Page 154 - 《广西植物》2024年第7期
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原料成本ꎬ有利于缓解罗汉果产业的瓶颈问题ꎮ 达变化动态监测方法ꎬ通过统计分析二者不同发
市售罗汉果为圆形或长圆形ꎬ按果实横径划 育时间平均温度、昼夜温差、有效积温、光照强度、
分不同等级定价销售ꎬ并以罗汉果苷Ⅴ含量作为 空气湿度、果实横径、果实纵径、单果重、罗汉果苷
主要内在品质指标ꎮ 罗汉果外在品质研究发现ꎬ 含量、品质性状基因表达水平差异ꎬ拟探讨以下问
果实横径、纵径和单果重在授粉后 25 d 内快速增 题:(1)夏季和秋季授粉果实品质存在什么差异ꎻ
加ꎬ30 d 后基本不变(闫海锋ꎬ2011)ꎮ 罗汉果内在 (2)二者品质差异受何气候因子影响ꎻ(3) 气候影
品质研究发现ꎬ高甜度罗汉果苷由无味或苦味的 响因子如何调控基因表达引发二者品质差异ꎮ 以
低糖苷逐步转化而来ꎬ通常果实 30 d 以前主要含 指导选择罗汉果适宜种植区ꎬ制定高产优质种植
罗汉果苷Ⅰ和罗汉果苷ⅡEꎬ30 ~ 50 d 罗汉果苷ⅡE 技术ꎬ提高罗汉果品质ꎬ解决罗汉果甜味剂提取原
逐渐减少相继转化为罗汉果苷Ⅲ、罗汉果苷Ⅳ和 料成本高的问题ꎬ也为今后高甜苷品种选育提供
罗汉果苷Ⅴꎬ50 ~ 70 d 罗汉果苷Ⅴ快速积累接近最 理论依据ꎮ
高含量、罗汉果苷ⅡE与罗汉果苷Ⅲ则减少消失ꎬ
70 ~ 85 d 成熟时主要含具甜味的罗汉果苷 V(李典 1 材料与方法
鹏等ꎬ2004ꎻ卢凤来等ꎬ2010ꎻ莫长明等ꎬ2014)ꎮ 低
糖 苷 合 成 积 累 由 SgSQE、 SgCDS、 SgEPH1 ̄3、 1.1 材料
SgCYP102801 和 SgUGT85 ̄269 ̄1、4 基因在幼果表 以主栽“青皮果” 品种为试验材料ꎬ2022 年 3
达控制ꎬ其转化为罗汉果苷 V 则由 SgUGT94 ̄289 ̄ 月 20 日移栽ꎬ按常规方法种植于广西壮族自治区
1、2、3 基因在果实发育中后期表达控制( Itkin et 桂 林 市 龙 胜 县 龙 胜 镇 双 洞 村 ( 110° 02′ 57″ E、
al.ꎬ 2016)ꎬ然而这些基因调控罗汉果苷 V 合成的 25°46′06″ N)ꎮ 试验基地处于海拔 251 m 的亚热
昼夜表达规律仍不清楚ꎮ 白先达等(2009a、b) 利 带季风气候区ꎬ年平均温度 18.1 ℃ ꎬ极端最高温
用历史气象数据和生长调查资料分析不同产区气 39.5 ℃ ꎬ极端最低温 - 4.8 ℃ ꎬ年降雨量 1 500 ~ 2
候因子 对 罗 汉 果 生 长 影 响 显 示ꎬ 山 区 大 中 果 率 400 mmꎬ无霜期 314 dꎮ
(78%)高于温度偏高、光照偏强、湿度偏低的水田 1.2 仪器与试剂
(73%)ꎬ年均气温 17 ~ 18 ℃ 、7 月和 8 月平均温度 1.2.1 仪器 HPLC 1260( 美国安捷伦科技有限
26.8 ~ 27.1 ℃ 、日照时数1 400 h、空气湿度 80%的 公司 ) 、 4000 QTRAP ® LC ̄MS / MS ( 加 拿 大 AB
主产区果实总糖含量高于平均温度和日照时数偏 Sciex 公司) 、Poroshell 120 SB ̄C18 色 谱 柱 ( 美 国
高、空气湿度偏低的推广区ꎬ并以气候因子对开花 安捷伦科技有限公司) 、99 立式 ̄86 超低温冰箱
坐果和果实大小的影响为标准划分罗汉果最适 ( 美 国 Thermo 公 司 ) 、 Veriti 96 ̄Well Thermal
宜、适宜和不适宜种植区ꎮ 罗汉果引种到产区外 Cycler PCR 仪 ( 美 国 Thermo 公 司) 、 Light Cycler
的印度ꎬ其罗汉果苷 V 含量低并且其快速积累期推 480 Ⅱ 荧 光 定 量 PCR 仪 ( 瑞 士 Roche 公 司 ) 、
迟到 70~80 d(Shivani et al.ꎬ 2021)ꎮ 但是ꎬ这些调 220R 高 速 冷 冻 离 心 机 ( 德 国 mikro 公 司 ) 、
查分析结果仍需实验印证ꎬ温度、光照和湿度各自 MX2301A 温 湿 度 计 ( 美 国 ONSET 公 司 ) 、
对罗汉果形态大小、总糖含量和罗汉果苷 V 含量的 MX2202 温 度 光 照 计 ( 美 国 ONSET 公 司) 、 四 用
影响效应仍不清楚ꎬ并且未采用罗汉果苷 V 含量作 数显电 子 游 标 卡 尺 ( 桂 林 量 具 刃 具 有 限 责 任 公
为评判标准划分的罗汉果适宜种植区(白先达等ꎬ 司) 、JJ500 电子天平( 常熟市双杰测试仪器厂) ꎮ
2009bꎻ谢晓燕等ꎬ2020)也有待完善ꎮ 此外ꎬ不同生 1.2.2 试剂 标准物质罗汉果苷 IA(MIA)、罗汉果
长季节气候因子对罗汉果内外品质的影响尚未见 苷 IE(MIE)、罗汉果苷ⅡE( MⅡE)、罗汉果苷ⅢE
报道ꎬ亟须探明不同生长季节气候因子如何通过诱 (MⅢE)、罗汉果苷Ⅲ( MⅢ)、罗汉果苷ⅣA( MⅣ
导基因表达而影响罗汉果的内外品质ꎮ A)、罗汉果赛门苷 I( MSI)、罗汉果苷 V( MV)、11 ̄
鉴于此ꎬ本文开展不同季节授粉罗汉果内外 O ̄罗汉果苷 V(11 ̄O ̄MV) 购于成都曼思特生物科
品质受温度、光照、湿度影响及其分子调控机制研 技有限公司ꎮ 色谱级甲酸、甲醇、乙腈、己烷购于
究ꎬ依托夏季和秋季授粉果实ꎬ采用生境气候因 美国 Emerson Fisher 公 司ꎮ CW0581M 超 纯 RNA
子、果实形态大小、罗汉果苷 V 合成积累、基因表 提取试剂盒购于北京康为世纪生物科技有限公