍｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ 是影响巨大侧耳原生质体制备的最主要因素ꎮ 不
酶解温度 同时期的菌丝体ꎬ细胞壁厚度和生长活力不同ꎬ对
Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ １０.００５ ２ ４.７５９ ０.０１５
ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ 溶壁酶的敏感性也存在差异( 张文学等ꎬ２００３)ꎮ
在菌丝生长前期ꎬ细胞壁较薄ꎬ更易被溶壁酶降
酶解时间
１９.２４９ ２ ９.１５６ ０.００１
解ꎬ随着菌龄的继续增加ꎬ细胞壁逐渐加厚且产生
Ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｄｕｒａｔｉｏｎ
误差 Ｅｒｒｏｒ ３７.８４４ ３６
的次生物质增多ꎬ酶解效率降低ꎬ进而导致原生质
总计 Ｔｏｔａｌ １ １４１.４６０ ４５
体产量下降(Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０００)ꎮ 本研究前期对巨
大侧耳菌丝体培养时ꎬ发现第 ５ 天正是巨大侧耳
各影响因素间存在一定的交互作用ꎬ在进行条件 菌丝体生长的指数生长期ꎬ此时细胞壁厚度和菌
优化时不可忽略ꎮ Ｆ￣ｔｅｓｔ 分析显示ꎬ菌丝体菌龄对 丝体活力均适宜ꎬ可作为原生质体制备的理想时
两株巨大侧耳菌株的原生质体产量影响均为极显 期和材料ꎮ
